亲水性透明化技术在骨组织的应用

在整体组织上实现细胞及亚细胞水平的三维成像是现代组织病理发展的新趋势.光透明化技术的出现打破了组织表面阻隔光透射的壁垒,结合现代光学成像技术可在组织器官上获取包含细胞及亚细胞层面在内的三维图像信息.亲水性透明化方案具有使用简单、无毒性和对荧光蛋白保护性高等特点,是应用最为广泛的组织透明化工具.但其对硬组织渗透性差,折射...     

疏水性组织透明化技术的研究进展

组织透明化技术可通过降低光散射和光吸收使样本在视觉下达到透明,并结合光学显微镜和荧光标记技术实现组织结构三维重建,弥补传统组织切片技术的不连续性、图像重建困难等缺陷.近年来,组织透明化技术逐渐发展,其中疏水性组织透明化技术因具有操作简单、透明速度快和透明度高等特点而广泛应用,本文从其透明程序、发展和应用三个方面进行综述...     

高效液相色谱法测定半边旗中芹菜素含量

目的建立草药半边旗中芹菜素含量的准确测定方法，并测定不同采收期的半边旗中芹菜素的含量。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Diamonsil C18柱，流动相为甲醇一水（梯度洗脱），流速为0，2mL／min，检测波长为283nm，柱温为35℃。结果芹菜素进样量在0．076～0．76μg范围内与峰面积线性关系良好（r^2=0．9986），平均回收率为98．1％（RSD=1．24％）。结论高效液相色谱法操作简便，测定结果可靠，可用于半边旗草药的质量控制。     

半边旗5F注射液的质量标准研究

目的：建立半边旗注射液的质量标准。方法：采用薄层色谱法对半边旗注射液进行鉴别；采用高效液相色谱法测定主要成分11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝壳杉烷-19-酸(5F)的含量，色谱柱为Hypersil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)，流动相为甲醇-水-冰醋酸(55∶45∶0.045)，检测波长254 nm，流速1.0 mL·min-1，柱温35 ℃；采用pH计法、离子火焰法和沉淀法分别测定注射液pH，K+、鞣质、蛋白质、草酸盐以及重金属含量。结果：薄层鉴别斑点清晰，重现性好。高效液相色谱法测定5F在30～240 mg·L-1线性关系良好(r＝0.999 8)，平均加样回收率为99.8％。连续3批注射液pH 7.80～8.20，K+浓度小于10 mmol·L-1，注射液的鞣质、蛋白质、草酸盐以及重金属含量都符合药典规定。结论：本实验建立的分析方法灵敏可靠，可作为半边旗注射液的质量控制方法。     

二氧化碳气腹对妊娠中期大鼠妊娠特异性β_1糖蛋白（SP_1）近、远期影响的相关性研究

目的探讨不同压力、不同持续时间的CO2气腹对妊娠中期大鼠近、远期血浆、胎盘组织以及羊水中SP1的影响。方法建立妊娠中期CO2气腹的大鼠模型,取不同压力、不同气腹时间各处理组以及对照组一半大鼠的血液、羊水及胎盘组织行固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）,检测SP1含量变化。余下一半大鼠养至妊娠晚期,同法处理。结果妊娠中期大鼠CO2气腹后近期血浆中SP1变化差异无统计学意义（P〉0.05）,远期血浆中SP1变化差异有统计学意义（P〈0.05）。在相同的气腹压力下,血浆SP1随气腹持续时间延长而降低（P〈0.05）;在相同的作用时间下,血浆SP1随气腹压力增大而降低（P〈0.05）。在胎盘组织及羊水中SP1变化差异无统计学意义（P〉0.05）。结论妊娠中期大鼠高气腹压力、长时间CO2气腹后能造成远期血浆SP1的减少,而近期血浆以及近、远期胎盘、羊水中SP1量未见明显降低,血浆SP1的改变先于胎盘组织、羊水出现,可预测胎盘功能不良。     

半边旗二萜类化合物5F下调BEL-7402细胞中PIK3CA和AKT的表达

目的：研究半边旗二萜化合物5F（简称PsL5F）对人肝癌细胞株BEL-7402中PIK3CA（Phosphoinositide-3-kinase,catalytic,alphapolypeptide）和AKT（V-akt murine thymoma viral oncogene homolog）表达的影响,探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法：应用肿瘤基因芯片、荧光定量实时PCR和Western blot法检测PsL5F对PIK3CA和AKT表达的影响。结果：PsL5F能明显下调肝癌细胞中PIK3CA和AKT的表达。结论：PsL5F抗肿瘤作用与PIK3CA、AKT低表达有关。     

半边旗提取物5F诱导肝癌细胞株HepG2发生凋亡的机制

半边旗（Pteris Semipinnata L）是凤尾蕨属植物,生长于我国南方。民间常用于治疗疗疮、毒蛇咬伤、跌打损伤、疟疾等。广东医学院梁念慈教授在九十年代初筛选二十多种中草药的抗癌作用时,发现半边旗的水提液或醇提液显示对多种培养的癌细胞均有较强细胞毒作用。其中,从半边旗中分离出的具有抗癌活性的二萜类化合物5F（ent-1lct-hydroxy-15-oxo—ent-kaur-16-en-19-oic-acid）可抑制多种培养的癌细胞的增殖。本研究通过酶联免疫技术、流式细胞技术、免疫双染技术等多途径显示出5F可通过诱导肝癌细胞株HepG2发生凋亡来抑制肿瘤细胞的生长,分析了该凋亡与p53、NFKB、IKB、HIF、VEGF、Bax、cyto-c及AIF等细胞因子表达变化的关系,并检测了癌细胞内活性氧浓度的变化与5F及凋亡的相关性。     

半边旗提取物5F对不同类型NSCLC细胞的增殖抑制作用

目的 观察半边旗提取物5F(Psl5F)对不同类型非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株的增殖抑制作用,并找出对其敏感的细胞株类型.方法 采用 MTT法观察不同浓度Psl5F分别在作用24、48、72 h时对不同类型的NSCLC细胞株(A549、SPCA-I、NCI-H460、PGCL3)生长增殖的影响.结果 不同浓度的Psl5F对4种肺癌细胞作用24、48、72 h后,所有NSCLC细胞株生长增殖均受到不同程度的抑制,其中以对NCI-H460肺癌细胞的杀伤作用最强(P<0.01),对A549、SPCA-I、NCI-H460、PGCL3作用72 h后的半数致死量(IC50)分别是12.12、10.74、3.91、4.94 mg/L.结论 Psl5F能有效抑制NSCLC细胞株的体外增殖,且对大细胞肺癌NCI-H460最为敏感.     

脂联素对妊娠高血压综合症影响的文献计量分析

目的从文献计量学角度评估脂联素对妊娠高血压综合症影响的研究趋势。方法以“脂联素”和“妊娠高血压”为主题词,检索Pubmed、中国生物医学全文数据库、CNKI、万方数据库和维普数据库,对纳入研究的文献进行统计分析。结果有46篇文献纳入研究,发表自13个不同国家和地区,被31种期刊收录,子痫前期是脂联素在妊娠高血压综合症研究领域的热点。结论脂联素参与了子痫前期的发病过程,作为生物标志物应用仍存在争议。     

半边旗有效成分5F体内外的抗炎作用

目的:通过建立体内外炎症模型,观察半边旗有效成分5F的抗炎作用。方法:建立脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型,并用不同浓度5F处理,CCK-8法检测5F的细胞毒性,采用Griess法检测上清液中一氧化氮(NO)含量,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)含量,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和环氧酶-2(COX-2)表达水平。雄性ICR小鼠60只,建立巴豆油和花生四烯酸诱导的耳肿胀模型,造模后随机分为模型组、阳性组和5F组,每组10只,5F组给予100 mg·kg-15F溶液,阳性组给予地塞米松0.8 mg·kg-1或吲哚美辛1 mg·kg-1,模型组给予同体积生理盐水。各组均连续给药7 d。观察5F对小鼠耳肿胀的抑制作用。结果:5F在0~40 mg·L-1的剂量内对RAW264.7细胞无明显毒性作用,10,20,40 mg·L-1的5F可依赖性抑制LPS诱导的NO释放(P<0.01),20,40 mg·L-1的5F可以降低PGE2含量(P<0.01),40 mg·L-1的5F显著性抑制i NOS和COX-2蛋白表达(P<0.05),10,20,40 mg·L-1的5F显著降低TNF-α和IL-1β含量(P<0.01),20,40 mg·L-1的5F显著降低IL-6含量(P<0.01),100 mg·kg-1的5F对巴豆油和花生四烯酸诱导的耳肿胀都有显著抑制作用(P<0.05)。结论:5F可以抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应,抑制巴豆油和花生四烯酸诱导的耳肿胀,其抗炎作用与抑制i NOS和COX-2表达,减少炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6,NO和PGE2含量有关。