去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴中EgTP53蛋白生物信息学表达的影响

目的 基于生物信息学表达分析去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴中EgTP53蛋白(Echinococcus granulosus of Tumor protein p53, EgTP53)的影响。方法 将EgTP53蛋白与去氢骆驼蓬碱进行分子对接,从美国国家生物技术信息中心数据库(National Center for Biotechnology Information, NCBI)下载EgTP53的氨基酸序列,使用ProtParam蛋白分析工具进行EgTP53蛋白理化性质的预测,通过生信工具ProtScale进行疏水性的预测。使用SignalP5.0在线软件对信号肽进行预测,使用生物学在线软件工具TMHMM分析跨膜区域。借助NetPhos3.1在线软件预测磷酸化位点,利用SOMPA在线软件进行二级结构的预测。使用SWISS-MODEL在线软件对EgTP53的三级结构进行预测,采用IEDB在线软件进行B细胞抗原表位预测。使用MEGA6.0软件构建系统进化树并进行分析;采用实时荧光定量PCR技术检测去氢骆驼蓬碱作用后EgTP53蛋白的mRNA表达水平。结果 分子对接结果显示,EgTP53与去氢骆驼...     

基于Ussing Chamber技术评价阿苯达唑纳米晶体在大鼠不同肠段的吸收特性

目的:研究阿苯达唑纳米晶体(ABZ-NCs)在大鼠不同肠段的吸收动力学特征.方法:采用尤斯室技术进行肠吸收试验,利用高效液相色谱法测定ABZ-NCs在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠4个肠段的吸收状况,并考察不同浓度药物对肠吸收的影响,同时与ABZ片剂(T-ABZ)进行比较.结果:ABZ-NCs不同浓度在不同肠段均有吸收...     

雌酮人工抗原的制备与鉴定

目的 制备雌酮人工抗原. 方法 采用碳化二亚胺法将雌酮半抗原与载体蛋白牛血清清蛋白连接制备免疫耦联物, 用紫外分光光度法测定耦联率, 并测定兔抗体血清效价. 结果 测得耦联率比为12：1, 血清抗体效价为6.4×103.结论 该 方法 简便、 结果 准确可靠, 可应用于雌酮免疫原合成.     

阿苯达唑对细粒棘球蚴线粒体丙酮酸载体表达的影响北大核心CSCD

目的探讨阿苯达唑(albendazole,ABZ)对细粒棘球蚴线粒体丙酮酸载体(MPC1、MPC2)表达的影响。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球蚴,随机分为空白对照组和ABZ 25、50、100μg/ml组,每组2000个,干预5 d。亚甲蓝拒染试验观察细粒棘球蚴存活率,qRT-PCR、Western blot法检测细粒棘球蚴MPC1、MPC2 mRNA及蛋白表达水平的变化。EUSA法检测丙酮酸、ATP含量。结果亚甲蓝拒染试验结果显示,与空白对照组相比ABZ 25、50、100μg/ml组存活率均显著降低(F=168.100、777.600和2016.400,均P<0.01),且呈剂量依赖性(R^(2)=0.929)。qRT-PCR显示,与空白对照组相比,ABZ 25、50、100μg/ml组MPC1 mRNA表达水平均显著下调(F=1765.528、1714.762和1426.084,P<0.05或P<0.01),MPC2 mRNA表达水平均显著下调(F=254.123、275.752和24.555,P<0.05或P<0.01)。Western blot试验显示,与空白对照组相比ABZ治疗组MPC1、MPC2蛋白表达水平均显著下降(F=2708.129、2855.112,均P<0.01)。与空白对照组相比,干预5 d后ABZ 25、50、100μg/ml组丙酮酸含量水平均有显著升高(F=29.475、45.217和1355.116,P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖。干预5 d后ABZ 25、50、100μg/ml组ATP含量较空白对照组相比均显著减低(F=13.104、184.348和722.297,P<0.05或P<0.01),ATP含量随着ABZ浓度的增加逐渐降低。结论线粒体丙酮酸载体MPC1、MPC2可能参与ABZ诱导细粒棘球蚴死亡,有望成为包虫病治疗的新靶点。     

去氢骆驼蓬碱及其衍生物DH-004暴露对小鼠神经系统毒性作用研究

目的:研究去氢骆驼蓬碱(harmine,HM)及其衍生物1-(4-甲氧基)苯基-9-丁基-β-咔啉(DH-004)对脑神经毒性的作用.方法:免疫吸附测定法(ELISA)测定小鼠脑组织中IL-1β,TNF-α,IL-12和IL-6含量;尼氏染色法检测小鼠大脑皮质神经细胞形态改变;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(qRT-...     

甾体激素人工抗原合成概况

目的介绍运用免疫学方法分析甾体激素时,人工抗原合成的设计及合成方法、合成的影响因素、与载体蛋白偶联方法及最佳结合比的研究概况。方法查阅国内外文献资料,整理、归纳甾体激素化合物人工抗原合成的研究情况。结果与结论甾体激素合成是小分子药物免疫学检测的基础,将直接影响抗体的特异性和亲和性,对建立甾体激素化合物灵敏、简便、快速的、超微量的免疫检测法非常关键。     

去氢骆驼蓬碱诱发PC12细胞凋亡时对线粒体融合分裂的影响

目的 探讨去氢骆驼蓬碱(HM)对PC12细胞线粒体功能损伤和线粒体融合分裂相关蛋白表达水平的影响。方法 PC12细胞分为细胞对照组、HM组、线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、线粒体裂变激动剂WY14643组、HM+WY14643组,药物浓度均为1、10、25、50、100μmol·L^-1,处理24 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,显微镜观察细胞形态;MitoTracker Red探针染色观察线粒体形态和纵横轴长度比值,JC-1染色检测线粒体膜电位,试剂盒检测ROS、ATP水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,免疫荧光染色法和Western blotting检测胱天蛋白酶3(caspase-3)、促凋亡蛋白(Bax)、细胞色素C(cyt-c)和线粒体融合蛋白(Mfn2)、线粒体分裂蛋白(Drp-1)的表达水平;电穿孔法转染Drp1的干扰序列,筛选转染效果好的siRNA序列,协同药物干预,通过荧光法、MTT法、免疫印迹法检测相关指标。结果 MTT结果显示,与细胞对照组比较,HM组、Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、WY14643组和HM...     

混合式教学模式在初级临床实践教学中的运用

初级临床实践是多门医学临床知识融合,教学信息量比较大,传统的教学难以满足初学者对初级临床实践课程的学习需求.为了提高该门课的教学效果,团队结合本专业学生的主要特点,有针对性地制定合适的教学内容与方法,从而培养学生的综合能力.文章分析了笔者本校学生的学情况并结合初级临床实践课程特点,将线上教学与线下传统课堂教学有机融合,构建线上线下混合式教学模式.通过课前准备、线下教学、线上教学及考核评价四个环节的教学过程的探索,以及对该教学模式合理化意见的提出,为初级临床实践教学提供可实施性方案.     

阿苯达唑不同剂型治疗包虫病效果的Meta分析

目的 系统评价阿苯达唑(ABZ)不同剂型治疗包虫病的效果.方法 计算机检索PubMed、EMBase、Cochrane图书馆、Web of Science、CNKI、VIP、WanFang Data和CBM数据库,收集ABZ不同剂型治疗包虫病的随机对照试验(RCT),检索时限均从建库至2020年6月.由2名研究者对纳入...     

去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴的线粒体Drp1、Mfn2蛋白表达以及线粒体途径凋亡的影响

目的 探讨去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴的线粒体Drp1、Mfn2蛋白表达以及线粒体途径凋亡的影响。方法 无菌采集细粒棘球蚴,随机分为空白对照组4个不同药物干预组。共干预5 d,采用亚甲蓝拒染试验观察细粒棘球蚴存活率,采用活性氧试剂盒检测ROS生成水平,结合Mito-Tracker Red CMXRos、Mito-Tracker Green荧光探针染色技术及JC-1染色技术综合检测线粒体膜电位和线粒体损伤情况,Western blot法检测细粒棘球蚴融合分裂蛋白Drp1、Mfn2、凋亡蛋白Bcl-2、Cyt-C表达水平变化。结果 与空白对照组相比,25μg/mLABZSO组、25μg/mLHM组、12.5μg/mLMdivi-1组、HM:Mdivi-1组(25μg/mL:12.5μg/mL)细粒棘球蚴平均存活率显著降低(P<0.05或P<0.01)。与阳性药组相比,HM:Mdivi-1组(25μg/mL:12.5μg/mL)细粒棘球蚴平均存活率显著降低(P<0.05)。ROS试验显示,各干预组平均荧光强度与空白对照组相比均增强(均P<0.01)。Mito-Tracke...