大黄抑制鼠疫耶尔森菌的基因芯片检测

目的 研究基因组芯片检测大黄抑制鼠疫耶尔森菌分子机制的方法 .方法 使用的鼠疫耶尔森菌全基因组芯片包含4005条鼠疫耶尔森菌基囚.应用液体稀释法测定大黄对鼠疫耶尔森菌的最小抑菌浓度(MIC),基因芯片表达谱实验中,大黄作用鼠疫耶尔森菌的浓度为10×MIC,作用时间为30 min,提取并纯化鼠疫耶尔森菌总RNA,反转录合成cDNA,用Cy3,Cy5染料标记后,与鼠疫耶尔森菌全基因组芯片杂交,通过芯片扫描仪获得表达谱分析结果 .应用实时定量PCR技术对芯片结果 进行验证.结果 大黄对鼠疫耶尔森菌的MIC为0.02500 kg/L.获得了大黄作用鼠疫耶尔森菌的基因芯片表达谱.大黄作用鼠疫菌的明显差异表达基凶共有498个,上渊基闪358个,下凋基因140个.结论 应用鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片可以进行大黄抑制鼠疫耶尔森菌的分子作用机制研究.     

应用鼠疫菌全基因组芯片研究黄连抑菌机制的方法建立

目的建立一种应用鼠疫耶尔森菌全基因组芯片研究黄连对鼠疫耶尔森菌抑制作用分子机制的方法。方法应用液体稀释法测定黄连对鼠疫耶尔森菌的最小抑菌浓度（MIC）;鼠疫耶尔森菌全基因组芯片包含4005条鼠疫耶尔森菌基因。基因芯片表达谱实验中,黄连作用鼠疫耶尔森菌的浓度为10×MIC,作用时间为30min;提取并纯化鼠疫耶尔森菌总RNA;逆转录合成cDNA;Cy3、Cy5染料标记后;与鼠疫耶尔森菌全基因组芯片杂交;通过芯片扫描仪获得表达谱分析结果。应用SAM软件处理结果。结果获得了黄连作用鼠疫耶尔森菌的基因芯片表达谱。结论应用鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片可以进行黄连抑制鼠疫耶尔森菌的分子作用机制研究。     

黄桷树叶总黄酮提取物对A549细胞的保护作用研究

目的 探索黄桷树叶总黄酮的提取和初步了解提取物是否具有细胞损伤的保护作用,为黄桷树叶药用价值的研究提供依据.方法 采用乙醇浸提法,提取黄桷树叶中的总黄酮,以芦丁为标准计算提取效率.以鱼藤酮诱导A549A549人肺腺癌细胞损伤为模型,研究提取物对细胞活力、细胞形态、活性氧的产生、凋亡率的影响作用.结果 对黄桷树叶中的总黄酮,60％的乙醇的提取效率为5.02％;提取物32 mg/L可明显抑制100μg/L鱼藤酮诱导的细胞活力的降低、细胞形态的改变、活性氧的产生和凋亡.结论 乙醇浸提法能用于提取黄桷树叶中的总黄酮;提取物具有保护鱼藤酮诱导的A549细胞损伤的作用;黄桷树叶具有进一步研究开发其药用价值的潜力.     

铬还原酶T体外合成及活性鉴定

目的：克隆沙雷氏菌CQMUS2中铬还原酶T（Chromate reductase T,ChrT）的全基因,构建其原核表达载体并转化至大肠杆菌中表达蛋白,分析表达产物的活性。方法：应用PCR技术,以耐铬沙雷氏菌CQMUS2基因组DNA为模板扩增ChrT全基因,将该基因连接至表达载体pET-28a（+）并转化进大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21（DE3）表达,用酶促反应鉴定重组ChrT酶的活性和Cr（Ⅵ）还原能力,探索其最适pH和温度。结果：克隆出的ChrT全基因长为567 bp,编码188个氨基酸,分子量约20 kD;IPTG诱导10 h后,在大肠杆菌中成功表达了目的蛋白,其碱基序列和分子量与ChrT酶一致;纯化后,ChrT酶能还原酶促反应体系中的Cr（Ⅵ）,使实验组Cr（Ⅵ）含量明显低于对照组（P＝0.000）,其酶活可达997 U/L;ChrT酶的最适pH为6.5~7.5,最适温度为37 ℃。结论：ChrT酶具有Cr（Ⅵ） 还原活性,为进一步研究高效除铬基因工程菌奠定了基础。     

加替沙星体外抗菌活性研究

采用琼脂二倍稀释法测定加替沙星对651株临床分离致病菌的体外抗菌活性，并与左氧氟沙星、司帕沙星、环丙沙星、诺氟沙星、头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、万古霉素、阿米卡星、阿莫西林、哌拉西林/三唑巴坦比较。结果表明，加替沙星具有强而广谱的体外抗菌活性。对甲氧西林敏感的金葡球菌（MSSA）、表葡球菌（MSSE）、肠球菌的MIC90分别为0.125、1、16mg/L，抗菌活性为左氧氟沙星的1-2倍、环丙沙星的2-4倍，逊于第三代头孢菌素类。对肺炎克雷伯氏菌、伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌、奇异变形菌、粘质沙雷氏菌，MIC90分别为4、0.25、0.5、4.32mg/L，抗菌活性为左氧氟沙星、司帕沙星、环丙沙星的1-2倍，与第三代头孢菌素类相当。对聚团肠杆菌、阴沟肠杆菌、乙酸钙不动杆菌、铜绿假单胞菌的MIC90分别为32、32、16.4mg/L。加替沙星对革兰氏阳性、阴性菌均具强大抗菌作用。     

2012-2020年重庆市大足区手足口病时空聚集性及趋势分析

目的 分析2012—2020 年重庆市大足区手足口病(hand-foot-mouh disease,HFMD)时空聚集性,建立时间序列(ETS)模型预测其未来发展趋势,为制定防控策略提供理论依据。方法 采用描述性流行病学方法,对2012—2020年重庆市大足区手足口病监测资料和病原学检测结果进行统计分析,利用Excel 2016、ArcGIS 10.2和SPSS 19.0软件进行数据处理,计数资料采用卡方检验。结果 2012—2020 年重庆市大足区 HFMD 累计报告 5 324 例,年均发病率为 77.12/10万,重症病例10例占0.19%,死亡3例,病死率为0.06%。发病率最高的是2018年(211.84/10万),其次是2016年,2018年以后HFMD发病率有下降的趋势。9-11月为发病高峰期。交通发达、人口密集的龙岗镇(包括龙岗街道和棠香街道)发病率最高(156.83/10万)。发病人群5岁以下婴幼儿高发611例(95.6%)。男女性别比例为1.57∶1,散居儿童为主(82.32%)。病原学检测EV 71共62例(9.70%),CVA 16共124例(19.41%),其...     

耐铬(Ⅵ)粘质沙雷氏菌CM01的筛选鉴定及其铬(Ⅵ)代谢特性研究

目的 从Cr(Ⅵ)污染环境中分离筛选能耐高浓度Cr(Ⅵ)的菌株,并探究其Cr(Ⅵ)耐受和还原特性。方法 通过驯化,分离筛选高耐Cr(Ⅵ)菌株,观察其形态特征,通过16s rDNA鉴定细菌种属,药敏纸片法确定菌株的药敏情况。探究温度、pH、金属等因素对菌株除Cr(Ⅵ)能力的影响。结果 成功筛选并鉴定出一株沙雷菌CM01,其对卡那霉素、四环素、氨苄西林、庆大霉素敏感,对Cr(Ⅵ)有耐受和还原特性;CM01在Cr(Ⅵ)100mg/L的LB肉汤中,35℃~40℃、pH 6.00~7.00条件下除Cr(Ⅵ)能力最好;Hg、Cr3+、Cd、As等重金属可以抑制其生长,Cu2+可以促进其生长。结论 沙雷氏菌CM01可以耐受高浓度Cr(Ⅵ)且有良好的Cr(Ⅵ)还原能力,可运用到生物修复技术中以处理环境中Cr(Ⅵ)污染。     

葛根素对脂多糖诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用

目的:探索葛根素对脂多糖(LPS)诱导N9小胶质细胞激活的抑制作用,为其在神经退行性疾病的防治方面提供依据。方法:用MTT法检测脂多糖和葛根素对小胶质细胞的细胞毒性作用;用流式细胞术(FCM)检测葛根素对LPS诱导N9细胞内活性氧(ROS)产生的抑制作用;分别用Griess法和FCM检测细胞培养液和细胞内一氧化氮(NO)含量;用HE染色法观察LPS激活N9细胞,及葛根素恢复细胞静息状态下细胞的形态;以FCM检测细胞凋亡和细胞周期。结果:葛根素(100~200μmol/L)能使LPS激活的N9细胞,从阿米巴样的活化形状明显恢复至静息态的圆形;LPS激活的N9细胞能产生大量的NO到培养液中,葛根素(50~200μmol/L)能使NO的产生减少,其中,高浓度组(200μmol/L)与LPS模型组相比,NO从23.45±0.19μmol/L降至12.43±0.11μmol/L(P0.01)。胞内ROS检测表明:葛根素(200μmol/L)同样明显降低ROS的产生。葛根素对激活的N9细胞胞内ROS的产生具有抑制作用,高浓度组(200μmol/L)能使其恢复至对照组水平;此外,葛根素能显著抑制LPS诱导的细胞凋亡,并恢复LPS对N9细胞G0/G1期的阻滞作用。结论:葛根素具有抑制小胶质细胞激活的作用。