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目的构建蓝藻抗病毒蛋白(CV-N)全长基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达。方法根据GeneBank中CV-N的全基因序列,人工合成CV-N序列,进行PCR扩增。将扩增的PCR产物经双酶切后,克隆到原核表达载体pET30a(+)上,构建重组表达载体pET30a—CV-N。重组质粒经核苷酸测序鉴定后,转化宿主茵BL21(DE3)诱导表达目的蛋白。结果CV-N基因可在大肠杆菌中高效表达,重组蛋白相对分子质量为11Kd,以包涵体形式存在。结论成功地构建了CV—N原核表达载体,为CV—N的纯化及其抗病毒的活性研究奠定了基础。 相似文献
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目的 研究铜绿假单胞菌耐药性变迁趋势,探讨抗菌药物使用对铜绿假单胞菌耐药率变化的影响,为临床合理使用抗菌药物提供理论依据.方法 回顾性分析2007-2012年铜绿假单胞菌耐药率变化趋势及抗菌药物年用量,计算用药频度(DDDs),采用Pearson相关分析法对耐药率与DDDs进行分析.结果 3745株铜绿假单胞菌主要来源于痰液(占79.1%),其次为分泌物(占13.7%).菌株对常用抗菌药物均有不同程度耐药,2009年开始多数药物耐药率呈下降趋势;对哌拉西林、氨曲南、妥布霉素的耐药率较高,在32.0%~54.6%之间波动;对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星的耐药率相对较低,在13.4% ~ 28.4%之间波动;对碳青霉烯类抗菌药物呈现较高耐药性,耐药率在15.3%~37.9%之间波动.自2010年多数抗菌药物DDDs有不同程度下降;头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦的DDDs与铜绿假单胞菌耐药率呈高度正相关(r>0.800,P<0.05).结论 铜绿假单胞菌对常用抗菌药物均有不同程度耐药,尤其是对碳青霉烯类耐药菌株,抗菌药物用量与铜绿假单胞菌耐药率之间存在一定相关性,应加强抗菌药物临床应用管理. 相似文献
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目的探讨抗菌药物使用对肺炎克雷伯菌耐药率变化的影响,为临床合理使用抗菌药物提供理论依据。方法回顾性分析我院2007-2012年抗菌药物年用量及肺炎克雷伯菌耐药率变化趋势,计算用药频度(DDDs),采用Pearson相关分析法对耐药率与DDDs进行分析。结果2007-2008年肺炎克雷伯菌对大部分抗菌药物耐药率较高,2009年开始呈下降趋势;自2010年多数抗菌药物DDDs有不同程度下降;头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、阿米卡星、左氧氟沙星和亚胺培南的DDDs与肺炎克雷伯菌耐药率呈高度正相关(r〉0.800,P〈0.05)。结论抗菌药物用量与肺炎克雷伯菌耐药率之间存在一定相关性,应加强抗菌药物临床应用管理。 相似文献
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目的:探讨辨证施治手足口病(EV71感染)临床疗效。方法:将160例临床确诊为手足口病(EV71感染)患儿,随机分为2组,对照组40例予抗病毒等常规治疗,治疗组在此基础上加用自拟方化湿解毒汤、清热解毒汤辨证施治,观察2组临床疗效。结果:治疗组在发热、皮疹消退时间,疱疹结痂时间,转为重症患儿例数,总病程天数方面均优于对照组(P〈0.01或0.05);2组疗效比较差异也有显著性意义(P〈0.01),治疗组明显优于对照组。结论:运用自拟方辨证施治小儿手足口病(EV71感染),疗效显著,值得临床推广运用。 相似文献
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2009-2014年我院抗菌药物临床应用对鲍曼不动杆菌耐药性变迁的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究鲍曼不动杆菌耐药性变迁趋势,探讨抗菌药物使用对鲍曼不动杆菌耐药率变化的影响,为临床合理使用抗菌药物提供理论依据.方法 回顾性分析2009-2014年鲍曼不动杆菌耐药率变化趋势及抗菌药物年用量,计算用药频度(DDDs),采用Pearson相关分析法对耐药率与DDDs进行分析.结果 2 859株鲍曼不动杆菌菌株对常用抗菌药物呈多重耐药趋势,对β-内酰胺类、大多β-内酰胺类加酶抑制剂、氨基糖苷类、喹诺酮类、碳青霉烯类、磺胺类的耐药率均超过65.0%,仅对头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素的耐药率相对较低,波动在32.1% ~ 54.2%之间.2009-2014年不同抗菌药物的DDDs有不同程度升降.庆大霉素、头孢吡肟、左氧氟沙星和亚胺培南的DDDs与鲍曼不动杆菌耐药率呈高度正相关(r>0.800,P<0.05).结论 鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药性较为严重,抗菌药物用量与鲍曼不动杆菌耐药率之间存在一定相关性,应加强抗菌药物临床应用管理. 相似文献
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蓝藻抗病毒蛋白N基因的原核表达及重组蛋白的纯化和复性 总被引:1,自引:2,他引:1
目的:构建蓝藻抗病毒蛋白(CV-N)基因原核表达载体,表达、纯化并复性其重组蛋白。方法:根据GenBank中CV-N的全基因序列,人工合成CV-N序列,进行PCR扩增。将扩增的PCR产物克隆至原核表达载体pET30a( )上,构建重组表达载体pET30a-CV-N,测序鉴定后,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达蛋白,SDS-PAGE和Westenblot鉴定表达产物,Ni Sepharose柱纯化目的蛋白,稀释法复性蛋白。结果:重组质粒pET30a-CV-N测序结果显示,插入片段为303 bp,与GenBank中的CV-N基因序列完全相同。经IPTG诱导的CV-N基因可在E.coli中高效表达;SDS-PAGE分析表明,相对分子质量11000处出现一条新条带,主要以包涵体形式存在,37℃诱导2、4、6、8 h后,表达蛋白分别占菌体蛋白的3.87%、19.10%、33.98%和31.58%。Western blot结果显示,重组蛋白能与抗His单抗特异性反应。将诱导6 h的菌体超声破碎后,Ni Sepharose柱纯化,相对分子质量11 000处显示出清晰的单一条带,且蛋白复性效果良好。结论:成功地构建了CV-N原核表达载体,表达并纯化出重组蛋白,为深入研究其抗病毒的活性奠定了基础。 相似文献
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摘要:目的:探讨本院耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌(CRE)的耐药性及基因型。 方法:收集临床分离的30株CRE,用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,PCR检测碳青霉烯酶blaKPC、blaIMP、blaVIMVIM、blaOXA-48及blaNDM-1基因,阳性结果进行DNA测序,BLAST比对确定基因型。 结果: 30株CRE以肺炎克雷伯菌为主,占80%;感染患者主要来自ICU;感染部位以下呼吸道为主,占93.3%;对常用抗菌药物呈多重耐药;其中25株改良Hodge试验阳性;PCR扩增和DNA测序显示11株为blaIMP-4,12株为blaIMP-8,未检出blaKPC、blaVIM、blaOXA-48及blaNDM-1目的基因。 结论: blaIMP-4型和blaIMP-8型碳青霉烯酶是本院肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要型别,且已在ICU中局部流行。 相似文献
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目的:探讨辨证施治手足口病(EV71感染)临床疗效。方法:将160例临床确诊为手足口病(EV71感染)患儿,随机分为2组,对照组40例予抗病毒等常规治疗,治疗组在此基础上加用自拟方化湿解毒汤、清热解毒汤辨证施治,观察2组临床疗效。结果:治疗组在发热、皮疹消退时间,疱疹结痂时间,转为重症患儿例数,总病程天数方面均优于对照组(P(0.01或0.05);2组疗效比较差异也有显著性意义(P(0.01),治疗组明显优于对照组。结论:运用自拟方辨证施治小儿手足口病(EV71感染),疗效显著,值得临床推广运用。 相似文献