省军级干部血脂、血糖、肌酐、尿素氮检测分析

本文对 5 4例省军级干部进行血脂、血糖、肌酐、尿素氮检测 ,其结果与 93例健康体检者的结果进行统计分析。1　对象与方法1 .1　调查对象选取来我院进行健康检查的内蒙古地区省、军级干部共 5 4例 ,其中男 5 3例 ,女 1例 ,年龄 60～78岁 ,健康对照组选取来我院进行健康检查的体     

看门诊工作现状论门诊质量建设

门诊诊疗工作质量是医院服务质量直接体现。“看好病、好看病”已成为患者就诊的共识。为了研究如何“为患者提供一个相当自己‘母亲’一样好的服务质量”，我们对军区总医院门诊患者进行了一次问卷调查，针对当前医院门诊工作现状进行了分析，并提出了改进措施。     

小檗碱对大鼠阴茎海绵体磷酸二酯酶5mRNA水平的影响

目的 :检测大鼠阴茎海绵体中磷酸二酯酶 5 (PDE5 )mRNA的表达 ,进而探讨小檗碱 (berberine ,Ber)的分子作用机制。　方法 :通过逆转录酶链反应 (RT PCR)技术检测大鼠阴茎海绵体中PDE5mRNA的表达。　结果 :大鼠阴茎海绵体中有PDE5A1和PDE5A2mRNA的表达 ,以PDE5A2为主要的异构酶。与内参照 β 肌动蛋白相比 ,对照组、Ber孵育 1和 3h组的PDE5A1及PDE5A2基因mRNA的相对表达量分别为 :0 .2 2± 0 .0 2 ,0 .4 1± 0 .0 1 ;0 .1 5± 0 .0 1 ,0 .34± 0 .0 2 ;0 .1 0± 0 .0 1 ,0 .1 2± 0 .0 1。与对照组相比 ,PDE5A1、PDE5A2的mRNA表达 ,在Ber孵育 1h组降低了 32 %和 1 7%,3h组降低了 5 5 %和 71 %,其中尤以应用Ber 3h后PDE5A2的mRNA减少最为明显 (n =5 ,P <0 .0 1 )。　结论 :Ber对NO cGMP信号通路的下游关键酶 (PDE5 )具有一定的调控作用 ,尤其是抑制PDE5A2的mRNA表达 ,为Ber治疗勃起功能障碍的分子机制之一。     

Meta分析精子DNA完整性对辅助生殖结局的预测价值

目的系统评价精子DNA完整性对于宫腔内人工授精(IUI)、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)以及卵胞浆内单精子注射(ICSI)等不同助孕方式妊娠结局的预测价值。方法采用电子检索和手工检索相结合的方式进行文献初检,检索Medline(via.OvidSP)、PubMed、Embase、CNKI、VIP等数据库,检索时限为建库至2016年3月,并手工检索相关会议资料。由2名评价者依据纳入与排除标准独立筛选研究文献、提取数据资料和评价方法学质量,然后采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入27篇队列研究,合计7 302个周期。Meta分析结果显示:DNA碎片指数(DFI)的增加会降低IUI临床妊娠率(RR=0.22,95%CI:0.12-0.41)、IVF受精率(RR=0.90,95%CI:0.86-0.95)、IVF优质胚胎率(RR=0.86,95%CI:0.82-0.91)、IVF临床妊娠率(RR=0.86,95%CI:0.76-0.98),并增加IVF流产率(RR=1.65,95%CI:1.05-2.57)和ICSI流产率(RR=1.57,95%CI:1.03-2.39)(P均0.05);且DFI的检测方法中只有TUNEL法能预测IVF的临床妊娠率(RR=0.74,95%CI:0.55-0.99,P0.05),DFI对ICSI受精率、优质胚胎率、临床妊娠率的影响无统计学意义(P0.05)。结论 DFI水平高低对辅助生殖治疗的结局有一定的预测价值,DFI较高时选择ICSI的治疗方式可能更优于常规的IVF。但因纳入研究数量和质量的限制,上述结论还需开展更大规模流行病学研究和临床研究进一步验证。     

灵活应用多种教学法提高药理学教学质量

药理学是连接基础与临床的一门桥梁课,其内容丰富而庞杂,涉及多门基础与临床知识,整体系统性不强,需要进行大量的记忆,被普遍认为是教师难教、学生难学的一门课程。在药理学课堂教学中灵活应用趣味教学法、课堂讨论法、比较法、归纳总结法等方法,取得了较好的教学效果。     

腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因和增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

目的:研究腺病毒载体介导人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的表达。方法:体外培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,并对培养的细胞进行成骨、成脂肪诱导分化和细胞免疫表型鉴定;用Pme I线性化后去磷酸化的pShuttle-heNOS-EGFP转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ 5183,使其在细菌内发生同源重组,获得阳性重组质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定正确后经PacⅠ酶切,转入AD 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。用重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP对MSCs进行转染,并用荧光显微镜及免疫荧光染色法观察转染细胞内EGFP和heNOS蛋白质的表达。结果:pShuttle-heNOS-EGFP与pAdeasy-1在BJ 5183中成功地发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒在AD 293细胞中包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。经基因转染的MSCs中高表达heNOS和EGFP。结论:采用腺病毒载体可以将外源性的heNOS基因转染至MSCs中,并得到有效表达,且携带的EGFP标记可以直观地检测靶细胞感染和外源基因的表达情况,这将为勃起功能障碍的细胞治疗提供一条新的途径。     

PCR产物靶向克隆法构建原核表达载体pET15b-CAT

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT.方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列.以pZeoSV2( )-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增.将纯化的人CAT cDNA PCR产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b以6:1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30 min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT.重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定.结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经Xho Ⅰ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT.结论:PCR产物靶向克隆法是一种简便、高效地将PCR产物定向克隆于目标载体的方法,而无需对PCR产物进行酶切、末端抹平、载体去磷酸化及连接反应,适用于任何载体、任何插入片段和任意酶切位点.     

PCR产物靶向克隆法构建pET15b-CAT及His-tag-CAT融合蛋白的表达与纯化

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT,并表达和纯化出His-tag-CAT融合蛋白。方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列。以pZeoSV2(+)-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增。将纯化的人CAT cDNAPCR产物与经XhoⅠ和BamH Ⅰ酶切的线性化载体pET15b以6∶1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT。重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定。pET15b-CAT转化BL21(DE3)宿主菌,用IPTG诱导表达出His-tag-CAT融合蛋白,采用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析。结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT。SDS-PAGE和Western blot结果表明,转化了pET15b-CAT的宿主菌表达出了His-tag-CAT融和蛋白,经Ni2+-NTA树脂亲和层析得到了纯化的His-tag-CAT,并在体外检测到其具有特异的过氧化氢酶的活性,活性值为80.23U/g。结论:采用PCR产物靶向克隆法成功地构建了pET15b-CAT,并表达和纯化出了His-tag-CAT融和蛋白,为采用外源性CAT防治与氧化应激损伤相关性疾病奠定了基础。     

HIV病肠道免疫系统病变的研究进展

从20世纪80年代以来，科学家们一直在查明人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）的致病机理。近年来人们发现：在原发HIV感染外周血CD4＋T细胞的数量尚未出现改变时，肠道CD4＋T细胞就已经开始丢失；即使进行高效抗逆转录病毒（highly active antiretroviral therapy，HAART）治疗，外周血CD4＋T细胞开始恢复，病毒载量慢慢下降，这种情况依然存在。因此推测肠道是HIV的重要靶攻击部位。目前，研究发现，在原发HIV感染时，肠道归巢T细胞的自稳机制被首先打乱并持续存在，表现为特异性肠道归巢受体CCR9和整合索α4β7（Integrinα4β7）的显著性活化。随着T细胞的周转减少和HIV的高载量复制，导致机体的获得性免疫的完全崩溃，最终发展为艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome，AIDs）。     

口咽健康操联合引导式教育在阿尔茨海默病患者吞咽障碍康复训练中的应用

目的探讨口咽健康操联合引导式教育在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者吞咽障碍康复训练中应用的效果。方法 2014年5月-2015年8月,选择在老年精神科住院的90例AD且伴有吞咽障碍的患者为研究对象,采用随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组各45例,对照组患者采用常规的口咽部肌群训练进行康复训练,研究组患者在对照组基础上采用口咽健康操联合引导式教育进行康复训练。康复训练后4周比较两组患者吞咽障碍治疗总有效率。结果两组患者吞咽障碍治疗总有效率比较,P0.01,差异有统计学意义,研究组患者总有效率明显高于对照组。结论口咽健康操联合引导式教育能有效促进AD患者吞咽功能恢复,值得临床推广应用。