兔脂肪干细胞的分离培养鉴定及诱导分化研究

目的:分离培养家兔脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs),观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法:无菌条件下切取家兔腹股沟处脂肪组织,0.25%Ⅰ型胶原酶消化,分离培养原代细胞,取第3代ASCs做实验,用HE染色观察细胞形态,MTT比色法测定细胞生长曲线;用流式细胞仪检测其细胞表面标志物;用油红O染色和茜素红染色鉴定成脂和成骨诱导分化。结果:从家兔脂肪组织中分离获得的ASCs形态为长梭形,成纤维细胞样,生长活力旺盛,具有较强的增殖能力;流式细胞仪分析CD29呈阳性表达,CD31呈阴性表达;成脂诱导的细胞油红O染色阳性,成骨诱导的细胞茜素红染色阳性。结论:本实验分离培养的细胞为ASCs,具有成脂和成骨分化潜能。     

脂肪来源干细胞在自体脂肪移植中作用的研究进展

随着社会的进步,美容外科的蓬勃发展,利用自体脂肪移植进行软组织填充已经成为最热门的研究领域之一.自体脂肪移植可用来填充各种先天或后天形成的组织缺损,例如乳腺癌切除术后的乳房重建、颜面萎缩等,也可用于各种美容手术,如隆乳、隆颏等.目前,自体脂肪移植是软组织填充的首选材料,因为自体脂肪具有来源丰富、取材方便,无需手术切口及无异物导致的并发症等优点.自体脂肪移植术和脂肪来源干细胞移植在整形外科领域有着广泛的应用前景.现将自体脂肪移植以及脂肪来源干细胞在自体脂肪移植中的作用的研究进展综述如下.     

近端胃癌根治间置空肠术的应用效果观察

目的 探讨全胃切除术与近端胃癌根治间置空肠术对进展期近端胃癌（肿瘤直径＞3cm）患者术后并发症、营养状况和生活质量的影响.方法 回顾性分析2002年1月-2008年12月南方医科大学中西医结合医院收治的近端胃癌患者85例,其中全胃切除术（对照组）40例,近端胃癌根治间置空肠术（试验组）45例,调查术后营养状况、反流性食管炎发病率、术后胆囊结石发病率、5年生存率和术后生活质量.结果 试验组和对照组5年生存率差异无显著统计学意义[55.6％（25/45）vs52.5％（21/40）,P＞0.05].试验组术后反流性食管炎发病率显著低于对照组[11.1％（5/45）vs22.5％（9/40）,P=0.042].试验组术后5年累计胆囊结石发病率显著低于对照组[13.3％（6/45）vs17.5％（7/40）,P=0.038].试验组术后血红蛋白、白蛋白、维生素B12和铁蛋白均显著高于对照组[（142.2±8.6）vs（128.4±8.4）,（41.3±5.8）vs（35.9±3.8）,（271.5±49.7）vs（184.5±24.6）,（220.2±59.7）vs（170.2±27.6）,P值分别为0.036、0.024、0.032、0.026].试验组患者术后饮食情况和劳动情况均显著优于对照组（P值分别为0.042和0.048）.结论 近端胃癌根治间置空肠术不影响进展期近端胃癌（肿瘤直径＞3cm）患者5年生存率,可以降低术后反流性食管炎和胆囊结石发病率,改善术后营养状况和生活质量.     

自体外周血干细胞移植治疗糖尿病足8例

我院自2005年6月起开展了自体外周血干细胞移植治疗糖尿病足的临床研究,现将临床疗效报告如下.     

C57BL/6-gfp与C57BL/6小鼠脂肪互换移植模型的建立

本实验旨在建立一种便于观察、易于检测、临床模拟性好的脂肪移植动物模型. 一、材料和方法 1.材料:实验选用清洁级近交系C57BL/6-gfp (GFP)和C57BL/6( B6)小鼠各16只,雄性,购于第四军医大学动物中心,动物满8周龄后即可用于实验.     

螺旋型鼻肠管非注气法主动置管在急性胰腺炎患者中的应用

临床营养支持包括肠外营养（ parenteral nutrition, PN）和肠内营养（ enteral nutrition, EN）两种途径,随着营养模式的认识与变迁,肠内营养的治疗越来越受到重视和普及［1］。近年来随着对急性胰腺炎（ acute pancreatitis, AP）相关营养支持技术的深入研究发现,早期肠内营养能保护肠黏膜屏障,减少肠道细菌和内毒素移位,减少体内炎症细胞因子的分泌,降低全身炎症反应及继发感染,改善营养状态,成为AP患者有效的治疗方法之一［2-3］,如何早期建立EN通道实施空肠营养,成为我们关注的问题。目前,常用的建立EN通道方法有内镜下经鼻放置、透视下经鼻放置、术中放置、内镜下经皮胃胃造口、床边电磁导航下经鼻放置、床边放置等,而床边放置具有患者耐受性好,费用低,操作简便,风险低,不用来回搬动患者等优点。床边放置又有被动等待法、主动置管法等,笔者采用随机对照研究,对2013年3月1日至2015年7月31日入院的AP患者通过注气法主动置管法及非注气法主动置管法在置管成功率、腹胀等方面进行了比较,现报道如下。     

不同类型气管导管在小儿唇腭裂手术中的应用研究

目的 探讨小儿唇腭裂手术的最佳气道管理办法以减少并发症.方法 本研究为回顾性分析前瞻性研究.回顾性分析2010年5月至2011年8月石家庄市第一医院小儿唇腭裂手术421例的麻醉处理.年龄0.5～2.5岁,体重5～14 kg,气管导管型号为3.5～4.5 mm(内径).将全部病例按使用不同类型气管导管分为2组,“U”型气管导管组(Ⅰ组,n=250),加强型气管导管组(Ⅱ组,n=171).术前均行感冒评分.观察并记录患儿术前感冒评分、体重、手术时间、麻醉呼吸道不良事件发生率,并进行统计分析.结果 Ⅰ、Ⅱ组患儿术前感冒评分、体重、手术时间差异无统计学意义(P＞0.05).麻醉呼吸系统不良事件导管打折发生率Ⅰ组明显高于Ⅱ组(P＜0.05),其余呼吸系统不良事件发生率2组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论　使用加强型气管导管应用于体重5 ～14 kg小儿唇腭裂手术,术中气道管理优于使用“U”型气管导管,麻醉安全性更高.     

闭塞膈下动脉对兔膈肌运动功能影响的实验研究

目的 观察膈下动脉闭塞后缺血对膈肌生理特性的影响.方法 结扎闭塞新西兰大白兔右侧膈下动脉,制作兔右侧膈肌缺血的模型,并随机分为3组,分别于24 h、48 h和1周后观察双侧膈肌运动变化和病理变化.结果 ①闭塞右侧膈下动脉24 h、48 h,右侧膈肌运动幅度分别为(3.53±0.76)mm、(3.44±0.70)mm;与术前和术后左侧运动幅度及术前右侧膈肌运动幅度相比明显减低,差异均有统计学意义(P＜0.05).②闭塞右侧膈下动脉24 h、48 h,右侧膈肌运动幅度与膈肌缺血区重量有相关性(r24 h =-0.874;r48 h=-0.906).③1周后观察膈肌运动功能均恢复正常.结论 闭塞膈下动脉可以引起膈肌可逆性缺血改变,但不会引起膈肌大面积坏死及膈肌运动功能的永久损伤.     

氟比洛芬酯注射液在肛门手术后的临床应用

目的 研究氟比洛芬酯注射液对在肛门手术后疼痛的止痛效果。方法 肛门手术24h后大便诉肛门度疼痛患者60例，随机分两组：Ⅰ组静脉注射氟比洛芬酯注射液（凯纷）50rag；Ⅱ组肌注曲马多100mg。观察用药后疼痛程度随时间的变化、疼痛缓解程度、止痛效果出现时间、疗效持续时间以及不良反应的发生情况。结果显示从15min时点开始，两组均出现止痛效果，30min止痛效果达到最大效果，两组比较无显著性差异（P〉0．05）。疼痛缓解程度两组比较无显著性差异（P〉0．05）。疼痛缓解持续时间达5h以上，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论氟比洛芬酯注射液用于肛门术后急性疼痛的镇痛，起效快，镇痛效果与曲马多相似，但持续时间长，更安全可靠。     

人脂肪干细胞的体外培养鉴定及分化特性

目的：在体外从脂肪块中分离出脂肪干细胞（adipose derived stem/stromal cells,ASCs）,对其进行形态观察、干细胞鉴定、增殖和分化能力检测。方法：将腹部取皮术的皮下脂肪利用胶原酶消化法,进行体外分离培养,取第3代的细胞进行细胞爬片HE染色、流式鉴定、MTT、细胞周期检测等,利用成脂和成骨培养液诱导,油红O和茜素红染色鉴定诱导结果。结果：原代培养第1次换液时细胞多呈多角形和短梭形,第3代ASCs细胞爬片HE染色显示形态多为长梭形,呈漩涡状生长;流式鉴定显示：CD29＋,CD31-,CD34-,CD44＋,CD45-,CD49＋,CD106-,CD133-;MTT显示ASCs生长增殖活性强;细胞周期检测结果显示：G1=86.8%,G2=8.77%;成脂诱导后油红O染色阳性,对照组为阴性;成骨诱导后茜素红染色阳性,对照组为阴性。结论：人ASCs具有贴壁生长、多向分化以及干细胞表型等特征,且生长增殖活性强,是一种很有应用前景的间充质干细胞。