母体内微量子代细胞嵌合体在HLA半相合造血干细胞移植中的意义

HLA不全相合的血缘关系移植解决了异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）的供者来源，但供受体间的HLA差异屏障限制了其广泛应用。近年来发现在妊娠结束后，部分母亲体内可以检测到长期存在的微量子代细胞（FMC）。这一现象引起人们的高度重视，因为它提示由于母体长期接触胎儿细胞表达的遗传性父本抗原（IPA）而可能存在对胎儿细胞的部分免疫耐受。这样的免疫耐受可能有利于母体供者半相合移植的预后。我们回顾性分析18例母亲供者HLA半相合HSCT的疗效与供者体内FMC之间的关联来阐述两者之间的相关性。     

慢性移植物抗宿主病相关性肌炎一例

目的总结1例异基因造血干细胞移植后并发与慢性移植物抗宿主病(cGVHD)相关的多发性肌炎的诊治体会。方法1例急性淋巴细胞白血病患者在处于完全缓解状态下接受同胞间供髓异基因造血干细胞移植,移植后采用环孢素A和甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果移植后11 d,WBC＞0．5×10~9/L,移植后13 d,血小板＞20×10~9/L；27 d时,骨髓细胞染色体分析显示99%为供者型。移植后17 d,发生Ⅰ度急性皮肤型GVHD,经静脉注射地塞米松及甲氨蝶呤后,GVHD被完全控制。移植后8个月,患者发生轻度肝脏cGVHD,经他克莫司及硫唑嘌呤治疗,效果不佳,血清肝酶升高,后改为他克莫司和西罗莫司治疗,血清肝酶逐渐下降,但肌酸激酶从9 U/L上升至272 U/L,随后患者出现全身乏力,并逐渐加重,上下肢近端处活动出现障碍,肌酸激酶升至3010 U/L,股四头肌、肱二头肌的肌电图表现为肌源性损害,双侧大腿磁共振成像符合多发性肌炎表现,给予甲泼尼龙、血浆置换治疗,但无显著效果,患者突发阵发性呼吸困难,经抢救无效,患者死亡,死亡时肌酸激酶为21 010 U/L。结论多发性肌炎为cGVHD的一种较少见形式,累及重要肌组织者预后较差。     

子-母微量嵌合体基础上同胞间非T淋巴细胞去除HLA半相合造血干细胞移植一例

目的为扩大供者来源,探讨在子-母微量嵌合体基础上同胞间非T淋巴细胞去除(Non-TCD)HLA半相合造血干细胞移植的可行性。方法受者的原发病为慢性粒细胞白血病(CML)急性淋巴细胞病变,供者为其胞弟,供、受者HLA有3个抗原不同,经套式序列特异引物聚合酶链反应技术检测,供者微量嵌合体阳性。采用全身照射、司莫司汀、阿糖胞苷、环磷酰胺及兔源抗胸腺细胞球蛋白等对受者进行预处理;采用环孢素A、霉酚酸酯及甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果移植后受者的外周血中性粒细胞>0.5×109/L和血小板>20×109/L的时间分别为11、18d,骨髓检查显示增生活跃,粒细胞系、红细胞系形态和比例正常;1、2、3、6个月和1年时完全供者型嵌合>90%。术后发生Ⅱ度急性GVHD及慢性局限性GVHD,经调整免疫抑制治疗方案后缓解。受者现基本恢复正常生活。结论子-母微嵌合体阳性的HLA半相合同胞可作为Non-TCD造血干细胞移植的供者。     

自体外周血干细胞动员和采集的研究

目的　探索理想的血液肿瘤外周血干细胞动员方案。方法　选择 15例恶性血液病患者 ,14例应用米托蒽醌 (2 0mg/m2 ) 阿糖胞苷 (8g/m2 ) 粒细胞集落刺激因子 (G -CSF ,惠尔血 30 0 μg/d ,从白细胞 <1× 10 9/L开始至采集完成 ) (MAG) ;1例多发性骨髓瘤应用环磷酰胺 (4 g/m2 ) G -CSF(CG)。用CS - 30 0 0Plus血细胞分离机采集单个核细胞。处理血量约 2 0 0ml/kg ,历时 3～ 4h。直至CD34 细胞数 >4× 10 6/kg为止。 结果　 14例用MAG方案者中 ,一次采集即采到CD34 细胞 2× 10 6/kg以上者 11例 (79% ) ,其中 9例 (6 4% ,9/14)达 4× 10 6/kg以上。通过测定采集日外周血中CD34 细胞数可预测一次采集足量干细胞的可能性 (P <0 .0 0 1)。 2例部分缓解者动员后获完全缓解 ,1例Ph阳性小克隆和 1例AML1/ETO基因在动员后转阴。移植 14例可评价者中 10例存活至今 (3～ 5年 ) ,4例 (Ph 杂白、L2和L3型急淋、急单各 1例 )复发死亡。结论　MAG具有抗瘤和动员双重作用。外周血CD34 细胞数与采集成功与否相关性佳     

非亲缘异基因骨髓移植治疗恶性血液病的临床研究

目的　评价非亲缘异基因骨髓移植 (allo BMT)治疗恶性血液病的疗效及并发症。方法　予 13例恶性血液病患者非亲缘allo BMT ,预处理方案髓系白血病为改良BUCY ;急性淋巴细胞白血病 (ALL)和合并中枢神经系统白血病 (CNS L)的髓系白血病以全身照射 (TBI) +环磷酰胺 (CTX)为主的化疗。 13例均采用骁悉 (MMF)、CSA加短程MTX联合方案预防移植物抗宿主病 (GVHD)。结果　均较顺利完全预处理及移植治疗。移植后 17d(中位时间 )造血重建。GVHD发生率急性Ⅰ～Ⅲ度 38% ,Ⅲ～Ⅳ度 15 %。随访 2～ 30个月 ,荧光标记STR PCR定量检测 ,75 %患者供体细胞嵌合率(DM) >90 %。 12例非复发状况移植 ,至今存活 9例 ,无白血病生存率 (LFS) 75 %。移植相关死亡率30 %。结论　非亲缘allo BMT能有效地治疗或根治恶性血液病。     

造血干细胞移植前营养状态与造血重建的关系

造血干细胞移植前后患者的营养状态对移植后造血重建的影响国内外报道较少.我们选用了可操作性强且较氮平衡更准确的体重指数(BMI)以及白蛋白、前白蛋白、三酰甘油及总胆固醇作为营养评价指标,观察这些指标在移植前后的变化及其与造血重建时间的关系,现报道如下.     

再生障碍性贫血患者40例外周血淋巴细胞表型分析

再生障碍性贫血患者４０例外周血淋巴细胞表型分析唐晓文邵景章张学光张毅仇红霞李建勇王爱青朱学东有证据表明再生障碍性贫血（ＡＡ）的发病与免疫异常密切相关。我们用流式细胞仪对４０例ＡＡ患者外周血Ｔ细胞亚群及其活化标志抗原表达水平、ＮＫ细胞群进行检测，并与患...     

MDS患者Treg细胞的变化

检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome MDS)患者CD4+调节性T细胞变化,探讨其在MDS发病机制中的作用。方法以CD3和侧向角设门,采用直接免疫三标法以流式细胞术检测38例初治MDS患者(RA 17例、RAS 1例、RAEB 14例、RAEB-t 6例)及11例正常对照组外周血CD3+ CD4+细胞上CTLA-4、PD-1、CD25数量和比例变化,并探讨与疾病进展的关系。结果MDS组CTLA一4、PD I．1、CD25在CD3 4-CD4+表达率分别为2．14％±1．25％(RA 1．51％±0．80％、RAEB／RAEB-t 2．65％±1．33％),1．44％±0．88％(RA 0．93％±0．63％,RAEB／RAEB-t 2．02％±0．76％),3．18％±2．11％(RA 2．80％±1．38％、RAEB／RAEB-t 3．41％±2．46％),均高于正常对照组的0．11％±0．12％, 0．09％±0．14％,1．65％±1．14％(P<0．01)。随着疾病进展,负性调控因素CTLA-4、PD-L1、CD25在RAEB／RAEB-t组亦较RA组显著增高(P<0．01)。结论与正常人免疫系统比较,MDS患者CD4+调节性T细胞升高,免疫负调控增强,并在免疫格局中占据主导地位。随着疾病进展,MDS患者免疫负调控亦相应增强,免疫监视功能低下,从而有助于恶性克隆扩张、逃逸。     

系列特异性嵌合体检测在异基因造血干细胞移植中的应用

异基因造血干细胞移植（allo—SCT）后动态监测供受者嵌合状态,因其在判断allo—SCT后转归,提高移植成功率等方面的重要意义,现已成为allo—SCT后患者的常规检测项目。采用STR—PCR方法从分子遗传学上检测嵌合状态已在国内外广泛开展。而近年来开展的系列特异性嵌合体的检测,其敏感性和特异性较混合细胞检测为高,临床指导作用更强。本文就系列特异性嵌合体的检测及临床意义作一综述。     

异基因骨髓移植和非清髓性干细胞移植嵌合形成过程的比较

目的 研究异基因骨髓移植（allo-BMT）和非清髓性干细胞移植（NST）两种移植方式在供体细胞嵌合状态的形成及转归上的差异,探讨早期供体细胞植入的关键因素。方法 对20例接受allo-BMT和18例NST的患者进行回顾性比较,研究两组患者疾病类型、干细胞来源、预处理方案和移植物抗宿主病预防方案。用复合扩增荧光标记STR-PCR结合毛细管电泳方法对移植后＋7、＋14、＋21d,＋1、＋3、＋6、＋9、＋12个月的嵌合体进行动态检测。结果 （1）NST组在受体年龄、单个核细胞（MNC）、CD34^＋及T细胞数量上均明显高于BMT组,造血重建方面,中性粒细胞绝对值恢复时间与BMT组无差别,但血小板恢复明显早于BMT组。（2）NST组患者供体细胞完全嵌合状态（FDC）的建立比BMT组早（1个月vs 3个月）,移植后早期（＋1个月）FDC比例亦明显高于BMT组（38．9％vs 20%）,而混合嵌合状态（MC）的发生率明显低于BMT组（61．2％ vs 80％）,移植1个月后各时间段两组在嵌合体形成上均无显著性差别。（3）氟达拉滨为基础的NST预处理方案与标准预处理方案相比并未延迟供体细胞的植入。（4）NST组慢性移植物抗宿主病的发生率明显高于BMT组（80％vs 50%,P〈0．01）,与NST组输入高剂量的CD34^＋细胞相关。结论 在供体细胞早期植入和嵌合体形成的过程中,移植物中造血干细胞和T细胞数量至关重要,并可能起决定性作用。