高校生物安全二级实验室管理的思考

<正>高校是重要的教学科研场所,双一流大学的建设已全面展开,提升教学水平和科研实力是关键,作为实践教学和基础研究的载体,实验室发挥着举足轻重的作用。近年来,随着科研工作的不断深入,以及多学科交叉融合的不断推进,与病原微生物相关的教学、科研、检测及诊断等工作受到越来越多的重视。《生物安全法》等一系列法律法规和管理条例的施行为病原微生物相关的研究工作及管理工作提供了充分依据与有力保障。     

高龄老年骨质疏松患者骨代谢特点及初次接受唑来膦酸治疗后急性期不良反应观察

目的研究80岁以上高龄老年骨质疏松患者骨代谢特点及初次输注唑来膦酸注射液后急性期不良反应情况。方法回顾2011年1月-2017年9月在我院就诊的骨质疏松患者216例,按年龄分为高龄老年组(年龄≥80岁)96例、非高龄老年组(65岁≤年龄80岁)80例和绝经后非老年组(年龄65岁绝经后女性)40例。测定并比较各组血钙、血磷、Ⅰ型胶原C-末端肽交联(C-terminal telopeptide of type I collagen,CTX)、Ⅰ型原胶原N-端前肽(procollagen type 1 N-peptide,P1NP)、甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)、25-羟基维生素D[25 hydroxy vitamin D,25(OH)D]和临床等指标的差异。其中140例患者初次静滴唑来膦酸5 mg治疗,并按年龄分为80岁以上组(80~+组)75例和80岁以下组(80~-组)65例,观察两组输注唑来磷酸后两周内出现急性期不良反应(acute-phase response,APR)的情况。结果非高龄老年组血肌酐水平高于绝经后非老年组(P=0.01);高龄老年组与绝经后非老年组比较,血肌酐偏高(P=0.000),25(OH)D水平偏低(P=0.007),PTH水平偏高(P=0.032)。随着分组平均年龄的增大,CTX与P1NP有下降趋势,但组间比较差异无统计学意义。80~+组的APR总体发生率与80~-组比较差异无统计学意义,其中发热、肌骨痛的发生率在80~+组更低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 80岁以上高龄老年骨质疏松患者骨代谢并非都表现为低转换。初次使用5 mg唑来膦酸静滴,常见的不良反应如发热、肌骨痛的发生率更低。     

丹参酮ⅡA 磺酸钠对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的：观察丹参酮ⅡA 磺酸钠（tanshinone ⅡA sodium sulfonate,TSS）对雄性（SD）大鼠心肌缺血-再灌注损伤（ischemia／reperfusion,I ／R）的影响,并初步探讨其作用机制。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min,结扎的心肌组织颜色变灰标志着结扎成功,再灌注24 h 建立缺血-再灌注模型,将存活的 SD 大鼠随机（随机数字法）分为对照组（Sham 组,n ＝10）、缺血-再灌注组（I ／R 组,n ＝10）、TSS 低剂量组（TSS-L 组,n ＝10）、TSS 中剂量组（TSS-M组,n ＝9）、TSS 高剂量组（TSS-H 组,n ＝9）。MAP 心脏功能分析系统检测血流动力学指标,TTC 染色法检测大鼠心肌梗死面积,Western blot 法检测心肌 Bcl-2、Bax、Caspase-3、Lc3B／Lc3A、Beclin-1及高迁移率蛋白 B1（high-mobility group box1,HMGB1）的表达。多组间比较采用 ANOVA 分析,多组间两两比较采用 LSD-t 检验,以 P ＜0.05为差异有统计学意义。结果 I ／R 组较 Sham 组心功能舒缩参数明显降低,TSS 预处理使其显著升高（P ＜0.05）,但 DAP、Pmin 差异无统计学意义（P ＞0.05）。TSS 预处理组心肌梗死百分比显著低于 I ／R 组（P ＜0.05）。与 Sham 组相比,I ／R 组显著增加了 Caspase-3表达（P ＜0.01）;TSS 预处理组能够明显下调 Caspase-3蛋白表达（P ＜0.01）。I ／R组 Bax 表达亦明显升高（P ＜0.01）,TSS 能够抑制 Bax 蛋白表达（P ＜0.01）。I ／R 组降低了 Bcl-2蛋白的表达水平（P ＜0.05）,不同剂量的 TSS 预处理均使 Bcl-2表达水平升高（P ＜0.01）。I ／R 组Bcl-2／Bax 较 Sham 组比值降低（P ＜0.05）;TSS 预处理使其明显升高（P ＜0.05）。自噬相关蛋白Beclin-1与 Lc3B／Lc3A 有相似的变化趋势,I ／R 组 Beclin-1蛋白及 Lc3B／Lc3A 水平低于 Sham 组（P＜0.05）,TSS 预处理能够上调 Beclin-1表达与 Lc3B／Lc3A 比值（P ＜0.05）。与 Sham 组比较HMGB1表达明显增高（P ＜0.05）,TSS 预处理组较 I ／R 组减少了 HMGB1的表达（P ＜0.01）。结论丹参酮ⅡA 磺酸钠对 SD 大鼠心肌缺血-再灌注损伤具有保护作用,其机制与抑制细胞凋亡,激活细胞自噬有关。     

苏州市老年人肌少症的相关因素

目的研究苏州市老年人群肌少症相关指标的特征,探讨肌少症的保护因素及危险因素。方法选取苏州市3个地区符合条件的志愿者,采用横断面调查的方法,调查患者的一般资料、饮食及运动情况。应用DBA-210人体成分分析仪测定不同部位肌肉质量,用JAMAR握力计测定握力,采用4 m步行测试评估受试者的躯体功能,按照亚洲肌少症工作组诊断标准综合诊断肌少症。对肌少症的相关因素做Logistic回归分析,明确肌少症的危险因素及保护因素。结果肌少症检出率为28. 8%,其中男性为30. 4%,女性为27. 9%,性别间比较,差异无统计学意义(P 0. 05)。同一年龄段肌少症组体质量指数(body mass index,BMI)、上肢肌肉量、下肢肌肉量、四肢骨骼肌量、骨骼肌质量指数(appendicular skeletal muscle index,ASMI)、握力、步速均低于非肌少症组,差异有统计学意义(P 0. 05)。肉类(χ2=17. 99,P 0. 01)、鱼类(χ2=8. 13,P0. 05)、蛋类(χ2=13. 56,P0. 01)、奶类(χ2=11. 95,P0. 01)的摄取频率不同,肌少症发生率不等。每周进行有氧运动(χ2=16. 28,P0. 01)、抗阻运动(χ2=15. 86,P0. 01)的不同时长段的肌少症发生率比较,差异有统计学意义(P0. 05)。Spearman相关分析显示年龄与肌少症呈正相关(r=0. 307),而BMI (r=-0. 253)、上臂围(r=-0. 192)、小腿围(r=-0. 280)与肌少症呈负相关,肉类(r=-0. 229)、鱼类(r=-0. 159)、蛋类(r=-0. 201)、奶类(r=-0. 193)摄入频率增加与肌少症呈负相关,有氧运动(r=-0. 226)、抗阻训练(r=-0. 221)时长与肌少症呈负相关(P均0. 05)。Logistic回归分析结果显示,年龄是肌少症的危险因素,而BMI、膳食中进食肉类、蛋类、奶类是肌少症的保护因素。结论老年人是肌少症的高发人群,对其进行运动干预、营养指导有利于延缓进展、改善不良预后。老年人要保证能量和蛋白质的充足供应,保持适宜的体质量指数,同时在保证能量摄入充足情况下,可加大富含优质蛋白的动物性膳食的摄入。     

肥胖与肿瘤

<正>随着经济的高速发展,肥胖已成为全球性的问题。1999年世界卫生组织正式宣布肥胖为一种由多种因素引起的慢性代谢性疾病。根据2002年中国居民营养与健康状况调查结果显示,全体人群超重和肥胖率分别为17.6%和5.6%,分别较10年前上升了38.6%和80.6%[1]。中国目前超重者已达3.25亿人。肥胖症与2型糖尿病、高脂血症、高血压以及心脑血管疾病的发生密切相关。有越来越多的循证医学证据证明,肥胖和肿瘤的发生有着密不可分的关系。2007年世界癌症研究基金会和美国癌症研究协会(WCRF/AICR)     

妊娠期高血压疾病子痫前期对足月新生儿听力的影响

目的　探讨妊娠期高血压疾病子痫前期对足月新生儿（胎龄≥37周和＜42周）听力的影响及意义。方法  将母亲在妊娠期有子痫前期病史的667例新生儿,按子痫 前期轻重程度分组,进行听力检查,并与母亲无妊娠期高血压疾病史的足月婴儿进行对比观察。结果　在听力异常率比较时,母亲无妊娠期高血压疾病的婴儿异常率1.77‰,母亲有轻度子痫前期史的婴儿异常率12.99‰。母亲有重度子痫前期史的婴儿异常率39.06‰。轻度组与对照组、重度组与对照组、重度组与轻度组比较差异具有统计学意义（分别为χ2=28.80、81.40、3.98,P 均＜0.05）。随血压升高,听力损失患儿的异常率增高。结论　妊娠期高血压疾病子痫前期的轻重程度对婴儿听力异常率有影响,程度越重听力异常率越高。因此对母亲患有子痫前期的患儿应进行重点听力随访。     

基于网络药理学的参桂胶囊治疗2型糖尿病作用机制研究

目的：通过网络药理学研究参桂胶囊（SGC）治疗2型糖尿病（T2DM）的作用机制。方法：使用中药系统药理学分析平台（TCMSP）检索SGC中的主要活性成分及靶点,治疗靶标数据库（TTD）、比较毒性基因组学数据库（CTD）、在线孟德尔遗传（OMIM）、GeneCards数据库获取T2DM靶点,进而筛选出中药和疾病的共同靶点。采用Cytoscape3.8.2软件构建“成分-靶点”网络图,并通过Metascape对共同靶点进行GO和KEGG富集分析预测SGC主要作用通路。结果：分析显示SGC中的人参皂苷、咖啡酸、油酸、肉桂醛和β-谷甾醇为主要活性成分,核心靶点有胰岛素（INS）、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子（TNF）、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)等。主要涉及低氧诱导因子-1(HIF-1)、晚期糖基化终末产物（AGE）-糖基化终末产物受体（RAGE）信号通路、c AMP信号通路等。结论：揭示了SGC可通过“多成分、多靶点、多途径”作用机制对抗T2DM,为今后研究SGC治疗T2DM提供了文献依据。     

酸枣仁和合欢花水提取物对焦虑性抑郁症模型大鼠HPA轴 及炎症因子的影响

目的：探讨酸枣仁和合欢花水提取物对焦虑性抑郁症模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴及炎症因子的作用,阐明其配伍应用的效果及其作用机制。方法：80只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量酸枣仁组、高剂量酸枣仁组、低剂量合欢花组、高剂量合欢花组、低剂量酸枣仁-合欢花组和高剂量酸枣仁-合欢花组,每组10只。采用应激束缚+孤笼饲养,并联合皮质酮（CORT）皮下注射的方法复制焦虑性抑郁症大鼠模型。强迫游泳实验（FST）观察各组大鼠强迫游泳静止时间;高架十字迷宫实验（EPM）观察各组大鼠进入开放臂的次数（OE）、进入封闭臂的次数（CE）、进入开放臂的时间（OT）和进入封闭臂的时间（CT）,并计算进入开放臂和封闭臂的总次数（TE）和OE％及OT％。ELISA法检测各组大鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、CORT和炎症因子白细胞介素1β（IL-1β）及白细胞介素6（IL-6）水平;HE染色检测各组大鼠海马神经细胞形态表现。结果：与模型组比较,低和高剂量酸枣仁-合欢花组、高剂量酸枣仁组及高剂量合欢花组大鼠强迫游泳静止时间明显缩短（P<0.05或P<0.01）;与低剂量酸枣仁-合欢花组比较,低剂量酸枣仁组和低剂量合欢花组大鼠强迫游泳静止时间明显延长（P<0.05或P<0.01）;与高剂量酸枣仁组和高剂量合欢花组比较,高剂量酸枣仁-合欢花组大鼠强迫游泳静止时间明显缩短（P<0.01）。与模型组比较,低和高剂量酸枣仁-合欢花组、高剂量酸枣仁组及高剂量合欢花组大鼠OE%和OT%明显升高（P<0.05或P<0.01）;与低剂量酸枣仁组和低剂量合欢花组比较,低剂量酸枣仁-合欢花组大鼠OE%和OT%明显升高（P<0.05或P<0.01）;与高剂量酸枣仁组和高剂量合欢花组比较,高剂量酸枣仁-合欢花组大鼠OE%和OT%明显升高（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较,低和高剂量酸枣仁-合欢花组、高剂量酸枣仁组及高剂量合欢花组大鼠血清中CHR、ACTH、CORT、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05或P<0.01）;与低剂量酸枣仁组和低剂量合欢花组比较,低剂量酸枣仁-合欢花组大鼠血清中CHR、ACTH、CORT、IL-1β和IL-6水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）;与高剂量酸枣仁组和高剂量合欢花组比较,高剂量酸枣仁-合欢花组大鼠血清中CHR、ACTH、CORT、IL-1β及IL-6水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）。HE染色,模型组大鼠海马神经细胞排列松散,大量神经细胞变性,细胞层次减少;低和高剂量酸枣仁-合欢花组大鼠海马神经细胞变性明显缓解,神经细胞排列紧密、细胞层次清晰。结论：酸枣仁与合欢花配伍应用能够改善焦虑性抑郁症大鼠的行为,保护大鼠海马神经元,降低焦虑性抑郁症大鼠炎症反应水平及调节HPA轴紊乱。     

辛伐他汀对脑出血体外模型血肿清除的影响及作用机制研究

背景　辛伐他汀（SIM）在临床多用于心脑血管疾病的二级预防,但其对脑出血（ICH）后血肿内源性吸收的影响目前尚无明确结论。目的　研究SIM对红细胞（RBC）诱导的小鼠神经胶质细胞BV-2的ICH模型内源性血肿清除的影响及其机制。方法　2017年12月-2018年12月,选取生长良好的BV-2细胞制成单细胞悬液,根据加入试剂不同分为空白组、不同浓度SIM组（0.312 5、0.625 0、1.250 0、2.500 0、5.000 0、10.000 0、20.000 0、40.000 0及80.000 0 μmol/L）,采用MTT比色法检测不同浓度SIM对于BV-2细胞存活率的影响,采用免疫荧光法观察BV-2细胞吞噬RBC的ICH体外模型。建模后,分为空白组（200 μl的MEM完全培养基）、模型组（空白组+RBC）、SIM组（模型组+SIM）,采用流式细胞术检测SIM对BV-2细胞清除RBC的影响,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测SIM对BV-2细胞内相关蛋白CD47、CD36、Toll样受体（TLR4）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、核转录因子2（NRF2）的表达。结果　MTT比色法结果显示,SIM≥5 μmol/L时对BV-2细胞具有明显的抑制作用（P<0.05）。免疫荧光法观察到BV-2细胞吞噬了RBC,显示ICH体外模型成立。流式细胞检测显示,与模型组相比,SIM组小胶质细胞（MG）吞噬RBC数量上调（P<0.05）。Western blot显示,与空白组比较,模型组CD47、CD36、TLR4、PPARγ、NRF2蛋白的表达上调（P<0.05）;与模型组相比,SIM组CD47、TLR4蛋白的表达下调（P<0.05）,CD36、PPARγ、NRF2蛋白的表达上调（P<0.05）。结论　SIM可以有效促进RBC诱导的BV-2细胞ICH体外模型血肿的内源性清除。其作用机制可能与通过抑制CD47、TLR4的表达,上调CD36、TLR4、PPARγ、NRF2蛋白的表达相关。