c-myc mRNA在成釉细胞瘤中的表达

目的:研究成釉细胞瘤(AB)和牙源性角化囊肿(OKC)中c-mycmRNA的表达,探讨c-myc在AB和OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法:使用原位杂交法检测54例AB、16例OKC和7例口腔正常黏膜(NOM)组织中c-mycmRNA的表达,并将AB按原发、复发、恶变分组,结果使用χ2检验进行统计分析。结果:AB、OKC及NOM组织中c-mycmRNA的阳性表达率分别为81.5%(44/54)、75.0%(12/16)和14.3%(1/7),3组比较有显著性差异(χ2=15.488,P<0.05)。原发组AB中c-mycmRNA的阳性表达率为71.0%,复发组为94.7%,恶变组为100.0%,伴随原发、复发、恶变,差异有显著性(χ2=16.912,P﹤0.05)。结论:c-myc表达在AB的发生、发展中有重要作用;c-mycmRNA的表达与AB的临床生物学行为有关,伴随其生物学行为变化,c-mycmRNA表达增强;提示c-myc有可能成为评价预后的有效指标。     

严重急性呼吸综合征相关冠状病毒检测探针制备及组织原位杂交

严重急性呼吸道综合征(SARS)的流行暴发引起了世界范围内对SARS病原体的分离及发病机制的研究。国内外多个研究机构报道一种新型的冠状病毒为SARS的致病因子；于部分患者的血液、呼吸道分泌物，粪便中检测到这种病毒的存在，或血清中具有该病毒的抗体产生。这对SARS的诊断和治疗都具有重要的意义。但直接于患者的病变组织中检测SARS病毒的报道较少。我们尝试从病变组织中检测SAPS病毒。     

F213I突变型高雪氏病分子伴侣治疗方法的研究

目的 研究高雪氏病新的分子治疗方法。方法 用β-葡萄糖脑昔脂酶(β-glucocerebrosidase，β-Glc)(EC3．2．1．45)的底物类似物(glucocerebroside analogue，GCA)作为分子伴侣，处理体外培养的不同突变型的高雪氏病患者皮肤成纤维细胞，采用荧光酶学手段测定β-Glc活性；Western印迹杂交技术分析该酶蛋白表达的量；细胞双染确定β-Glc在细胞内的定位；薄层层析法分析葡萄糖脑苷脂的降解情况。结果 该酶的底物类似物GCA可以提高体外培养的F213I突变型患者成纤维细胞内β-Glc活性；增加该酶蛋白的表达量；促进该酶蛋白向溶酶体内转运，加速底物葡萄糖脑苷脂(glucocerebroside，GlcCer)的降解。结论低分子量的GCA作为一种分子伴侣可能为F213I突变型高雪氏病的治疗开辟一条新的途径。     

乳腺肿物hTERT蛋白表达与激素受体的相关研究

近年来人类已证实端粒酶hTERT基因在干细胞及肿瘤细胞中比正常细胞高表达,其活性被认为与癌细胞永生化有关.因此它和肿瘤相关[1-3].但仅限于基因方面的研究,关于端粒酶蛋白与乳腺癌的研究鲜见报道.为了探讨乳腺癌及乳腺增生病变hTERT蛋白表达情况及其与激素受体的关系,研究其对乳腺癌诊断,预后的临床意义,我们用免疫组化方法分析了148例乳腺癌,癌前病变及良性病变中的hTERT蛋白的活性表达,并与hTERT基因及p53,ER,PR蛋白表达进行比较.     

被动吸烟对鼠牙槽骨钙、磷含量及碱性磷酸酶活性的影响

目的 分析被动吸烟鼠牙槽骨钙、磷含量和碱性磷酸酶（AKP）的活性。方法 40只6周龄健康雄性Wistar鼠被随机等量分为实验组和对照组,每组再被随机等量分为15、30、45和60 d 4个亚组,烟熏法建立被动吸烟的大鼠模型,浓酸消化法提取牙槽骨内钙和磷,光谱分析法和改良Reddi法分别测定钙、磷含量和AKP的活性,行析因设计的方差分析。结果 与各对照组牙槽骨相比,被动吸烟鼠的钙、磷含量在15 d组略有升高,30 d组略有下降,差异无统计学意义（P〉0.05）,45、60 d组显著下降（P〈0.01）;AKP活性在15、30 d组略升高,45、60 d组略下降,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 本实验周期内,鼠牙槽骨钙、磷含量和AKP活性在被动吸烟初期略有升高,随被动吸烟时间的延长,钙、磷含量呈时间依赖性减少,AKP活性也呈时间依赖性减少的趋势。     

基于生物信息学分析探索神经母细胞瘤相关的新生物标志物

目的 利用综合生物信息学分析方法探索神经母细胞瘤（Neuroblastoma,NB）相关的新生物标志物。方法 采用GEO2R分别筛选GEO(Gene expression omnibus)数据库GSE39262和GSE66586数据集中NB细胞与对照细胞之间的差异表达基因（Differentially expressed genes,DEGs）,利用韦恩图将两组DEGs取交集,利用仙桃学术在线生信分析工具对其进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,同时利用String数据库绘制蛋白互作网络（Protein-protein interaction,PPI）图,并通过Cytoscape软件中的CytoHubba插件筛选Hub基因。最后使用R2基因组分析和可视化平台（R2 Genomics Analysis and Visualization Platform）整理的NB组织转录组数据对Hub基因进行筛选验证。结果 本研究从GSE39262数据集中共筛出845个DEGs,从GSE66586数据集中共筛出2 980个DEGs,韦恩图分析出392个共有DEGs。GO/KEGG分析提示,上述共...     

lncRNA SNHG1对乳腺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化的影响及其机制

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1)对乳腺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法 收集20例乳腺癌患者的癌组织与癌旁正常组织,培养人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞MCF-7、BT-549、MDA-MB-231和MDA-MB-468,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测组织和细胞中SNHG1与miR-641表达量。以BT-549细胞为研究对象,分为A～D组,分别转染si-NC(A组)、si-SNHG1(B组)、si-SNHG1+anti-miR-641-NC(C组)、si-SNHG1+anti-miR-641(D组),采用RT-qPCR检测细胞中SNHG1和miR-641表达量,采用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,用Western blot检测细胞EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达量。将BT-549细胞分为E～H组,分别共转染SNHG1-WT与miR-641 mimics(E组)、SNHG1-WT与miR-NC(F组)、SNHG1-M...     

VEGF基因特异性siRNA转染后对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨利用干扰RNA（RNAi）抑制血管内皮生长因子（VEGF）基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法：设计针对VEGF基因的小干扰RNA（siRNA）,合成DNA模板,体外转录siRNA。以脂质体转染法将双链siRNA导入MCF-7细胞后,用MTT比色法检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响。通过Hoechst33258染色观察MCF-7细胞的凋亡。用流式细胞术检测细胞周期的改变,RT-PCR检测VEGF mRNA表达的变化,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白的表达。结果：所设计的两个靶位点siRNA,均能有效地抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,VEGFmRNA及其蛋白的表达明显减少;而作为阴性对照的错义序列组siRNASCR则没有上述效应。结论：体外转录合成的siRNA可抑制MCF-7细胞中VEGF基因的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

尼古丁对大鼠不同部位骨钙磷含量和碱性磷酸酶活性的差异影响

目的 分析尼古丁对大鼠牙槽骨和颌骨内钙磷含量以及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法 将20只5周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组每天腹腔注射尼古丁0.73 mg•kg-1,对照组腹腔注射等量生理盐水,3个月后处死取材。浓酸消化法检测牙槽骨和颌骨内钙磷含量,改良Reddi法检测牙槽骨和颌骨内ALP活性。采用SPSS 16.0统计软件分别行独立样本的t检验。结果 与对照组相比较,实验组牙槽骨内和颌骨内钙磷含量均明显减少,差异均有统计学意义（P<0.05）;ALP活性无明显变化（P>0.05）。实验组中牙槽骨与颌骨比较,骨钙磷含量和ALP活性差异无统计学意义（P>0.05）。结论 尼古丁下调大鼠牙槽骨和颌骨内钙磷含量,对ALP活性的影响不明显。