流动相的离子强度对RP-HPLC中抗生素色谱峰形的影响

在反相高效液相色谱(RP-HPLC)过程中,流动相的离子强度可显著影响可解离的化合物如抗生素的色谱峰形,原因在于流动相的离子强度较低时,色谱填料的固定相易于过载,使离子化的化合物的色谱峰形呈典型的过载特征——峰形接近直角三角形。随着进样量的增加,色谱区带中高浓度的前半部的保留时间减少,但色谱区带均在同一时刻结束,色谱峰的拖尾因子及峰宽均显著增加,同时被测物与有关物质间的分离也随之变差。选择合适的缓冲盐并适当地增加流动相的离子强度即可显著改善抗生素的色谱峰形,色谱峰的拖尾因子及峰宽均随之降低,同时被测物与有关物质间也更加易于分离。     

注射用氨苄西林钠舒巴坦钠含量测定方法的改进

目的:改进注射用氨苄西林钠舒巴坦钠含量测定方法。方法:ODS柱(150×6.0mm,5μm),流动相:含0.005mol/L氢氧化四丁基铵和0.02mol/L醋酸铵的溶液—乙腈(825:175),用冰醋酸调节pH值为5.0。结果:氨苄西林和舒巴坦的线性范围和回归方程分别为:62～1232μg/ml,C=0.31546A—10.507(r=0.9999);31～621μg/ml,C=0.75961A—2.342(r=1.0000)。本方法与药典方法的测定结果一致。结论:本方法简便、准确、耐用性好。     

HPLC—蒸发光散射检测法测定注射用头孢他啶中碳酸钠的含量

目的:建立高效液相-蒸发光散射检测法测定注射用头孢他啶中碳酸钠的含量。方法:采用Hypersil SCX柱,以0.02mol·L~(-1)醋酸铵溶液(用冰醋酸调节pH至4.8)-乙腈(70:30)为流动相,流速为1.5mL·min~(-1),蒸发光散射检测,检测器温度:40℃,雾化气体(空气)压力:0.35 MPa。结果:Na+在50～501μg·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系,r=0.999 4;平均回收率为100.1％,RSD=0.3％,n=6 ; 日内精密度(RSD=1.0％,n=6)良好。结论:本方法简便、快速,结果准确、可靠,重现性好。     

灰黄霉素中的去氯灰黄霉素杂质

Bailay等曾用高压液相色谱法从灰黄霉素发酵产物中分离出去氯灰黄霉素,二氢灰黄霉素、异灰黄霉素,脱氢灰黄霉素等杂质。本文介绍用硅胶G薄板层析,正已烷:乙酸乙酯(1:1)为溶剂层层,于波长254nm紫外灯照射产生荧光斑点检测国产灰黄霉素所含杂质。 一、去氯灰黄霉素的定性鉴别 1.菌丝丙酮抽提液: 薄板层析呈现9种不同颜色的荧光斑点(图1)。灰黄霉素产品点样量1009γ,可分离到4个荧光斑点(图2)。其中斑点2为灰黄霉素,斑点1、4的荧光强度均比较弱,斑点3为产品中的主要杂质。据文献报道去     

高效液相色谱—蒸发光散射检测法测定氨基糖苷类抗生素中硫酸盐含量的研究

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定氨基糖苷类抗生素中硫酸盐的含量。方法:采用ODS柱,以含0.015mol·L-1正已胺和0.025mol·L-1甲酸的水-乙腈（88:12）为流动相,流速为10mL·min-1,蒸发光散射检测,检测器温度:45℃,雾化气体（空气）压力:0.35 MPa。结果:SO42-在22～435μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9997;平均回收率为99.8％,RSD=0.31％（n=6）;日内精密度（RSD=1.1％,n=8）良好。结论:本方法简便,快速,结果准确,可靠,重现性好。     

HPLC法同时测定注射用氨苄西林钠/氯唑西林钠的含量

用阳离子交换柱的HPLC法同时测定注射用氨苄西林钠／氯唑西林钠中氨苄西林和氯唑西林的含量。色谱条件：采用Hypersil SCX柱，磷酸盐缓冲液（0.01mol／L磷酸氢二铵溶液，用磷酸调节pH值6．0）：乙腈（90：10）为流动相，检测波长225nm。氨苄西林和氯唑西林分别在45-134和44～131μg／ml范围内呈良好的线性关系，日内RSD分别为0．5％和0．6％，回收率分别为99．9％和100．0％，含量测定结果与国家药品标准方法所得结果相符。     

碳青霉烯类抗生素的高效液相色谱峰形研究Ⅱ.亚胺培南色谱峰的展宽和裂分

由于亚胺培南在水溶液中以一对构象异构体(约2：1)的形式存在，因此在某些色谱系统中，因构象异构体在色谱过程中相互间转化的速率较低，导致亚胺培南峰展宽甚至裂分并与有关物质的分离较差。本文定性地研究了柱温、pH、硅胶、固定相和对离子等对亚胺培南峰形和构象异构体分离的影响。结果显示，提高柱温或pH，选用硅胶柱或amideC16柱，均可改善亚胺培南峰形；反之，降低柱温或pH，选用C8柱或C18柱，流动相中添加对离子，均有利于构象异构体的分离。在此研究基础上初步提出了适用于注射用亚胺培南／西司他丁含量测定的HPLC系统。     

碳青霉烯类抗生素的高效液相色谱峰形研究Ⅰ.帕尼培南色谱峰的展宽和裂分

由于帕尼培南在水溶液中以一对构象异构体 (约 1∶1 )的形式存在 ,因此在某些色谱系统中 ,因构象异构体在色谱过程中相互间转化的速率较低 ,导致帕尼培南峰展宽甚至裂分 ,并与有关物质的分离较差。本文定性地研究了柱温、pH、流速、硅胶、固定相和对离子等对帕尼培南峰形和构象异构体分离的影响。结果显示 ,提高柱温或pH ,流动相中添加荷正电的对离子 ,均可改善帕尼培南峰形 ;反之 ,降低柱温或 pH ,增加流速 ,流动相中添加荷负电的对离子 ,均有利于构象异构体的分离。硅胶对构象异构体具有分离能力。在此研究基础上初步提出了适用于注射用帕尼培南含量测定的HPLC系统。     

HPLC法测定帕尼培南/倍他米隆的含量

建立了HPLC法测定帕尼培南 /倍他米隆的含量。色谱条件 :采用C18柱 (5 μm ,2 0 0mm×4 6mm) ,0 0 2mol/L磷酸盐缓冲液 (pH8 0 )—乙腈 (97∶3 )为流动相 ,柱温 45℃ ,检测波长 2 60nm。帕尼培南和倍他米隆分别在 119～ 478和 12 6～ 5 0 5 μg/ml范围内呈良好的线性关系 ,日内RSD分别为 0 4%和 0 5 % ,回收率分别为 99 8%和 10 0 0 % ,含量测定结果与进口药品注册标准方法所得结果相符。     

高效液相色谱法测定呋苄西林钠含量与有关物质

目的建立呋苄西林钠含量与有关物质的HPLC分析方法。方法采用ODS柱，以磷酸盐缓冲液（0．05mol／L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH值至3．5）：乙腈（75：25）为流动相A；以磷酸盐缓冲液：乙腈（20：80）为流动相B，含量测定以流动相A进行等度洗脱，有关物质测定采用线性梯度洗脱，流速为1．0ml／min，检测波长为254nm。结果呋苄西林在0．0964～19．29μg的范围内，进样量与峰面积的线性关系良好（r=0．9999），最低检测限为1．2ng。结论本方法可用于呋苄西林钠的有关物质及含量测定，方法专属性强，重现性好，操作简便。