甘草甜素及地塞米松干预嘌呤霉素诱导足细胞损伤的体外研究

目的 观察甘草甜素(GL)及地塞米松(DEX)对受损足细胞凋亡的影响,探讨其细胞学作用机制.方法 建立嘌呤霉素(PAN)致足细胞损伤模型,应用不同水平PAN(12.5mg?L-1“、25.0mg?L-1、50.0 mg?L-1、75.0 mg?L-1、100.0 mg?L-1)作用于足细胞,培养48 h后检测细胞凋亡率,选取合适的PAN作用质量浓度.将体外培养小鼠足细胞(MPC5)分为对照组、PAN组、DEX1组、DEX2组、DEX3组、GL1组、GL2组、GL3组,对照组加入等体积RPMI 1640培养液培养;PAN组加入PAN,终质量浓度50 mg?L-1;DEXL、2、3组同时加入PAN(终质量浓度50 mg?L-1)和DEX(终浓度分别为0.1μmol?L-1、1.0 μmol?L-1、10.0 mol?L-1);GL1、2、3组同时加入PAN(终质量浓度50.0 mg?L-1)和GL(终质量浓度分别为400 n1g?L-1、600 mg?L-1、800 mg?L-1),培养48 h.流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果 50.0 nmg?L-1 PAN诱导足细胞凋亡较对照组明显升高(P＜0.05),75.0 mg?L-1、100.0 nmg?L-1PAN诱导足细胞凋亡率显著升高,大部分足细胞死亡(Pa＜0.01).DEX1组、2组足细胞凋亡率明显低于PAN组(Pa＜0.05),DEX 3组(10.0 μmol?L-1)干预后足细胞凋亡率显著低于PAN组(P＜0.01).不同质量浓度GL组干预后足细胞凋亡率均显著低于PAN组(Pa＜0.01),随GL质量浓度升高,其抗足细胞凋亡作用降低(P＜0.05).结论 PAN可呈剂量依赖性诱导足细胞损伤,50.0 mg?L-1 PAN为诱导合适的质量浓度.GL及DEX对PAN诱导足细胞损伤均有保护作用,DEX呈剂量依赖方式抑制足细胞凋亡,GL发挥抗足细胞凋亡作用与剂量有关.     

环磷酰胺治疗婴幼儿难治性肾病的护理

目的 探讨环磷酰胺治疗婴幼儿难治性肾病的护理措施.方法 对近十年来本科应用环磷酰胺联合泼尼松治疗的29例婴幼儿难治性肾病患儿进行有针对性的心理护理、基础护理、饮食护理、预防药物的毒副作用,加强病情观察并做好出院后的延续护理.结果 治疗后6个月、12个月有效缓解率分别为55％、76％,治疗期间无护理并发症发生.结论 在口服泼尼松的基础上,应用CTX治疗婴幼儿难治性肾病具有良好的疗效,加强对患儿的护理及对家属的健康教育是取得良好疗效的重要因素.     

地塞米松对嘌呤霉素损伤足细胞nephrin mRNA表达的影响及意义

目的 观察嘌呤霉素(PAN)和地塞米松(DEX)干预后足细胞形态及nephrin mRNA表达变化,探讨DEX保护PAN诱导体外培养足细胞损伤的作用机制.方法 将体外培养的小鼠肾小球足细胞分为三组,分别为对照组、PAN组和DEX组.对照组加入等体积RPMI-1640培养液培养;PAN组加入PAN(终浓度50 mg/L);DEX组同时加入PAN(终浓度50 mg/L)和DEX(终浓度1 mmol/L).培养8h、24 h和48 h后,相差显微镜下观察足细胞形态变化;用图像处理软件分析各组细胞胞体面积的差异.采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测培养24h、48 h时足细胞nephrin mRNA表达.结果 对照组足细胞形态正常,细胞胞体较大,可见树枝样突起及细胞间形成相互连接;PAN诱导足细胞损伤8h、24 h和48 h时,足细胞面积均较对照组明显缩小,分别为对照组的75％、46％和27％(P＜0.01),足细胞足突及细胞间连接消失.DEX组在干预8h、24 h和48 h时,足细胞胞体面积均明显大于PAN组(P＜0.01),部分足细胞可见足突及细胞间连接.PAN组足细胞培养24 h和48 h时,nephrin mRNA表达较对照组明显下降(P＜ 0.01);DEX组干预后24h及48 h,足细胞nephrin mRNA表达均较PAN组显著升高(P＜ 0.01).结论 DEX对PAN诱导足细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调足细胞分子nephrin mRNA表达有关.     

甘草甜素及地塞米松对体外培养足细胞增殖的影响研究

目的通过建立嘌呤霉素(PAN)诱导小鼠足细胞MPC5损伤模型,观察甘草甜素(GL)及地塞米松(DEX)对足细胞及受损足细胞增殖的影响作用,探讨GL在体外培养足细胞损伤中是否具有类似DEX的防护作用。方法体外培养小鼠足细胞,分为对照组、PAN组、GL组、DEX组、PAN+GL组、PAN+DEX组。对照组采用RPMI-1640培养液培养;PAN组加入终浓度50mg/LPAN;GL组加入不同浓度的GL,终浓度分别为50、100、200、400、600、800mg/L;DEX组加入终浓度1μmol/LDEX;PAN+GL组同时加入PAN(终浓度50mg/L)和GL(终浓度分别为50、100、200、400、600、800mg/L);PAN+DEX组同时加入PAN(终浓度50mg/L)和DEX(终浓度1μmol/L),培养24h及48h,采用MTT检测细胞的增殖活性。结果与对照组相比,PAN组24h及48h时足细胞增殖的光密度(A)值均明显降低(P<0.01),抑制率(IE)分别为55.56%、59.10%;GL组中不同浓度组24h时A值较对照组均明显降低(P<0.01),48h时GL50mg/L组A值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各组A值较对照组均明显降低(P<0.01);低浓度GL组(100～400mg/L)对足细胞的IE48h较24h明显下降,高浓度GL组(600～800mg/L)对足细胞的IE48h较24h明显升高。DEX组24、48h足细胞增殖A值较对照组均明显降低(P<0.01),48h时足细胞的IE较24h时差异无统计学意义(P>0.05)。PAN+GL组50～600mg/L浓度范围内,24h、48h时足细胞增殖A值均呈剂量依赖性升高(P<0.01),但PAN+GL组800mg/L浓度时足细胞增殖活性不再增加。PAN+DEX组24、48h时足细胞增殖A值均明显升高(P<0.01)。结论 PAN能显著抑制足细胞增殖,GL及DEX对体外培养的正常足细胞增殖有轻微抑制作用,但二者均能促进受损足细胞的增殖,且GL在一定范围内呈剂量依赖性关系,对PAN诱导足细胞损伤具有类似DEX的防护作用。