LC-MS/MS测定人血浆中利伐沙班浓度及生物等效性研究

目的:建立检测人血浆中利伐沙班质量浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,研究利伐沙班片在中国健康受试者体内的药动学特征并评价生物等效性.方法:血浆样品经乙腈沉淀,采用C18色谱柱分离,梯度洗脱,质谱采用电喷雾离子源正离子检测.采用随机、两序列、四周期、全重复交叉试验设计,健康受试者分别空腹和餐后口服20...     

清热解毒口服液中6个药物成分的定量分析与网络药理学研究

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定清热解毒口服液中的栀子苷、绿原酸、新绿原酸、哈巴苷、龙胆苦苷、黄芩苷6个成分含量,并对以上成分展开网络药理学研究,揭示其潜在药理作用机制。方法:色谱柱采用Phenomenex Kinetex C₁₈柱(50 mm×2.1 mm, 2.6μm),流动相采用0.3%甲酸水溶液-0.3%甲酸乙腈梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,柱温40℃,进样体积为2μL。质谱方法选择电喷雾离子源(ESI),负离子模式,多反应检测模式(MRM);方法学验证包括专属性、精密度、重复性、稳定性、准确度等;网络药理学研究基于Swiss Target Prediction、Drugbank、TTD、KEGG、Cytoscape等数据库或平台,收集成分-靶点-代谢通路-疾病信息,并绘制药理作用网络图。结果:方法学验证均符合方法学要求。栀子苷、绿原酸、新绿原酸、哈巴苷、龙胆苦苷、黄芩苷分别在0.050～5.000、0.049～4.900、0.050～5.000、0.010～1.020、0.052～5.150、0.052～5.15...     

排毒清脂片的UPLC-Q-TOF-MS成分分析及网络药理学探索

目的:利用UPLC-Q-TOF-MS鉴定排毒清脂片的化学成分,并在此基础上开展网络药理学研究。方法:采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～17 min,95%～5%A;17～17.01 min,5%～95%A;17.01～20 min,95%A),流速0.3 m L·min~(-1),柱温40℃,使用电喷雾离子源(ESI),负离子模式采集数据,质谱扫描范围m/z 50～1 200,通过对照品、相对分子质量、质谱裂解规律和文献信息鉴定排毒清脂片的化学成分;运用多个数据库检索化学成分对应靶点、排毒清脂片所治疾病靶点以及代谢通路,利用Cytoscape 3.7.1软件构建"药材-成分-靶点-通路-疾病"的可视化网络拓扑关系图。结果:从排毒清脂片甲醇提取物中鉴定出了33个成分,其中27种来源大黄,4种来源西洋参,2种来源麦冬。网络药理学研究表明其中31个化学成分的18个直接靶点,58个间接靶点及类固醇激素生物合成通路、花生四烯酸代谢通路、胰岛素信号通路等7条通路与排毒清脂片治疗高脂血症、痤疮、单纯性肥胖有较强的相关性。结论:UPLC-Q-TOF-MS技术可快速、高效对排毒清脂片进行化学成分定性分析,揭示了排毒清脂片的药效物质基础;网络药理学研究可辨识大黄、西洋参、麦冬3味中药的作用靶点及代谢通路,初步阐释排毒清脂片的分子作用机制,可为该制剂的质量控制与临床应用提供参考。     

RP-HPLC法同时测定二至丸中红景天苷、女贞子苷和蟛蜞菊内酯的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定二至丸中红景天苷、女贞子苷和蟛蜞菊内酯的含量。方法:采用D iamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.m in-1,柱温30℃,检测波长220 nm。结果:红景天苷、女贞子苷、蟛蜞菊内酯进样浓度分别在2.2~88.0μg.mL-1(r=0.9995),9.9~396.0μg.mL-1(r=0.9998),0.5~20.1μg.mL-1(r=0.9995)范围内与峰面积呈良好线性关系;平均回收率分别为97.5%,98.0%,97.8%,RSD均小于3%。结论:所建立的方法简便、快速、准确,重复性好,可用于二至丸的质量控制。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中沙格雷酯浓度及人体生物等效性研究

目的 建立具有高灵敏度和高选择性测定人血浆中沙格雷酯药物浓度的液相色谱-串联质谱检测方法,并将其应用于盐酸沙格雷酯片的人体生物等效性研究.方法 血浆样品经乙腈沉淀,采用C18色谱柱,在多反应监测正离子模式下,以电喷雾离子源作为电离技术扫描分析,离子通道分别为:沙格雷酯m/z 430.200→135.100,沙格雷酯-d...     

单克隆抗体药物药代动力学特征、分析方法以及体内分析方法学研究进展

近年来,单克隆抗体药物发展迅速,在肿瘤、免疫、血液等系统疾病领域应用日益广泛。截至2019年其全球处方药物市场占比已达15.3%(1400亿美元)。单克隆抗体药物作为一种大分子蛋白,因其特殊的结构和生理性质,在体内的吸收、分布、代谢及排泄均与小分子药物存在较大差异,具有靶点介导的药物处置、非线性药动学代谢、时间依赖性、较长的半衰期等独特的药代动力学特征,充分了解这些特征有益于该类药物分析方法的开发。单克隆抗体药物在生物体内的处置具有特殊性和复杂性,极大地增加了生物检测的难度,因此必须建立专属、灵敏、准确、可重复的测定分析方法。本文旨在论述单克隆抗体药物的药代动力学特征、常用分析方法及其优缺点、体内分析方法学验证要求等,并逐点与小分子药物进行对比讨论,以期为单克隆抗体药物的分析技术开发提供部分参考。     

山茱萸及其伪品的差示扫描量热法鉴别

目的 山茱萸及其伪品的鉴别.方法 用差示扫描量热分析仪(DSC)分别对不同产地的山茱萸及其伪品进行分析.以铝坩埚为参比,DSC量程±50 mw,升温速率20℃/min,升温范围30～500℃.结果 不同产地的山茱萸DSC图谱基本相似,在190℃处有一吸收峰,361℃处有一放热峰;山茱萸与其伪品的差热曲线差异明显,其中放热峰相差不大,但焓变值相差较大.结论 差示扫描量热法简便快速、准确,可用于山茱萸的鉴别.     

基于生物信息数据库探讨雷公藤红素抗糖尿病及其并发症的生物分子机制研究

目的基于生物信息数据库探讨雷公藤红素抗糖尿病及其并发症的生物分子机制研究。方法从生物信息数据库中获取雷公藤红素的相关联基因信息,通过Veen图软件寻找雷公藤红素和糖尿病(diabetes mellitus)交集基因,采用STRING软件构建蛋白-蛋白互作网络,运用DAVID软件和KOBAS软件进行相关KEGG通路识别,进一步用R语言编程软件构建了雷公藤红素抗糖尿病的“化合物-靶基因-通路-疾病”相关生物分子机制网络。结果雷公藤红素有50个基因与糖尿病相关,涉及到的通路有11条(P<0.001),主要影响糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路,其机制是通过抑制NF-κB调节AGE-RAGE-NF-κB轴,减少下游炎症效应因子产生,进而减轻胰岛素抵抗和器官纤维化损伤。结论雷公藤红素能够通过调节AGE-RAGE-NF-κB轴相关信号通路,改善糖尿病及其并发症的相关症状。雷公藤红素有望成为治疗糖尿病及其并发症的潜在药物。     

UPLC法同时测定山茱萸生品与酒制品中5个组分的含量

目的:建立UPLC法同时测定山茱萸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷和当药苷的含量。方法:ACQUITY UPLCTMHSS C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸水(B);梯度洗脱(0～3 min,5%A;3～12min,5%A→20%A);流速:0.2 mL·min-1;检测波长:250 nm;柱温:30℃。结果:在上述条件下,没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷和当药苷的质量浓度分别在10.50～525.2μg·mL-1(r=0.9993),10.85～542.5μg·mL-1(r=0.9994),13.50～652.4μg·mL-1(r=0.9999),11.85-592.6μg·mL-1(r=0.9992),5.06～252.8μg·mL-1(r=0.9991)范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;低、中、高浓度的平均加样回收率(n=3)均在97.5%～102.5%之间,RSD均小于2.9%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于山茱萸药材的质量控制。     

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS方法的丹黄祛瘀胶囊中多种化学成分研究

目的为系统阐明复方中药制剂丹黄祛瘀胶囊中的化学成分组成,建立一种同时对中药复杂成分实现精准、快速鉴定的高效分析方法。方法本研究采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS),对丹黄祛瘀胶囊中的化学成分进行鉴定分析,通过UPLC-Q-Orbitrap HRMS扫描提供的化合物精确相对分子质量、多级碎片离子信息,同时与对照品的的相对保留时间和质谱数据进行比对,并结合相关参考文献从而实现对化合物鉴定的准确定性。结果共鉴定出59种化学成分,其中主要包括黄酮类、苯酞内酯类、醌类、单萜苷类、有机酸类及其他类。结论可系统、准确、快速地鉴定丹黄祛瘀胶囊中的多种化学成分,并为其药效物质基础及质量控制等研究提供了科学的理论依据。