常染色体显性视网膜色素变性一家系基因排除定位研究

目的对1个四代常染色体显性视网膜色素变性(autosomal dominant retinitis pigmentosa，ADRP)家系在包含已知ADRP致病基因的全部9条染色体上进行基因连锁定位。方法对家系中的所有患者进行眼科及电生理检查。在家系中对第1、3、6、7、8、11、14、17、19号染色体进行基因扫描、基因型分析及连锁分析。结果在全部9条染色体范围内未发现微卫星位点与该家系疾病表型共分离，最大lod score小于-2。结论此家系中排除了目前已知的所有ADRP位点，此家系中应存在新的ADRP连锁位点位于上述9条染色体之外。     

柔红霉素对转染hTERT基因的人晶状体上皮细胞增殖的影响

目的 研究柔红霉素(DNR)对外源性人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染的人晶状体上皮细胞(HLECs)生长的抑制作用及有效药物质量浓度。方法 采用脂质体转染技术,将编码hTERT基因的真核细胞表达质粒pCI-neo-hTERT的质粒ONA导入培养的HLECs,用G418筛选转染成功的抗性克隆并扩大培养,用细胞计数法分别比较转染前后的细胞生长曲线和群体倍增水平(PDL);用MTT比色法检测柔红霉素对转染后HLECs增殖的抑制作用。结果 获得一个可传代达32个群体倍增水平的HLECs克隆,转染后HLECs的生长率高于原代细胞,DNR质量浓度为0.4μg/ml作用1h和0.1μg/ml作用24h能明显抑制转染后的HLECs的增殖(P<0.01),1h和24h的50％抑制质量浓度(ID_(50))分别为2.4μg/ml和0.35μg/ml。结论 外源性hTERT基因的表达可以提高细胞的增殖能力,DNR能有效抑制转染后HLECs的生长。     

中国人一个显性视网膜色素变性家系8号染色体连锁分析

目的用连锁分析法对中国人一个显性视网膜色素变性家系8号染色体进行分析，确定致病基因。方法随机选取8号染色体RP1基因上下约10厘摩(cm)范围内的10对微卫星标记(marker)，确立单倍体型，用两点法计算最大优势对数(LOD SCORE)值。结果所选微卫星标记与该家系表型间最大LOD值小于1。结论RP1基因可能为该家系的非致病性基因，用连锁分析法进行致病基因排除对最终确立致病基因所在染色体的范围具有重要的价值。     

视紫红质基因在显性视网膜色素变性家系的突变筛查

目的：探讨视紫红质基因在视网膜色素变性疾病中的作用。方法：通过聚合酶链反应（PCR）对4个显性视网膜色素变性家系先证者视紫红质基因的5个外显子进行扩增，扩增产物进行直接测序。结果：视紫红质基因全部编码序列在4个家系先证者中均未发现碱基改变，TJE14及TJE15先证者第1外显子上游非编码区中第70个碱基出现MG套峰．在TJE15先证者第5外显子第1185碱基出现MC套峰；而在TJE16先证者中第1外显子上游非编码区中第45个碱基为纯合子GG，第70个碱基为纯合子AA；TJE17先证者第1外显子上游非编码区中第45个碱基为纯合子AA．第70个碱基为纯合子GG。结论：视紫红质基因在中国人群中突变率不如欧美人高，它可能不是导致中国人显性视网膜色素变性的主要致病基因。     

常染色体显性视网膜色素变性家系的基因连锁定位和候选基因的序列分析

目的对一常染色体显性视网膜色素变性（RP）家系进行致病基因的连锁定位，并对候选基因进行序列分析。方法在家系中进行全基因组扫描以确定与疾病连锁的染色体区域，对该区域附近的候选基因进行直接序列分析。结果此家系致病基因的最小可能区域（MCR）被定位于19号染色体微卫星标记D19S246和D19S601之间不到5厘摩（cM）的区域。对该区域附近的候选基因进行直接序列分析的结果并未发现致病性基因突变。结论CRX（锥杆细胞同源基因）和PRPF3l基因是该家系的非致病性基因，在19号染色体上可能存在导致常染色体显性视网膜色素变性（adRP）的新的致病基因。     

常染色体显性遗传白内障一家系基因排除定位研究

目的 对一个4代常染色体显性遗传性先天性白内障（ADCC）家系进行致病基因的定位。方法 对家系所有成员进行眼部检查。选取位于1、2、3、10、11、12、13、16、17、21及22号染色体上已知与ADCC相关的14个致病基因附近的微卫星标记物，并进行多重PCR扩增，经ABI3130型遗传分析仪，Genscan 2．1收集数据，Genotyper 2．1进行基因分型，Linkage软件计算两点LOD值。结果 未发现所选微卫星位点与该家系疾病表型共分离，LOD值均为负值。致病基因与已知的ADCC14个候选基因不存在连锁关系。结论 在此家系中存在新的致病基因有待于进一步的研究。