海洛因依赖对大鼠海马自发单位放电的影响

目的:探讨海洛因依赖对大鼠海马自发单位放电的影响。方法:按剂量逐日递增原则建立海洛因依赖大鼠模型作为依赖组,对照组注射等量生理盐水。用玻璃微电极细胞外记录依赖组和对照组大鼠海马神经元自发放电。结果:海洛因依赖组大鼠海马神经元自发放电的形式以单个不匀为主(62.96%),而对照组则以单个不匀(44.30%)和混合型(36.71%)为主,组间差异显著(P<0.05);依赖组大鼠海马自发放电频率以低频(48.15%)和中频(44.44%)为主,对照组则以低频为主(58.23%),但组间差异不显著(P>0.05)。结论:海洛因依赖使大鼠海马自发单位放电发生了改变。     

海洛因依赖大鼠4个脑区亮氨酸脑啡肽含量的变化

海洛因滥用已成为世人关注的社会性问题。海洛因依赖患者正常学习记忆功能下降，而且还形成对毒品的强烈渴求记忆，即心理性成瘾。现已知，内源性脑啡肽在成瘾过程中参与对学习记忆的调节。海洛因依赖是否影响大脑皮层、海马和小脑等学习记忆有关脑区亮氨酸脑啡肽(LEK)水平，本研究旨在从中探讨海洛因依赖对学习记忆影响的机制。     

砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。     

海洛因依赖大鼠4个脑区亮氨酸脑啡肽含量的变化

海洛因滥用已成为世人关注的社会性问题.海洛因依赖患者正常学习记忆功能下降,而且还形成对毒品的强烈渴求记忆,即心理性成瘾.现已知,内源性脑啡肽在成瘾过程中参与对学习记忆的调节.海洛因依赖是否影响大脑皮层、海马和小脑等学习记忆有关脑区亮氨酸脑啡肽(LEK)水平,本研究旨在从中探讨海洛因依赖对学习记忆影响的机制.     

海洛因依赖大鼠海马必需氨基酸含量与学习记忆关系的初步探讨

[目的]探讨海洛因依赖大鼠海马必需氨基酸含量变化与学习记忆功能的关系。[方法]按剂量逐日递增原则,首日每次剂量为3mg/kg,1日2次,连续9d皮下注射海洛因建立海洛因依赖SD大鼠模型;对照组以同样方式注射等量生理盐水。用Morris水迷宫检测两组大鼠学习记忆功能,另取大鼠海马用氨基酸自动分析仪测定必需氨基酸含量。[结果]海洛因依赖大鼠第Ⅲ象限活动时间和第Ⅲ象限游泳距离占总游泳距离百分比均较对照组明显降低（P﹤0.05）,并且依赖大鼠海马缬氨酸的含量显著高于对照组（P﹤0.05）;苯丙氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸和苏氨酸5种必需氨基酸中的几种虽为微量或含量在组间比较差异无统计学意义（P﹥0.05）,但均表现出增加的趋势。[结论]大鼠海马几种必需氨基酸含量的改变可能与海洛因依赖造成的学习记忆损害有关。     

慢性氟中毒对大鼠神经细胞线粒体分裂蛋白Drp1表达的影响

目的 研究慢性氟中毒大鼠大脑皮质神经细胞线粒体分裂基因动态相关蛋白1(Drp1)表达的改变.方法 将120只SD大鼠(1月龄、体重100 ～ 120 9)以单纯随机法分为3组(对照组、低氟组和高氟组),每组40只,各组染毒剂量以饮水中加入氟剂量计算:分别为0、10和50 mg/L;染毒3个月和6个月时,每组分别处死20只.采用免疫组织化学方法和免疫蛋白印迹法(western-blotting)检测线粒体分裂蛋白Drp1表达.结果 3个月时,Drp1的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞个数发生了改变,与对照组[(36.3±5.8)个]相比较,低氟组[(34.7±4.1)个]的改变无统计学意义(t=1.5,P＞0.05),而高氟组[(45.0±4.7)个]表达增加(t=8.8,P＜0.05);westernblotting法蛋白印迹平均灰度值也具有相同的改变,与对照组(0.59±0.03)相比,低氟组(0.62±0.03)和高氟组(0.71±0.02)的水平升高(t值分别为0.02、0.11,P值均＜0.05).6个月时,Drp1的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞个数发生了改变,与对照组[(33.2±4.4)个]相比较,低氟组[(36.6±3.8)个]和高氟组[(39.4±4.2)个]升高(t值分别为3.5,6.3,P值均＜0.05);westernblotting法蛋白印迹平均值也有改变,与对照组(0.65±0.06)相比,低氟组(0.80±0.09)和高氟组(0.76±0.08)的水平升高(t值分别为0.1、0.1,P值均＜0.05).结论 高剂量染氟可造成分裂基因Drp1表达改变,慢性氟中毒神经细胞损伤可能与线粒体分裂亢进有关.     

酒精对乳腺癌细胞表皮生长因子受体-钙激活中性蛋白酶通路及细胞迁移的影响

背景与目的：酒精(ethyl alcohol,EtOH)可促进乳腺癌的恶性演进,但其信号机制尚未完全明了。本研究通过观察EtOH对乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)-周期蛋白E/局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)信号通路和细胞迁移的影响,以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在其中的介导作用,探讨EtOH促进乳腺癌细胞迁移的信号机制。方法：以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞(MCF-10A乳腺上皮细胞为对照);采用蛋白[质]印迹法(Western blot)分析周期蛋白E和FAK蛋白剪切反应;通过伤口愈合实验观察细胞迁移效应;采用EGFR抑制剂(EGFR inhibitor, EGFR-I)或CANP抑制剂Calpeptin抑制EGFR或CANP活性,观察抑制剂对EtOH诱导CANP1大亚基、周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移的影响。结果：以EtOH(0.3%)处理模型细胞可观察到周期蛋白E和FAK出现明显蛋白剪切且该效应呈剂量和时间依赖性,还观察到EtOH刺激细胞迁移活动(+47.30%,P<0.05),但EtOH对MCF-10A细胞迁移无明显影响;以Calpeptin(10μmol/L)预处理模型细胞,可见EtOH(0.3%)或EGF(10 ng/mL)诱导的周期蛋白E/FAK蛋白剪切效应受到明显抑制;EGFR-I(3μmol/L)可显著抑制EtOH诱导的CANP1大亚基和周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移效应(-53.00%,P<0.01)。结论：EtOH可通过EGFR激活乳腺癌细胞CANP信号活动并促进细胞迁移,EGFR-CANP通路参与介导EtOH与EGF之间的串话,提示EGFR-CANP信号通路中的关键分子可为防止乳腺癌转移的潜在药物靶点。     

海洛因使大鼠背侧海马功能和GIu／GABA递质系统紊乱

目的探讨海洛因依赖对大鼠背侧海马神经元功能以及海马谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）递质系统的影响。方法按剂量逐日递增原则,1日2次,连续9d皮下注射海洛因建立其依赖SD大鼠模型。采用玻璃微电极细胞外记录大鼠海马神经元自发放电,比较放电形式和频率的变化。并用氨基酸自动分析仪测定大鼠海马Glu和GABA含量。结果海洛因依赖组大鼠背侧海马神经元放电以中频（51．02％）、单个不匀（61．22％）为主,对照组则以低频（58．70％）为主,形式分布均一（P〈0．05）;海洛因对腹侧海马神经元放电无影响（P〉0．05）;依赖大鼠海马Glu含量下降,GABA含量增加（P〉0．05）,Glu／GABA比值低于对照组（P〈0．05）。结论海洛因更易损伤大鼠背侧海马神经元功能;Glu／GABA递质系统的紊乱可能是海洛因损害大鼠学习记忆能力的机制之一。