长效人红细胞生成素的制备和质量控制进展

长效人红细胞生成素是一类刺激体内红细胞生成的蛋白类激素,与普通人红细胞生成素不同,其大大延长了体内半衰期,可减少注射次数,提高患者的依从性且具有更佳的疗效。此文综述了近几年长效人红细胞生成素的研究和质量控制进展。     

PEG化重组人促红素质量控制方法和标准研究

目的:建立PEG化重组人促红素质量控制方法和质量标准。方法:用正常小鼠网织红细胞计数法测定体内生物学活性,使用iCE毛细管等电聚焦电泳分析异构体,用离子色谱确定N-糖链指纹图谱,反相HPLC进行Lys-C蛋白内切酶酶切的肽图分析以及纯度测定。其余检测项目按2010年版中国药典三部方法进行。结果:建立的方法经过比较和对PEG化重组人促红素的检测,结果稳定可靠,重复性好,各指标符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和2010年版中国药典三部的要求。结论:本研究建立了一套完善的PEG化重组人促红素质量控制体系。     

第四批人凝血因子VIII国家标准品制备和标定

目的:建立经两步病毒灭活工艺制备的人凝血因子VIII国家标准品,以替代第三批人凝血因子VIII国家标准品。方法:按《中国药典》2010年版三部对人凝血因子VIII产品的生产工艺要求和质量标准,制备第四批人凝血因子VIII国家标准品(批号20100101),用WHO第七批人凝血因子VIII国际标准品(批号99/678),采用一期法进行协作标定,采用加速破坏试验进行稳定性考察。结果:批号20100101人凝血因子VIII国家标准品效价为12.1IU/支,稳定性好,其它项目指标均达到国家标准品的要求。结论:建立了符合国家标准品要求、并经病毒灭活的第四批人凝血因子VIII国家标准品。     

高效液相色谱法定量测定人纤维蛋白原中蔗糖含量

 目的 建立定量测定人纤维蛋白原中蔗糖含量的HPLC分析方法,对2010年版《中国药典》相关测定方法进行有益补充。方法 采用Waters Alliance系统、Waters 2414示差折光检测器、安捷伦Zorbax Carbohydrate Analysis色谱柱,以ACN-H₂O（70∶30）作为流动相,流速1.4 mL·min^-1,柱温30 ℃测定人纤维蛋白原中的蔗糖。并用该方法平行测定13批含有蔗糖的重组人凝血因子Ⅷ,与药典IEC-HPLC方法进行方法学比较。结果 HPLC测定蔗糖对照品的保留时间RSD (n=6)为0.17%,峰面积RSD (n=6 )为0.09%。蔗糖在低（5 mg·mL^-1)、中（10 mg·mL^-1)、高（15 mg·mL^-1)3个质量浓度的回收率分别为96.2% ,98.8% ,100.3%,平均回收率为98.4%。蔗糖在2~20 mg·mL^-1（r=1.000 0）内与峰面积呈良好的线性关系。2批人纤维蛋白原中的蔗糖含量分别为48.8,45.0 g·L^-1,均符合其40~60 g·L^-1的质量范围。平行测定的13批重组人凝血因子Ⅷ的蔗糖结果与药典IEC-HPLC测定结果的相关系数r为1.000 0,两种方法无显著性差异（P>0.05）。结论 新建HPLC测定蔗糖含量方法的准确性和精密度良好,能够规避药典IEC-HPLC色谱条件下枸橼酸和蔗糖互相干扰的问题,本法可以适用于干热病毒灭活条件下人纤维蛋白原中蔗糖检测。     

生产工艺对静注丙种球蛋白Fc段生物学功能的影响

静注丙种球蛋白(IVIG)制品Fc段在IVIG临床应用中发挥着重要的生物学功能,因而 IV IG制品Fc段生物学活性是考核制品质量的关键指标.不同的生产工艺和病毒灭活/去除工艺是否影响IVIG制品Fc段生物学功能? 现综述如下. 1 病毒灭活工艺对IVIG Fc段活性的影响     

杀病毒剂量射线照射的静脉注射免疫球蛋白的功能完整性[英]

即使静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)和其他血浆治疗制品具有良好的安全性,但仍在不断评估改良的病毒清除法,并将其应用到新的生产工艺中。通常应用γ射线照射来确保保健产品和医疗设备的无菌,但还未将其作为生物制品的病毒灭活方法。此项研究旨在检测杀病毒剂量(50kGy)的γ射线能否用于照射生产IVIG的中间产品(分级分离的血浆)而不影响纯化IgG产品的结构和功能完整性。在干冰温度下,用60Co以~5-7kGy/小时的剂量照射分级分离的血浆7.5~10小时,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测辐射造成的IgG破坏。SDS-PAGE结果表…     

重组人红细胞生成素体内外活性检测方法的比较

目的对重组人红细胞生成素 (rhEPO)体内外活性测定结果进行比较 ,说明体内外活性测定对rhEPO质量控制的意义。方法采用59Fe摄入法、网织红细胞法和ELISA法测定rhEPO制品的体内外生物学活性。结果59Fe摄入法和网织红细胞法测定结果一致 ,与rhEPO唾液酸含量具有相关性。当rhEPO唾液酸含量较低时 ,ELISA法与体内活性测定结果有较大差异。结论rhEPO体内外活性测定方法可以相互补充 ,均是保证rhEPO质量不可缺少的质控手段。     

人血白蛋白的蛋白质含量测定能力验证结果与分析

目的：对全国血液制品批签发授权药检机构及相关生产企业或单位实验室的人血白蛋白蛋白质含量检测能力进行评价。方法：选择符合要求的人血白蛋白产品作为原料进行合并、除菌、分装。制备后按照《中国药典》2015年版三部蛋白质含量（凯式定氮）测定,组织协作标定后确立指定值。均一性和稳定性监测合格后按能力验证要求发放样品。以多中心协作标定结果作为评价参加者能力验证结果的依据。结果：能力验证样品确立的指定值及其参考范围为（193.30±5.08） g·L^-1,参加本次能力验证的药检机构或企业实验室共13家,10家实验室结果为优秀,1家实验室为合格,2家实验室为不满意。整体满意率为84.6%,优秀率76.9%,不合格率15.4%。结论：国内血液制品的7家批签发授权药检机构能力验证结果均为优秀,部分企业实验室能力验证结果为满意,但也有个别实验室测定结果出现偏差,参加者应调查并改进。     

杀病毒剂量γ射线照射的静脉注射免疫球蛋白的功能完整性

即使静脉注射用免疫球蛋白（IVIG）和其他血浆治疗制品具有良好的安全性，但仍在不断评估改良的病毒清除法，并将其应用到新的生产工艺中。通常应用γ射线照射来确保保健产品和医疗设备的无菌，但还未将其作为生物制品的病毒灭活方法。此项研究旨在检测杀病毒剂量（50kGy）的γ射线能否用于照射生产IVIG的中问产品（分级分离的血浆）而不影响纯化IgG产品的结构和功能完整性。     

优化等电聚焦电泳方法评价重组人红细胞生成素质量

目的对等电聚焦电泳(IEF)分析方法进行优化,以更好地评价重组人红细胞生成素(rHuEPO)产品的质量。方法用优化的IEF方法分析rHuEPO异构体分布,同时参照rHuEPO的体内外生物学活性和唾液酸含量结果,综合评判rHuEPO的质量。结果建立的优化等电聚焦电泳方法分析rHuEPO,图谱清晰,检测结果可靠。结论IEF方法的优化为rHuEPO的质量控制提供了快捷,准确的手段。