猴空泡病毒40核酸序列检测法的优化研究

目的 对通常使用的猴空泡病毒40(Simian vacuolating virus 40,SV40)核酸序列检测法进行优化,寻找敏感性高、特异性强、适用面广的SV40核酸序列检测引物.方法 以21个SV40毒株完全基因组为基础数据,用Primer Premier 5.00软件重新设计两对SV40 DNA检测引物,用Oligo 6.71软件和DNAMAN 6.0.40软件对引物参数进行分析,将分析结果与通常使用的检测引物进行比较.用不同稀释度SV40核酸序列作模板,比较4对引物检测的敏感性.分别用无菌水、Vero细胞DNA、SV40 DNA作模板检测4对引物的特异性.结果 对于21个SV40病毒株,优化引物对VP1和T的序列是保守的;对于接受号为J02400、NC_001669、AF316139和AF316141的4个病毒株,通常使用的引物对GCVP1和GCT的序列是保守的;用同一稀释度的SV40 DNA作模板,引物对VP1和T的扩增效率明显高于引物对GCVP1和GCT;在特异性检测比较中,引物对VP1和T没有出现非特异性扩增条带,引物对GCVP1和GCT在100 bp处出现非特异性扩增条带.结论 优化的SV40核酸序列检测法具有敏感性高、特异性强、检测面广、引物及其PCR产物序列保守等特点.     

下法治疗乙型脑炎40例

乙型脑炎起病急,传变快,病情多危笃.近年来,我们在西医常规处理基础上加用通腑泻热、急下存阴中药治疗本病40例,取得满意疗效.现报告如下.     

IgY的制备与应用进展

随着对鸡卵黄免疫球蛋白（ＩｇＹ）研究的逐步深入，发现它在生物学特性和制备方面具有一些独特优点，因此它已被广泛地用于抗哺乳动物蛋白的抗体制备，检验诊断和疾病防治中，本文将近年来这些方面的研究进展作一综述。     

HRSV A2株细胞低温传代适应减毒指标的初步探索

[目的]分析人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)经人二倍体KMB17细胞低温传代后培养特性的改变.[方法]将HRSV A2株病毒接种到人二倍体KMB17细胞进行低温培养传代,将不同代次的病毒经鼻腔接种豚鼠,于d 7、d 14分别取肺组织作病理切片检查、分离血清进行中和抗体检测,同时测定不同代次病毒的一步生长曲线及温度敏感性特征.[结果]豚鼠经鼻腔接种,接种原代病毒组d 14处死时体重明显较对照组轻,低温第6代组和11代组与对照组接近,3组病毒均引发豚鼠间质性肺炎.低温第6代组和11代组与原代病毒相比,一步生长曲线未发生明显改变,增殖高峰约为9-12 d.[结论]HRSV经鼻腔接种豚鼠能引起强烈的肺部感染,豚鼠可作为HRSV毒力评价的动物模型;HRSV在KMB17细胞上经低温传11代,未出现明显的减毒株特征,还需要进一步减毒.     

系统生物学的现状与展望

21世纪的生命科学将由分解走向整合，系统生物学将提供人们研究和理解复杂生命系统的新理论和新工具，这将极大推动生命科学和医学的发展。     

HCV多表位复合抗原基因表达条件的探索

目的:筛选出适合HCV多表位复合抗原基因(PCX)表达的菌株,优化表达条件,并进行目的蛋白的免疫特异性的检测.方法:将含HCV多表位复合抗原基因的重组质粒pWR450-PCX转入大肠杆菌DH5α、TOP10F’、BL21菌株中,在不同培养基中,经不同浓度IPTG诱导不同时间,表达融合蛋白(GZ-PCX),并利用患者阳性血清通过Western Blot检测其免疫特异性.结果:重组质粒在DH5α、TOP10F’菌株中均能表达有一定免疫特异性的目的蛋白,但BL21中不表达;目的蛋白在TB培养基中的表达量明显高于LB培养基.结论:在37℃,IPTG浓度为1 mM诱导3h时,目的蛋白的表达量达到峰值;所制备的抗原具有一定的免疫特异性和免疫原性.     

甲肝IgM抗体诊断试剂盒在甲肝病毒抗原检测中的应用

将HAV IgM-Ab诊断试剂盒用HAV-Ag标准品调控灵敏度后,用于检测HAV-Ag,并比较快速检测法和常规过夜法两种检测方法的测定效果,以选择在甲肝疫苗生产中,抗原检测的合适方法.经过调控灵敏度后,抗HAV IgM诊断试剂盒完全可以用来检测HAV-Ag.并可以正确评价HAV-Ag滴度,HAV感染性滴度.适用于甲肝疫苗的检定工作.     

肠道病毒及其疫苗研究进展

人肠道病毒具有高度传染性,可引起多种疾病。目前多种肠道病毒灭活疫苗、减毒活疫苗已通过安全性评价上市;亚单位疫苗、DNA疫苗、病毒样颗粒疫苗的研究已获得较好的结果。此文旨在对人肠道病毒及其流行病学特征,以及相关疫苗的研究进展做一综述。     

甲型肝炎减毒活疫苗免疫程序的探讨

５２名ＨＡＶ抗体阴性的儿童,按０、３个月免疫程序,经２针低剂量（５．５０ｌｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ）甲型肝炎减毒活疫苗免疫,于第２针接种后７天检测ＨＡＶ抗体阳转率为１００％,抗体效价ＧＭＴ值为１∶１４;全部接种儿童的ＡＬＴ均在正常范围内（２～２４μｌ）;免前ＨＡＶ抗体阳性的儿童,经２针免疫后,抗体效价增长在２倍以上