蛇床子催眠活性组分对PCPA损伤大鼠松果体细胞的保护作用及钟基因表达调控机制

目的:观察蛇床子催眠活性组分对PCPA松果体损伤大鼠结构、功能的保护作用及生物钟基因表达的影响,探讨蛇床子催眠活性组分催眠作用机制.方法:采用腹腔注射PCPA 450 mg/kg连续2 d,建立大鼠松果体损伤模型,灌胃蛇床子催眠活性组分高、低剂量(60、30 mg/kg)并设褪黑素(10 mg/kg)阳性对照组,检测血...     

蛇床子催眠活性组分对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠海马钟基因与氨基酸类神经递质表达的影响

目的观察蛇床子催眠活性组分(SCZ)对失眠大鼠海马神经递质及钟基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法采用ip对氯苯丙氨酸(PCPA)建立大鼠失眠模型,ig给予低(25 g/kg)、中(50 g/kg)、高(100 g/kg)剂量SCZ,并设阳性对照(地西泮)组,给药3 d,免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)受体蛋白的表达;高效液相色谱法和免疫组化法检测大鼠海马GABA和Glu含量的变化;实时荧光定量PCR检测大鼠海马Clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3等生物钟基因的表达水平。结果免疫组化结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著升高,Glu表达水平显著降低(P0.01)。HPLC结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马组织Glu表达水平显著降低(P0.05),SCZ高、低剂量组大鼠GABA表达水平显著升高(P0.01)。生物钟基因表达水平检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著升高(P0.05),Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组比较,SCZ中剂量组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著降低(P0.01);SCZ高剂量组大鼠Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著增高(P0.05、0.01),SCZ低剂量组大鼠Per1基因表达水平显著增高(P0.01)。结论蛇床子催眠活性组分通过降低海马Clock、Bmal1表达,提高Cry1、Per1、Per2基因的表达水平,增加抑制性、减少兴奋性氨基酸类神经递质的表达,从而调节睡眠-觉醒周期,达到治疗失眠的效果。     

异虎耳草素对原代海马神经元细胞抑制性神经递质及其受体基因表达的影响

目的:观察异虎耳草素对原代海马神经元细胞γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)含量及受体基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯度并给药。分为空白组,地西泮组(25 mg·L~(-1)),异虎耳草素低、中、高剂量组(5,10,20 mg·L~(-1)),共5组,给药24 h后流式细胞术检测海马神经元细胞早期凋亡率,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液GABA,5-HT含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内γ-氨基丁酸A型受体(GABAA)基因GABRA_1,GABRA_5,GABRB_2,γ-氨基丁酸B型受体(GABAB)基因GABBR1,5-羟色胺1A型受体(5-HT1_A)基因5-HT1_(A(A)),5-HT1_(A(B)),5-HT1_(A(C))表达的变化。结果:第7天海马神经元细胞生长状态良好,鉴定纯度 90%;与空白组比较,海马神经元细胞早期凋亡率异虎耳草素中、高剂量组显著降低(P 0. 01),GABA含量异虎耳草素高剂量组显著升高(P 0. 01),GABRA_1,GABRA_5,5-HT1_(A(A)),5-HT1_(A(C))mRNA表达异虎耳草素中、高剂量组显著升高(P 0. 05,P 0. 01),GABBR_1,5-HT1_(A(B))mRNA表达异虎耳草素各组均显著升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:异虎耳草素催眠作用机制可能与抑制海马神经元细胞凋亡,升高抑制性神经递质GABA含量,上调GABA与5-HT相关受体基因表达有关。     

老年人眼肿瘤504例临床病理分析

目的：分析老年人眼部原发肿瘤的构成、分布情况及发病特点。方法：对我院病理科2000-01/2012-12收集的504例老年人眼部原发肿瘤的发病年龄、发病部位和病理类型进行回顾性分析。结果：患者504例眼部原发肿瘤中良性肿瘤346例（68.7%）,恶性肿瘤158例（31.3%）。其中良性肿瘤中以乳头状瘤最多见占83例（16.5%）,其次为各种囊肿和炎性病变分别为69例（13.7%）和64例（12.7%）。恶性肿瘤中以眼睑上皮来源的肿瘤基底细胞癌最多见,共72例（14.3%）,其次为皮肤附件来源的恶性肿瘤39例（7.7%）。从发病部位来看眼睑肿物最多282例（56.0%）,其次为眼角结膜肿物157例（31.2%）。结论：老年人眼部原发肿瘤的发病率与普通人群及儿童有明显的差异,而且随着年龄增大,恶性肿瘤比例有增高趋势。     

心肌梗死大鼠模型的建立及疾病进程评价

背景:心肌梗死是冠心病最严重的一种临床类型,抗心肌缺血类药物的研发已成为研究热点。建立合适的动物模型并探讨其病理生理机制,可为新药研发过程中药物的药效学评价提供有效的工具,促进心血管疾病有效治疗药物的开发。目的:评价急性心肌梗死损伤后大鼠的心脏功能、组织形态和心肌细胞超微结构改变。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组及模型组,每组15只。模型组采用冠状动脉左前降支结扎法制备心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。分别在造模后第7,14,28天,心电图观测大鼠Ⅱ导联ST段改变情况;开胸观察心脏大体改变情况;2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色法测定心肌梗死面积;苏木精-伊红染色法观察心脏组织病理改变;Masson染色法观察心肌组织纤维化程度;透射电镜观察心肌细胞超微结构改变。结果与结论:(1)与假手术组比较,模型组大鼠术后7 d心电图可见J点明显抬高,14 d可见Q波的波形增宽、振幅增大;(2)心脏大体观察可见,模型组大鼠术后7,14 d时左心室肥大,28 d时心脏萎缩;(3)2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色显示,模型组大鼠心梗面积进展性增加;(4)苏木精-伊红和Masson染色显示,心肌细...     

皮炎冲剂对变应性接触性皮炎模型小鼠的治疗作用机制研究

目的探讨皮炎冲剂对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的作用及机制。方法 60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、醋酸地塞米松组,皮炎冲剂大、中、小剂量组(51. 8%、25. 9%、2. 95%),每组10只,以2,4-二硝基氯苯(DNCB)致敏和激敏建立小鼠ACD模型,在激敏后24 h采用酶联免疫法(ELISA)方法检测血清中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平的变化,测定各组小鼠的耳廓肿胀度和脾指数、胸腺指数,并以苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠耳部皮肤炎性细胞浸润等病理变化情况,并进行炎细胞计数。结果与模型对照组比较,皮炎冲剂中、高剂量组IFN-γ、IFN-γ/IL-4比值显著降低,IL-4水平显著升高(P 0. 05,P0. 01);与模型对照组比较,皮炎冲剂大剂量组和中剂量组小鼠耳肿胀度、胸腺指数、脾指数均降低(P 0. 05,P0. 01); HE显示,与模型对照组比较,各给药组小鼠表皮增厚程度减轻,伴轻微或轻度角化过度,个别细胞水肿,血管周围轻度炎细胞浸润,中、大剂量炎细胞数均显著降低(P 0. 01)。结论皮炎冲剂对小鼠ACD具有明显的治疗作用,其作用机制可能与皮炎洗剂调节Th1、Th2型细胞因子有关。     

探讨蛇床子催眠活性组分对PCPA失眠大鼠褪黑素合成限速酶AANAT的调控作用

目的 观察蛇床子催眠活性组分（CHC）对对氯苯丙氨酸（PCPA）失眠大鼠行为学、褪黑素（MT）合成限速酶芳基烷基胺N-乙酰基转移酶（AANAT）的影响，探讨其对松果体的保护机制。方法 60只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常、模型，MT阳性药，CHC高、中、低剂量6组，每组10只。除正常组其余各组腹腔注射4.5%PCPA混悬液，10 mL·kg^-1，连续2 d，建立大鼠PCPA失眠模型。造模后正常及模型组灌胃等体积2%聚山梨酯-80，MT组（10 mg·kg^-1），CHC高、中、低（60，30，15 mg·kg^-1）给予10 mL·kg^-1给药体积的药物，每日1次，连续7 d。给药4 d后分别进行旷场活动、高架十字迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠试验，采用酶联免疫吸附法检测血清MT；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定松果体MT合成关键酶AANAT mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测松果体AANAT蛋白表达变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠旷场活动总距离、站立次数、中心区持续时间明显增加（P<0.05，P<0.01），高架开臂次数及时间比例下降（P<0.05），入睡潜伏期显著延长（P<0.01）；与模型组比较，低剂量组无明显差异，其余各组大鼠活动总距离均减少（P<0.05，P<0.01），高架开臂次数百分比升高（P<0.05），入睡潜伏期缩短、睡眠时间明显延长（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组MT含量显著下降（P<0.01）；与模型组比较，低剂量组差异无明显统计学意义，其余各组血清MT不同程度的升高（P<0.05）。与正常组比较，模型组AANAT mRNA表达量，AANAT蛋白表达量下降（P<0.01）；与模型组比较，MT组，CHC高剂量组表达量明显增加（P<0.05）。结论 CHC改善PCPA失眠行为学指标、增加松果体细胞合成分泌MT，提高血清MT水平，与上调松果体AANAT mRNA及其蛋白的表达有关。     

肝郁证元素在建立多囊卵巢大鼠模型中的干预作用

目的:探讨比较单纯使用"肝郁"、雄激素和"肝郁"联合雄激素3种造模方法对青春期多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型的影响。方法:采用单纯给大鼠"肝郁"刺激、单纯皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)和使用"肝郁"刺激联合皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)3种方法建立模型,观察大鼠动情周期和病理组织形态学以判定动物造模状况;采用自动分光光度法测定PCOS大鼠甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL),采用化学发光免疫吸附法测定胰岛素(INS),采用酶联免疫吸附法测定瘦素(LP)、脂联素(ADP)的相应变化。结果:肝郁加雄激素组与正常对照组比较,TG、TC、LDL、LP值显著升高,ADP值显著降低;肝郁加雄激素组与雄激素组比较,TG、LDL明显升高,ADP值明显降低。结论:提示"肝郁"使雄激素致青春期多囊卵巢综合征大鼠脂质代谢紊乱程度加重。     

扶正固本颗粒HPLC指纹图谱建立

目的 建立扶正固本颗粒(黄芩、淫羊藿、女贞子等)HPLC指纹图谱.方法 该药物80％甲醇提取液的分析采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相甲醇-0.1％磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长250、260、275、285、320 nm;柱温25℃.结果 10...     

紧密连接蛋白介导的十三味辛夷滴鼻剂对小鼠鼻腔黏膜修复机制探究

目的 探讨十三味辛夷滴鼻剂对鼻腔黏膜损伤小鼠的修复作用及其可能的干预机制。方法 制备小鼠鼻腔黏膜热损伤模型,随机分为空白对照组、模型对照组、滴通鼻炎水阳性对照组[1μl/（只·次·侧）]、十三味辛夷滴鼻剂高剂量[5μl/（只·次·侧）]、中剂量（[2.5μl/（只·次·侧）]、低剂量组[1.25μl/（只·次·侧）],每组各10只,雌雄各半。给药7 d后,分级评价鼻黏膜红肿程度,苏木素-伊红（HE）染色观察鼻黏膜组织病理结构改变,免疫组化分析鼻黏膜上皮ZO-1、Claudin-1、Occludin表达水平。结果 给药7 d后,模型对照组红肿程度评分显著高于空白对照组（P <0.05）,滴通鼻炎水阳性对照组、十三味辛夷滴鼻剂高、中、低剂量组均低于模型对照组;HE染色显示,十三味辛夷滴鼻剂各组随剂量增高,黏膜层逐渐变薄、黏膜结构趋于整齐;与模型对照组比较,十三味辛夷滴鼻剂高剂量组ZO-1、Claudin-1、Occludin蛋白表达量显著提高（P <0.05）。结论 十三味辛夷滴鼻剂可能通过上调鼻黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1、Occludin的表达,修复小鼠...