DEK基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其功能鉴定

目的：构建DEK基因的RNA干扰（ RNAi）慢病毒表达载体,并对其生物学功能进行初步检测。方法采用RNAi技术,根据DEK基因的序列,确定其有效靶序列,合成DEK基因的Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到经BamHⅠ与EcoRⅠ酶切后的小干扰RNA（ siRNA）表达载体PSIH-H1上,产生PSIH-H1-DEK慢病毒载体,筛选阳性克隆并测序鉴定。与3个包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒后感染乳腺癌细胞ZR75-1,经嘌呤霉素（ puromycin,puro）筛选2周后,收集部分细胞利用实时聚合酶链反应（ real time-PCR,RT-PCR）和Western印迹分别检验DEK在信使RNA （ mRNA ）和蛋白水平的敲低效果,并通过细胞生长实验检测DEK对人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞生长的影响。结果 PCR和DNA测序结果证实,DEK siRNA慢病毒表达载体PSIH-H1-DEK构建成功。 RT-PCR和Western印迹结果显示,构建的DEK siRNA可有效抑制DEK基因的表达,并由此建立了敲低DEK的稳定克隆。生长曲线实验表明, DEK siRNA可抑制人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞的生长。结论成功构建了DEK基因的RNAi慢病毒表达载体,感染人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞后,有效沉默了ZR75-1细胞中的DEK基因的表达,为进一步研究DEK基因在乳腺癌中的作用奠定基础。     

医学模拟教学在心血管内科的应用现状及展望

传统的临床医学实践教学常常是通过带教老师的示范及讲解让医学生通过观察和重复带教老师的操作来进行的,由于教学时间及病例分布的原因,医学生只能学习到接触过的病例,对未见到的病例只能通过教材的描述去想象,因此不能做到具体化、形象化。在真实病例上进行教学,特别是有创操作的教学,具有较高医疗风险。随着法制的健全,患者维权意识越来越高,因而学生在真实病例上进行实践学习的机会越来越     

冠状动脉介入术后肝素相关性极重度血小板减少症一例报告

第三军医大学大坪医院野战外科研究所心内科近期发现1例患者冠状动脉介入术后发生肝素相关性极重度血小板减少症,血小板仅为2×109/L(2000/mm3),检索相关资料未发现更低者,报告如下。     

安瓿折断器的制作与应用

因掰安瓿而划伤护士手的事件在临床护理操作中经常发生,已形成了一种职业性伤害.目前因出自不同厂家的不同剂量,剂型的安瓿规格千差万别,而临床最常用的安瓿规格较为固定,根据这一情况,制作了一种安瓿折断器,临床使用效果非常好,其制作方法及效果如下.     

慢病毒载体介导E6AP基因敲低乳腺癌细胞株的构建及其功能检测

目的：构建E6AP基因的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体,并检测其对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法利用RNA干扰（RNAi）技术设计并合成两条E6AP基因的siRNA,并将其与siRNA表达载体pSIH-H1连接。经过酶切和测序鉴定成功后,人胚肾细胞293T包装E6AP siRNA的慢病毒,然后感染乳腺癌细胞ZR75-1,建立敲低E6AP表达的稳定细胞株。稳定细胞株建立后通过实时定量PCR（ qRT-PCR）和Western 印迹等方法检测RNAi的干扰效果,并利用细胞生长实验检测E6AP siRNA对乳腺癌细胞生长的影响。结果 DNA测序证明,成功构建了E6AP siRNA的表达载体。实时定量PCR和Western 印迹实验证明,构建的siRNA确能有效抑制E6AP基因的表达,并建立了敲低E6AP表达的稳定细胞株。生长实验表明,E6AP siRNA可有效抑制细胞的生长。结论成功构建E6AP基因的siRNA真核表达载体,转染细胞后能有效地抑制E6AP基因的表达,且抑制细胞ZR75-1的生长。     

职业性噪声对暴露人群外周血中去甲肾上腺素及心血管系统的影响

目的研究职业性噪声对作业工人血清中去甲肾上腺素（NE）含量以及相关心血管系统指标的影响。方法选取某企业接触职业性噪声的职工130人作为噪声暴露组,另选该企业不接触噪声和其他毒物的134名职工为对照组,抽取空腹静脉血,采用酶联免疫法（ELISA）测定其外周血中NE的含量,按照《职业健康监护管理办法》进行职业性噪声暴露人群的健康检查。结果暴露组和对照组的NE含量分别为（0．1387±0．099）ng／ml和（0．1019±0．080）ng／ml,差异有统计学意义（P〈0．05）;血压、心率以及心电图异常的检出率差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论职业性噪声可引起暴露人群外周血中NE含量的升高,并可能通过此途径对心血管系统产生影响。     

一起急性二甲基甲酰胺中毒和吸入反应的调查分析

一起急性二甲基甲酰胺中毒和吸入反应的调查分析广州市职业病防治院（白云山黄婆洞，５１０４２０）罗晓丽徐尚斌麦兆生１９９５年在广州市某皮革厂发生一起急性二甲基甲酰胺（ＤＭＦ）中毒事故，现将其调查结果报告如下，以供防治参考。临床资料两例急性ＤＭＦ中毒和６例...     

微创治疗肛周脓肿合并糖尿病患者的护理

糖尿病是由于体内胰岛素分泌和作用障碍导致以高血糖为特征的疾病，它可波及全身各系统乃至发生许多致命性的并发症。糖尿病并发肛周脓肿时，手术刺激可使血糖进一步升高，其手术的风险及术后感染率都较非糖尿病高2～3倍。因此，必须在控制好血糖的前提下治疗肛周脓肿才能取得满意的疗效。     

经皮球囊二尖瓣成形术后患者血浆脑钠肽的变化意义

目的：探讨风心病二尖瓣狭窄（MS）患者经皮球囊二尖瓣成形术（PBMV）后血流动力学参数及血浆脑钠肽（BNP）的变化。方法：选择进行PBMV的MS患者22例（均为窦性心律）,PBMV术前、术后测定肺动脉平均压（MPAP）及左房平均压力（MLAP）,术前及术后1天经超声测定左房内径（LAD）,二尖瓣口面积（MVA）及二尖瓣跨瓣压差（MVPG）,另术前1NN术后5N分别取外周血以ELISA法测定血浆BNP浓度。结果：与术前相比,术后MVA明显增加（P〈0．01）,而MPAP,MLAP,LAD及MVPG则明显减小（P〈0．05或0．01）,同时BNP显著降低（P〈0．01）。结论：PBMV能显著改善患者的血流动力学,基于此BNP则降低,BNP降低对风心病MS患者PBMV术后的疗效及预后有一定的预示作用。     

开塞露改良灌肠治疗粪石梗阻的疗效观察

目的探讨开塞露灌肠治疗粪石梗阻的疗效观察。方法采用注射器连接一次性吸痰管进行注射式灌肠。结果开塞露治疗效果明显优于石蜡油,经比较差异有统计学意义(P0.05)。结论采用开塞露灌肠治疗粪石梗阻效果良好,方法简便易行,舒适性强且价格低廉。