黄芪多糖对过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)氧化损伤的保护作用。方法培养的人RPE细胞系ARPE-19分为正常对照组、过氧化氢损伤组和不同浓度(1000 mg·L-1、500mg·L-1)APS干预组,正常对照组不作任何处理,过氧化氢损伤组加入200μmol·L-1过氧化氢,APS干预组加入不同浓度(1000 mg·L-1、500 mg·L-1)APS后加入200μmol·L-1过氧化氢。用倒置荧光显微镜观察各组细胞形态变化;MTT检测各组细胞活性;DAPI染色观察各组细胞核形态学变化;实时细胞电子分析系统(real-time cell electronic sensing system,RT-CES)实时记录细胞生长状态;应用caspase-3活性检测试剂盒测定各组细胞中caspase-3的活性。结果过氧化氢损伤组细胞皱缩,悬浮细胞增多,APS干预后细胞状态改善。MTT检测结果显示:1000 mg·L-1、500 mg·L-1APS孵育24 h后细胞存活率分别为(99.86±3.64)%和(101.03±3.52)%,与正常对照组(100%)相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05),过氧化氢损伤组细胞存活率为(56.49±2.30)%,与正常对照组相比显著降低(P<0.01),1000 mg·L-1、500 mg·L-1APS干预后,细胞存活率升高到(88.14±2.97)%和(80.75±3.13)%,与过氧化氢损伤组相比差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。DAPI染色显示正常细胞核均匀淡染,过氧化氢损伤组出现强荧光点和致密的细胞核,APS处理后凋亡程度减轻。RT-CES显示,APS处理可以减少过氧化氢造成的细胞损伤。Caspase-3检测发现过氧化氢造成细胞caspase-3水平升高,APS处理后caspase-3水平下降。结论 APS可以抑制过氧化氢诱导的人RPE细胞系ARPE-19的凋亡,这为APS的临床应用提供了一定的实验基础。     

黄芪多糖对过氧化氢诱导大鼠视网膜神经节细胞氧化损伤的保护作用

目的观察黄芪多糖(APS)对过氧化氢诱导的大鼠视网膜神经节细胞(RGC)氧化损伤的保护作用。方法将RGC-5细胞分为正常对照组、阴性对照组、过氧化氢损伤组、黄芪多糖干预组。正常对照组不做处理,阴性对照组和过氧化氢损伤组分别加入1 000μg/ml的黄芪多糖和100μmol/L的过氧化氢,黄芪多糖干预组加入不同浓度(1 000μg/ml、500μg/ml、250μg/ml)黄芪多糖后加入100μmol/L的过氧化氢。用倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化;MTT法检测细胞活性;DAPI染色观察细胞核形态学变化;实时细胞电子传感器(RT-CES)分析系统记录细胞生长状态。结果倒置相差显微镜下正常RGC-5细胞呈扁平梭形,边缘清晰,有较短突起,过氧化氢损伤组细胞皱缩,细胞密度减低,轴突缩短,其他各组细胞形态未见明显改变。MTT:各浓度黄芪多糖干预组的细胞活性均较过氧化氢损伤组升高,差异具有统计学意义(P0.01)。DAPI染色:过氧化氢处理后RGC-5细胞核可见染色质凝聚,边缘化;黄芪多糖干预后仅少量细胞出现染色质凝聚现象。RT-CES:与正常对照组相比,过氧化氢损伤组细胞生长受到抑制,其余各组细胞生长曲线基本正常。结论黄芪多糖可以抑制过氧化氢诱导的大鼠RGC凋亡,这为黄芪类药物治疗糖尿病视网膜病变提供了一定的实验基础。     

龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用

目的　探讨龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏ-ｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ,ＥＡＵ）的治疗作用。方法　Ｌｅｗｉｓ大鼠随机分为对照组６只、ＥＡＵ组１８只和ＬＸＴ组１８只,光感受器间维生素Ａ结合蛋白免疫ＥＡＵ组和ＬＸＴ组大鼠。观察大鼠生理特征及眼部炎症变化,出现葡萄膜炎症时给予ＬＸＴ组大鼠龙胆泻肝汤灌胃;免疫后１２ｄ比较各组大鼠眼组织病理学差异;免疫后每隔４ｄ检测房水蛋白及血清中白蛋白、球蛋白变化。结果　成功制备了ＥＡＵ大鼠模型;免疫后５ｄ大鼠开始出现葡萄膜炎症状,１２ｄ炎症最重。ＥＡＵ大鼠肛温在１ｄ、７ｄ、１０ｄ和１２ｄ高于对照组（Ｐ＝０．０２０、０．０００、０.０１５、０．００１）;免疫后１２ｄ,ＥＡＵ组房水蛋白浓度为（３６．０３±３．２３）ｇ?Ｌ－１,ＬＸＴ组为（２４．６７±２．６０）ｇ?Ｌ－１,差异有显著统计学意义（Ｐ＝０．０００）;组织病理学显示ＥＡＵ组视网膜结构破坏程度明显高于ＬＸＴ组（Ｐ＝０．０００）。ＥＡＵ组免疫后４ｄ、８ｄ及１２ｄ白蛋白均低于对照组（Ｐ＝０．０４５、０．０００、０.０３３）,ＬＸＴ组４ｄ和８ｄ白蛋白低于正常（Ｐ＝０.０４５、０．００５）,但１２ｄ时恢复至正常;１２ｄ时ＥＡＵ组球蛋白明显高于正常（Ｐ＝０．０４７）,ＬＸＴ组未见明显异常。结论　龙胆泻肝汤能有效减轻ＥＡＵ大鼠前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部组织结构,增强机体抗氧化能力,调节免疫状态,对ＥＡＵ发挥治疗作用。     

Toric硬性透气性角膜接触镜对33例高度散光眼的视力矫正作用

目的　评估Ｔｏｒｉｃ硬性透气性角膜接触镜（ｒｉｇｉｄｇａｓ-ｐｅｒｍｅａｂｌｅｃｏｎｔａｃｔｌｅｎｓ,ＲＧ-ＰＣＬ）对高度散光眼的视力矫正作用。方法　收集高度散光患者３３例（６２眼）,单纯角膜散光或眼内散光＜１．００ＤＣ验配后环曲面ＲＧＰＣＬ,眼内散光≥１．００ＤＣ验配双环曲面ＲＧ-ＰＣＬ。对高度散光眼配戴框架镜及ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ的视力矫正效果进行比较;对＞２．００～４００ＤＣ、＞４．００ＤＣ散光眼配戴ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ相对框架镜的矫正幅度进行比较;对伴有高度近远视、低中度近远视的散光眼配戴ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ的视力矫正效果进行比较。结果　５３眼验配后环曲面ＲＧＰＣＬ,相对裸眼视力提高０．６７±０２４,９眼验配双环曲面ＲＧＰＣＬ,相对裸眼视力提高０．５０±０．２４,两种ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ对视力的矫正作用均明显优于框架镜（ｔ＝９２１,Ｐ＝０．００;ｔ＝６．４９,Ｐ＝０．００）;＞２．００～４．００ＤＣ、＞４．００ＤＣ散光眼配戴ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ后相对框架镜矫正视力分别提高０．１７±０．１５、０．２６±０１４,两者比较差异有统计学意义（ｔ＝２．４７,Ｐ＝０．０１６）;伴有不同球镜度数的高度散光眼配戴ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ后,视力矫正效果差异无统计学意义（ｔ＝０．４７,Ｐ＞０．０５）。结论　ＴｏｒｉｃＲＧＰＣＬ对高度散光眼有理想的矫正效果,且对于＞４．００ＤＣ散光眼矫正效果更佳,其对散光的矫正作用与球镜度无关。     

贝伐单抗和雷珠单抗治疗渗出型老年性黄斑变性有效性meta分析

目的 系统评价贝伐单抗和雷珠单抗治疗渗出型老年性黄斑变性（AMD）的有效性。方法 计算机检索荷兰医学文摘数据库Embase、美国临床医学期刊全文数据库Ovid、美国国立医学图书馆医学数据库Pubmed、中国知网、万方数据库、维普中文期刊数据库。收集国内外公开发表的关于贝伐单抗和雷珠单抗治疗渗出型AMD的随机对照试验。检索时限截止至2013年11月。按照纳入与排除标准筛选文献、提取资料和进行质量评价。用RevMan 5.2.6软件进行统计分析。比较贝伐单抗和雷珠单抗治疗前与治疗后3、6、12个月渗出型AMD患者的视力和黄斑中心凹厚度。结果 最终纳入5个研究,共1954例渗出型AMD患者。其中,贝伐单抗治疗组967例,雷珠单抗治疗组987例。Meta分析结果显示,贝伐单抗治疗组与雷珠单抗治疗组视力提高值比较,差异无统计学意义［3个月：加权均数差（WMD）=0.32,95%可信区间（CI）为-0.84~1.49,P=0.59;6个月：WMD=0.47,95%CI为-0.67~1.62,P=0.42;12个月：WMD=0.84,95% CI为-0.23~1.90,P=0.12］;贝伐单抗治疗组与雷珠单抗治疗组黄斑中心凹厚度降低值比较,差异无统计学意义（3个月：WMD=6.21,95%CI为-6.23~18.65,P=0.33;6个月：WMD=4.06,95% CI为-6.16~14.27,P=0.44;12个月：WMD=-5.39,95%CI为-14.41~3.63,P=0.24）。结论 贝伐单抗与雷珠单抗治疗渗出型AMD具有相似的治疗效果。