737例HIV抗体重组免疫印记的不确定情况分析

目的 了解重组免疫印迹（RIBA）确证人免疫缺陷病毒（HIV）抗体的不确定情况,探索转归规律,为实验室检测和艾滋病防治提供参考依据。方法 回顾性分析2018年成都地区采用RIBA确证HIV抗体为不确定的人群特征和条带特征,追踪不确定者的抗体复查结果和时间。结果 共有737名抗体不确定者,占检测人数的10.87%。女性不确定比例高于男性。各类送检来源中,孕产妇的不确定比例（44.05%）最高。抗体不确定带型共有15种,以gp160（46.68%）、gp160和gp41（21.44%）、p24（16.01%）为主。170名（23.07%）不确定者进行了抗体复查,65人转阳,18人转阴,87人不确定。老年人的转阳率较高,≥70岁可达94.12%（〖XC小五号.EPS;P〗=42.941,P＜0.001）。gp160、gp41带型转阳率（84.75%）较高（〖XC小五号.EPS;P〗=74.132,P＜0.001）,p24转阴率（31.58%）较高（〖XC小五号.EPS;P〗=13.782,P=0.001）。转阳者和复查不确定者的复查间隔时间分布差异有统计意义（H=7.270,P=0.026）。结论 女性通过RIBA检测HIV抗体的不确定比例高于男性。RIBA确证HIV抗体的不确定带型主要是gp160、gp160和gp41、p24。在有限条件下可优先加强高转阳率带型（gp160和gp41）及高转阳率人群（老年人）随访。     

病毒学抑制的HIV - 1感染者免疫衰老相关CD4+T淋巴细胞亚群的分析

目的 了解病毒学抑制的HIV - 1感染者CD4+ T淋巴细胞免疫衰老状态,探索主成分分析法能否用于评价HIV - 1患者的免疫衰老。方法 选择抗逆转录疗法治疗半年以上成年病毒学抑制HIV - 1感染者,根据CD4+T淋巴细胞计数结果分为CD4无缺陷组（≥500个/μl）和缺陷组（＜500个/μl）,每组65人,另选择22名未暴露且HIV - 1抗体检测阴性者作为对照组,采用流式细胞仪检测其CD4+T淋巴细胞（CD45RA+CD27+）、活化CD4+T淋巴细胞（HLA - DR+CD38+）和复制性衰老CD4+T淋巴细胞（CD57+CD28-）水平,运用主成分分析对三种细胞进行综合分析。结果 缺陷组（27.64%）和无缺陷组（32.04%）的初始CD4+T淋巴细胞较对照组（51.27%）有明显下降（F = 24.35,P＜0.001）,活化CD4+T淋巴细胞（14.26%,13.03%）较对照组（2.35%）有明显上升（F = 19.75,P＜0.001）;缺陷组（12.64%）的复制性衰老CD4+T淋巴细胞较无缺陷组（7.36%）和对照组（3.58%）有明显升高（F = 6.68,P = 0.002）,而无缺陷组和对照组之间无统计学差异;主成分分析能区分出三组对象CD4+T淋巴细胞免疫衰老的差异程度:缺陷组＞无缺陷组＞对照组（F = 20.787,P＜0.001）。结论 病毒学抑制良好的HIV - 1感染者即使CD4+T细胞数量正常也表现为免疫衰老,CD4+T细胞数量异常的人免疫衰老状态更严重,可运用主成分分析对病毒学抑制的HIV - 1感染者免疫衰老相关细胞进行综合分析。     

2016-2017年成都市高新区公共场所用品微生物检测结果

目的 了解成都市高新区公共场所用品卫生状况,评价公共场所卫生水平,为今后卫生监管提供依据。方法 对2016-2017年成都市高新区公共场所用品微生物检测情况进行调查,分析不同公共场所公共用品微生物检测项目的样品合格率差异。结果 2年共检测公共用品1416份,合格1355份,样品合格率为95.69%,2016和2017年样品合格率分别为95.66%和95.72%,差异无统计学意义(P>0.05)。住宿、理发美容和文化娱乐类样品合格率分别为98.13%(841/857),92.46%(319/345)和 91.12%(195/214),差异有统计学意义(〖XC小五号.EPS;P〗=28.32,P<0.05)。毛巾和茶具样品合格率较低,分别为86.87%(172/198)和94.71%(322/340),差异有统计学意义(〖XC小五号.EPS;P〗=55.84,P<0.05)。细菌总数,大肠菌群和金黄色葡萄球菌样品合格率分别为94.49%(617/653),98.17%(964/982)和98.88%(616/623),差异有统计学意义(〖XC小五号.EPS;P〗=45.16,P<0.05)。结论 成都市高新区公共场所用品微生物卫生状况较好,但文化娱乐和理发美容类毛巾和茶具样品合格率较低,今后应加强这类物品的卫生监测,提高卫生质量。     

肺炎克雷伯菌基因无痕敲除方法的建立

目的 建立可行的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)基因无痕敲除方法.方法 PCR扩增得到目的基因上下游同源臂融合片段,将其克隆到自杀载体pKO3-km,构建重组质粒.提取重组质粒,通过电转化转入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,在43℃条件下培养筛选得到重组质粒整合到细菌基因组上的重组子,再利用质粒pKO3-km上的sacB基因在含蔗糖的平板上反向筛选得到突变株.结果与结论 成功构建突变株,且突变株基因组上没有任何抗性筛选标记残留.该研究为肺炎克雷伯菌基因功能研究提供了基因敲除技术.     

HIV-1感染者治疗后的T淋巴细胞异常激活研究

  目的   探讨外周全血中异常激活的T淋巴细胞亚群与人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染者免疫功能恢复的关系,探讨HIV-1 DNA病毒库的大小与T淋巴细胞亚群的关系。  方法   以2019年7月–2020年5月进行常规检测的HIV-1感染者为目标人群,入组时根据抗逆转录病毒疗法（antiretroviral therapy, ART）治疗后CD4+ T细胞是否达到500 cells/ μL,将HIV-1感染者分为两组,其中缺陷组76例,无缺陷组61例。同时选择22例未暴露且HIV-1抗体检测阴性者作为对照组。对以上3组人群的T细胞亚群进行检测,并对缺陷组44例和无缺陷组33例共计77例进行HIV-1 DNA病毒库检测。6个月后随访缺陷组和无缺陷组,收集缺陷组（74例）和无缺陷组（59例）共133例血液样本中的CD4+ T细胞检测结果。  结果   入组时,缺陷组的活化CD4+、CD8+ T细胞含量均高于无缺陷组和对照组。缺陷组衰老CD4+ T、CD8+ T细胞含量与无缺陷组相当,均高于对照组,但仅在衰老CD8+ T细胞上差异有统计学意义。缺陷组比对照组检出更高的效应记忆CD4+ T和CD8+ T细胞,无缺陷组只检出更高的效应记忆CD8+ T细胞。缺陷组和无缺陷组均表现出比对照组更低水平的中心记忆CD4+ T和CD8+ T细胞,无缺陷组中心记忆CD4+ T细胞比缺陷组还低。对于幼稚细胞而言,无缺陷组表现出更高水平的幼稚CD4+ T细胞,缺陷组和无缺陷组的幼稚CD8+ T细胞较对照组下降。HIV-1 DNA病毒库大小与CD4+ T细胞数量和各T细胞亚群均无相关。活化CD4+ T细胞、活化CD8+ T细胞、中心记忆CD4+ T细胞与6个月以后的后续CD4+ T细胞数量呈负相关,r分别为－0.378、－0.334、－0.322（P<0.05）;幼稚CD4+ T细胞、幼稚CD8+ T细胞与后续CD4+ T细胞数量呈正相关,r分别为0.350、0.267（P<0.05）。  结论   HIV-1感染者存在不同程度的T细胞亚群异常激活,部分T细胞亚群的异常激活与后续免疫功能的恢复有关,病毒库的大小与T细胞亚群无相关关系。     

HIV-1病毒学抑制者的总HIV DNA水平及其相关因素初探

目的 了解人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus, HIV)感染者在抗逆转录病毒治疗(antiretroviral therapy, ART)中达到病毒学抑制后(病毒载量<50cp/ml)的外周血总HIV DNA水平，初步探索总HIV DNA水平及相关因素。方法 纳入2019—2020年成都市在治人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者，收集人口学和ART信息，采集乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid, EDTA)抗凝全血，检测外周血总HIV DNA、病毒载量(viral load, VL)和部分T淋巴细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺、CD38⁺CD4⁺、CD38⁺CD8⁺),以总HIV DNA分组进行统计分析。结果 共109人HIV-1感染者符合标准，其外周血总HIV DNA有65人低于定量下限(10cp/10⁶细胞),44人介于10.63～223.77c...