细胞因子Midkine融合蛋白的表达及其单克隆抗体的制备与应用

目的:克隆细胞因子midkine(MK)基因,表达其融合蛋白,制备抗MK单克隆抗体(mAb)并检测MK在肿瘤细胞中的表达。方法:利用MK基因的特异性引物,通过RT-PCR从人肾癌组织mRNA中扩增人MKcDNA分子。将其定向克隆于原核表达载体中,在大肠杆菌中表达MS2-MK融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用传统的杂交瘤技术,进行细胞融合、筛选、克隆化并制备mAb腹水。用ELISA法分析其Ig亚类,用免疫细胞化学染色法检测MK在肿瘤细胞中的表达。结果:成功地克隆出MK基因并表达了MS2-MK融合蛋白。通过免疫和筛选,获得2株分泌小鼠抗人MKmAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb的Ig亚类分别为IgG1和IgG2a。免疫细胞化学染色显示,2株mAb与人胃癌细胞株MGC803和胃癌组织呈强阳性反应。结论:在原核细胞中获得MS2-MK融合蛋白的表达,并制备出抗MK的mAb,为研究MK的生物学活性提供了条件。     

骶髂关节半脱位矫正对慢性期卒中后功能障碍恢复的影响

目的 初步探讨矫正骶髂关节半脱位对慢性期卒中偏瘫患者步行能力及平衡功能的影响。方法 选择2018年4月—2021年12月在包头市中心医院神经康复中心住院且符合入组标准的慢性期卒中偏瘫患者,对确定存在骶髂关节半脱位的13例患者进行手法矫正治疗。治疗前、治疗3周后进行Berg平衡量表评估、“起立-行走”计时测试、10米步行计时测试、Holden步行能力分级以及骨盆正位X线片检查,并进行比较。结果 存在骶髂关节半脱位的慢性期卒中偏瘫患者共11例纳入研究。按冈斯德分析系统进行骨盆正位X线片画线测量,其中髂骨ASIn7例,髂骨ASEx2例,髂骨PIIn1例,髂骨In1例。手法矫正治疗3周后,Berg平衡量表评分高于治疗前[（47.00±9.22）分vs.(37.45±11.04)分,P<0.001];“起立-行走”计时测试时间短于治疗前[（18.51±5.29）s vs.(24.94±9.50)s,P=0.003];10米步行计时测试：步行速度较治疗前变快[（53.72±25.71）cm/s vs.(43.49±24.24)cm/s,P<0.001],步长较治疗前增加[（38.37±...     

胃泌素释放肽前体融合蛋白的制备及其在肿瘤研究中的应用

目的克隆胃泌素释放肽前体(pro-GRP)基因、构建重组质粒pGEM-T-pro-GRP和表达载体PMS-31b-pro-GRP、在大肠杆菌中热诱导表达并制备融合蛋白。方法从BGC823胃癌细胞中提取总RNA,利用pro-GRP特异引物,扩增人pro-GRP分子的cDNA全长。将pro-GRP基因定向克隆于pGEM-T载体转化JM109,DNA测序鉴定基因序列。将pro-GRP基因定向克隆于原核高效表达载体PMS-31b,转化大肠杆菌POP2136经42℃热诱导表达MS2-pro-GRP融合蛋白。将融合蛋白分离纯化后,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶鉴定。结果经聚合酶链反应(PCR)扩增成功获得210bp的pro-GRP基因,目的基因序列正确。SDS-PAGE显示热诱导后表达的融合蛋白分子量约为18000。结论成功克隆pro-GRP基因,并表达和纯化了PMS-31b-pro-GRP融合蛋白,为建立pro-GRP检测方法奠定了基础。     

用噬菌体抗体库技术筛选单克隆抗体

用噬菌体抗体库技术制备单克隆抗体是近年来抗体技术中的革命性进展，本文简要介绍了我们在这方面所进行的研究工作：从乳癌细胞免疫后的小鼠脾脏细胞和接种过HBsAg疫苗的志愿者的外周血淋巴细胞扩增出k链和Fd段基因，组装到Fab段噬菌体抗体表达载体pCOMB3中,分别建立了鼠源性和人源性噬菌体抗体库，以固相化的HBsAg和乳癌细胞为抗原．通过“吸附-洗脱-扩增”富集性筛选过程获得了鼠抗人乳癌细胞和人抗HBsAg的噬菌体抗体，并通过对表达载体的改造，在大肠杆菌表达出了可溶性的Fab段,对所获得的抗体Fab段进行了特异性、亲和力以及DNA序列的分析，显示噬菌体抗体库技术是一个行之有效的抗体制备手段。     

胸腺细胞有丝分裂原反应法测定胸腺激素活性的试验

胸腺素组分5(CT-F_5)有增强小鼠胸腺细胞对Con A刺激反应的作用。根据此特点,测定了不同胸腺提取物的生物活性并与CT-F_6进行比较。本方法是以T细胞功能反应的变化判定被测样品的活性,具有客观、灵敏、取材方便等优点。     

肿瘤病人血清前筛选与分泌抗肿瘤人单抗淋巴母细胞系的建立

本文采用细胞微点PAP法选择血清对肿瘤细胞系有较强阳性反应的病例,取其引流区淋巴结细胞,在体外用EBV转化,扩增。在1例病人脾细胞,8例引流区淋巴结细胞的转化实验中,均成功地得到了转化细胞。2～3周后用细胞微点PAP法检测上清液,可检出     

非体外循环冠状，动脉旁路移植术后再次气管插管患者的护理

非体外循环冠状动脉旁路移植术（off-pump coronary arterybypass,OPCABG）是一种微创心脏外科手术,由于该术式不借助于体外循环在心脏正常跳动下完成,故可在保证手术疗效的前提下,大大减低常规体外循环下冠状动脉搭桥术所引起的心肌缺血再灌注损伤和体外循环损伤。     

心脏直视术后患者呼吸系统支持的治疗与护理

随着麻醉学、体外循环、手术技术以及围手术期监护水平的提高,许多危重症心脏病患者均可接受外科手术治疗,但这类患者术后常出现较多的呼吸系统并发症.文献报道[1]指出:心脏直视术后长时间呼吸机支持者的呼吸衰竭发生率为5％～22％,死亡率达18.5％.呼吸系统功能对手术是否获得最终的成功有非常重要的作用.因此,作为心外科的护士对患者呼吸系统的重视程度应不亚于循环系统.     

胶体金免疫层析技术检测食管癌患者血清中生存素的表达

Objective To investigate the feasibility of screening for esophageal cancer with survivin colloidal gold immunochromatographic test strip. Methods The serum samples from 158 esophageal cancer patients and 146 healthy individuals were tested with survivin colloidal gold immunoohromatographic test strips. Results 20 nm-diameter colloidal gold solution was prepared and survivin polyclonal antibodies with different concentrations were labeled to the gold particles. It showed that the optimal concentration for labeling was 12 μg/ml. The prepared survivin colloidal gold immunochromatographic strip teat showed positive rates of survivin in esophageal cancer group and control group were 51.9 % (82/158) and 15.1% (22/146) respectively (χ2 = 45.7, P < 0.05). No statistical differences were observed in age groups (between 42-54 years: 47.1%; between 56-68 years: 40.9%; between 69-81years: 63.9%, χ2= 1.11, P > 0.05), gender groups (male: 50.4%, female: 58.1%, χ2= 0.59, P > 0.05) , primary site groups (upper segment: 56.3%, middle segment: 46. 1%, lower segment: 32. 1%, χ2 = 2.64, P > 0.05), differentiation groups (well-differentiation: 56.3%, moderate differentiation: 43.2%, poor-differentiation: 32.7%,χ2= 1.63, P >0.05)and lymph node metastasis groups (with metastasis:43.3%, without metastasis:43.4%, χ2 = 0.00, P > 0.05). The sensitivity, specificity and accuracy of survivin colloidal gold immunochromatographic test strip was 51.9% (82/158), 84.9% (124/146) and 67.8% (206/304) respectively. Conclusions Survivin colloidal gold immunochromatographic test strip is fast, simple, easy-to-read. It could be used as a valuable tool for screening of high-risk patients with esophageal cancer.     

偏瘫性肩痛的治疗研究进展

偏瘫性肩痛（hemiplegic shoulder pain,HSP）又称卒中后肩痛,指在脑卒中后2～3个月发生的肩部疼痛症状,是脑卒中后的常见并发症。HSP病因复杂,治疗方法也要根据病因进行选择。药物治疗、神经电刺激、肩胛上神经阻滞、肉毒毒素注射和重复经颅磁刺激主要用于神经因素引起的疼痛;肌内效贴、矫形器和吊带主要用于机械因素引起的疼痛;针灸主要通过疏经活络、活血化瘀增加肌肉局部的血流量,从而改善疼痛症状。对于多病因造成的HSP,推荐联合治疗以达最佳效果。