分枝杆菌多糖的制备及对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:制备分枝杆菌多糖并考察其对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法:用苏通培养基培养分枝杆菌,菌体脱脂后,用5种方法提取,比较多糖得率,并用正交试验优化超声提取工艺,再用稀碱提取残渣,粗多糖经Sevag法除蛋白、DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱纯化后得到分枝杆菌多糖;用MTT法检测分枝杆菌多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果:超声后热水提取多糖得率最高,超声提取的优化工艺是提取时间40 min,固液比为1∶150,超声功率600 W;单因素试验优化的Sevag法除蛋白条件为体积比1∶5,萃取时间为20 min,萃取6次;提取得到的4种多糖组分在6.25~50 mg.L-1范围内均能显著促进脾淋巴细胞的增殖。结论:用本实验工艺成功制备了分枝杆菌多糖,制备物具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。     

一种新型聚乙二醇化重组人生长激素的制备及性质考察

目的制备一种新型聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-(rhGH)2),并对其理化性质及药理作用进行研究。方法以分子质量为2×104u的聚乙二醇二丙醛(PEG-(ALD)2)对重组人生长激素(rhGH)进行修饰,采用Sephacryl S-200凝胶过滤色谱、Q Sepharose FF离子交换色谱对修饰产物进行分离纯化,SDS-PAGE鉴定各组分,通过SEC-HPLC、IEF、MALDI-TOF-MS等方法对目标产物进行分析,并采用去脑垂体大鼠模型研究其体内生物活性与长效作用。结果获得了一种新型聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-(rhGH)2)。其纯度质量分数达到97%以上,等电点为5.27,分子质量为6.6×104u。与未修饰的rhGH相比,PEG-(rhGH)2具有高效、长效的促进机体生长的药理作用。结论新型聚乙二醇化重组人生长激素PEG-(rhGH)2是一种具有开发前景的长效蛋白质药物,值得进一步深入研究。     

聚乙二醇修饰人Ⅰ型精氨酸酶的研究进展

自1991年美国FDA批准第1个聚乙二醇修饰药物上市以来,聚乙二醇修饰的药物以其安全、长效、低免疫原性及其高稳定性等众多优势引起了新药研发人员的广泛关注。人Ⅰ型精氨酸酶作为近年新发现的可抑制肝癌细胞生长的蛋白,给肝癌的治疗带来新的希望。本文就聚乙二醇修饰药物及人Ⅰ型精氨酸酶的研究进展做一综述。     

分枝杆菌多糖免疫调节剂研究进展

多种多糖类物质的免疫调节作用已得到证实,并应用于多种疾病的预防和治疗。非致病性分枝杆菌制剂及从中提取的多糖成分(卡介菌制剂、母牛分枝杆菌制剂、草分枝杆菌制剂、卡介菌多糖核酸、分枝杆菌多糖等),都具有一定的免疫调节作用,主要用于结核、癌症、呼吸道感染等免疫功能低下引起的疾病的辅助治疗。     

重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶的表达纯化和鉴定

目的对重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶（recombinant human betaine-homocysteine S-methyltrans-ferase,rhBHMT）进行表达纯化和鉴定。方法采用基因重组技术在原核系统表达BHMT蛋白,镍螯合亲和层析和Sephacryl S200层析进行纯化。产物经SDS-PAGE、HPLC、N端氨基酸序列检测与活性验证。结果终产物rhBHMT纯度达97.9%。相对分子质量为45 000,N端氨基酸序列与理论序列一致。结论从工程菌中获得具有活性的高纯度rhBHMT,产物均一,工艺稳定,为中试放大提供可靠依据。