介入性超声探头消毒的改进

我们近五年来采用避孕套作探头隔膜,使探头消毒的问题得到了解决。方法是:先将避孕套放入器械浸泡液中或高压消毒备用,用时戴无菌手套将消毒好的避孕套用注射用水冲洗后套在探头上,再将     

MEIA法测定他克莫司全血浓度的问题分析

目的探讨微粒子酶免疫分析（MEIA）法测定他克莫司全血浓度出现的问题。方法对南昌大学第一附属医院开展MEIA法测定他克莫司全血浓度以来出现的问题进行统计分析。结果南昌大学第一附属医院2002-2008年MEIA法测定他克莫司全血浓度共计失败21次,其中光路出问题10次,皮带断裂6次,样本注射器漏液2次,标准品顺序放错1次,试剂盒上机前有气泡1次,试剂盒提前变质1次。结论在日常工作中,不但要严格遵守操作规程,认真仔细,减少每一步的操作误差,避免操作错误,更重要的是要按时进行仪器的保养和维护,确保仪器的正常运行,才能确保结果的准确性。     

肝素结合蛋白联合氨基末端脑钠肽前体和降钙素原在脓毒症诊断中的应用价值

目的探讨肝素结合蛋白(HBP)联合传统炎症指标降钙素原(PCT)及心肌损伤标记物氨基末端脑钠肽前体(NT-Pro-BNP)在重症患者发生脓毒症的诊断中的应用价值。方法回顾性收集2018年11月至2020年4月江西省瑞昌市人民医院重症医学科(ICU)32例脓毒症确诊患者为实验组,同期非脓毒症患者48例为对照组;分析比较两组研究对象在一般情况、血HBP、PCT及NT-Pro-BNP值的差异及其与脓毒症发病的关系;绘制受试工作特征曲线(ROC),分析检测指标对脓毒症发病的预测作用。结果两组患者的年龄、性别比较差异无统计学意义;脓毒症组HBP、PCT、BNP水平均显著高于对照组(P 0.05);单变量的ROC分析结果显示,HBP、PCT、BNP的AUC值分别为0.749、0.757、0.703(P 0.05),其中PCT的预测效果最佳(AUC=0.757);双变量预测时,HBP联合BNP时曲线下面积最大(AUC=0.768);3个变量进行预测时,HBP、PCT与BNP联合的曲线下面积为0.764。结论 HBP水平、BNP值和PCT值能有效帮助临床医生诊断患者是否发生脓毒症。其中,HBP和BNP联合检测有助于提高脓毒症诊断效果。     

重组逆转录病毒双表达载体的构建及其对K562细胞增殖活性的影响

目的 构建针对慢性粒细胞白血病bcr-abl b3a2型mRNA的双表达逆转录病毒载体,初步探讨其对K562细胞表型的影响.方法 以逆转录病毒载体pMSCV-neo为骨架,构建eGFP及针对bcr-abl b3a2型mRNA的反义RNA双表达载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40AS,同时构建对照载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40S和pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL80AS,酶切及测序鉴定各重组载体;以脂质体法转染各载体到PT67包装细胞后,G418筛选稳定的病毒产生细胞株,再以NIH3T3细胞测定病毒滴度并感染K562细胞,计数细胞数绘制细胞生长曲线,FCM检测细胞凋亡情况、并用Western blot检测PKR激活情况.结果 酶切及测序结果证实各重组载体构建完全正确;G418筛选到高滴度重组逆转录病毒生产细胞株:PT67-MSCV/GFP、PT67-40as、PT67-40s和PT67-80as,且PT67-40as上清感染组K562细胞生长受抑制,其24 h时早期细胞凋亡率为22.54±3.19%,与除PT67-80as组外的其余各组相比有显著差异(P＜0.05);PT67-40as和PT67-80as处理组细胞PKR磷酸化水平分别增高了59.20%和60.33%,2AP能抑制PT67-40as的作用.结论 成功构建重组逆转录病毒双表达载体,并发现其能抑制K562细胞生长并引起细胞凋亡,通过激活PKR抗肿瘤可望成为肿瘤新的靶向治疗策略.     

慢性粒细胞白血病PKR基因的表达及临床意义

目的检测双链RNA依赖性蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)基因在慢性粒细胞白血病(CML)病人及CML细胞株K562细胞中的表达情况。方法分离CML患者慢性期(CP)15例,加速期(AP)11例,急变期(BC)9例及11例正常供者骨髓或外周血单个核细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测其PKR基因表达情况,并同时检测PKR基因在K562细胞中的表达。结果正常对照组PKR表达阳性率为90.9%,高于加速期的81.8%(P0.05)及急变期的77.8%(P0.05);正常对照组PKR/GAPDH比值为(0.92±0.40)%,高于慢性期的(0.85±0.32)%(P0.05)及加速期的(0.72±0.54)%(P0.05),明显高于急变期的(0.46±0.31)%(P0.01)。K562细胞PKR/GAPDH比值为(0.55±0.13)%。结论 CML细胞及K562细胞株都有一定丰度的蛋白激酶PKR基因表达,为通过激活PKR而靶向诱导CML细胞凋亡奠定理论基础。     

Sysmex XE-2100血液分析仪测定平均血小板体积参考区间的调查

目的对SysmexXE-2100血液分析仪测定正常成年人静脉血平均血小板体积（MPV）的参考区间进行调查,以建立适合本实验室的参考区间。方法参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）C-28A2指南,筛选参考个体、采集运送标本、检测标本和分析数据,并对新建立的参考区间进行验证与比较。结果 MPV在正常人群中不服从正态分布,且不同性别组间差异无统计学意义（P〉0.05）,可合并参考区间。合并后的参考区间为8.4～12.9fL。用200名健康体检者的MPV检测结果对新建立参考区间进行验证,在区间外的数据占3%。结论不同性别人群可合并参考区间,合并后建立的参考区间本实验室可接受。     

天然抗菌肽分离纯化方法的建立

目的寻找高效、广谱的新型天然抗菌肽，建立稳定、有效的分离纯化方法。方法家蝇免疫诱导后制成组织匀浆，经超速离心、分子筛过滤、SephadexG50层析、反相高效液相色谱法（RP-HPLC）、透析浓缩等技术进行分离纯化，用K-B法鉴定抗菌活性。结果组织提取液经超速离心后，用pH6．8Tris-HCI尿素缓冲液作流动相，SephadexG50层析，收集到有明显抗菌活性的成分。再用pH6．8磷酸盐缓冲液作流动相，经RP-HPLC半制备柱进一步纯化，各成分分离效果良好，保留时间为18．008min处的谱峰，有明显的抗菌活性。用RP-HPLC分析柱显示其为单一成分，达到了色谱纯。该抗菌肽对大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantS．aureus，MRSA）均有抗菌活性。结论建立了有效的家蝇抗菌肽分离纯化方法，纯化的家蝇抗菌肽有广谱抗菌活性。     

GSK3β及其选择性剪接体 mRNA实时荧光定量PCR检测体系的构建

目的建立并评估检测糖原合酶激酶3β(GSK3β)及其选择性剪接体(GSK3βΔex8+9)mRNA的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法。方法提取慢性粒细胞白血病(CML)和CML急变期患者外周血或/和骨髓总RNA,分别扩增GSK3β及GSK3βΔex8+9目的片段并构建质粒标准品和标准曲线,建立qRT-PCR法并检测其重复性和特异性。结果成功扩增出GSK3β(133 bp)和GSK3βΔex8+9(219 bp)目的条带,建立了检测两目的基因的qRT-PCR法;相应的标准曲线显示循环阈值与模板浓度线性关系良好,相关系数(r)分别为0.997和0.999;两反应体系的重复性结果显示,批内和批间变异系数(CV)均2%;特异性结果显示,GSK3β反应体系扩增对照组mRNA仅显示GSK3β条带,GSK3βΔex8+9反应体系扩增对照组mRNA均无GSK3βΔex8+9条带出现。结论建立的qRT-PCR法重复性好,特异性强,可用于GSK3β和GSK3βΔex8+9基因表达的定量检测。     

血液学检验课程中进行设计性实验的体会

进人新世纪．全球化竞争日趋激烈，人才的培养已成为众人瞩目的焦点。培养高素质、创新性医学人才已成为高等医学院校的重要目标。《临床血液学与血液学检验》作为医学检验专业的一门主干课程．其实践性非常强，所以本课程的实验教学无论在巩固、运用、补充知识，还是在培养同学们创新思维、提高同学们实践能力等方面都起着不可替代的作用。然而．作为医学检验专业的本科学生，在传统的实验教学模式下．我们并没有体会到这一重要作用，