A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

细胞凋亡与白血病

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）或程序性细胞死亡（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）是细胞发生的积极的死亡过程。是细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束自己生命的过程。不仅存在于正常组织与器官,调节着机体细胞生长与更新间的平衡稳定,也存在于各种肿瘤组织,与肿瘤的发生有着密切的联系,它与白血病的关系也越来越引起人们的重视,我们就此问题进行综述。１　基本概念细胞凋亡与坏死不同,是机体清除生存组织中单个细胞的一种死亡形式。坏死是病理状态,始于细胞膜的损伤,内容物流出,可以…     

老药“变脸”谁在愚弄百姓？—— 老药换新颜，究竟为哪般

许多药品冠名五花八门．且价格差别比较悬殊。“一药多名”多见于西药尤其是抗生素类药品．有的药品甚至有数十个商品名。“一药多名”不要说消费者，就是执业的医生和药师也很难记全。“一药多名”给医生开处方、药剂师调配，护士执行医嘱等带来诸多不便。厂家挖空心思换个“好名字”,多做些广告后,销售量就大幅度上升。     

耳穴贴压配合穴位按摩预防骨科术后使用PCIA患者尿潴留的护理效果观察

疼痛是骨科手术后普遍面临的一个问题,不利于患者的治疗,并影响术后康复锻炼.静脉自控止痛(patient controlled intravenous analgesia,PCIA)具有镇痛效果好、用药量少、可根据个体对止痛药的需要投放用药量等优点[1].临床上骨科手术的患者已经广泛使用PCIA,但使用镇痛泵持续自控镇痛的大部分患者可在术后1～2 d出现尿潴留[2].临床护理中有一些可以促使患者排尿的操作,但却不能杜绝尿潴留的发生,为减少术后尿潴留,缩短术后排尿时间,增加术后舒适度,我科在骨科术后使用PCIA患者的常规护理基础上,给予中医护理措施干预,使用耳穴贴压配合穴位按摩,取得满意疗效,现报道如下.     

蓖麻毒素B链蛋白多克隆抗体的制备及胶体金免疫层析快速检测法的建立

目的:结合蓖麻毒素(RT)的多克隆抗体和单克隆抗体,建立检测RT的胶体金免疫层析快速检测方法。方法:将纯化得到的重组蓖麻毒素B链蛋白(rRTB)免疫兔,获得抗血清经正辛酸-硫酸铵分步沉淀法纯化,利用间接ELISA方法鉴定抗体效价和特异性。结合抗重组蓖麻毒素A链蛋白(RTA)单克隆抗体,采用双抗体夹心法,建立检测天然RT的胶体金免疫层析技术,并对该方法进行特异性、敏感性、稳定性等评价;在奶粉、血清、土壤等材料中进行模拟添加RT检测。结果:间接ELISA法测定抗体效价为1:105,并可特异性与rRTB结合;胶体金法能在5~10 min内完成检测,多种不同的蛋白及近缘毒素检测评价显示该法特异性良好,检测灵敏性为50 ng/ml,环境样品的检测敏感性也相同。结论:利用兔抗RTB多抗和抗RTA单抗,建立了适用于现场的快速、特异检测天然蓖麻毒素的胶体金免疫层析方法。     

基于镧系高敏荧光的生物毒素现场快速检测方法的研究

目的 利用时间分辨荧光技术建立一种可快速、准确地对蓖麻毒素、A型肉毒毒素及产气荚膜梭菌ε毒素进行定量检测的方法.方法 首先合成了一种可见光激发的镧系荧光微球,通过比较不同粒径的铕离子荧光微球,筛选出最佳粒径的微球偶联标记效价最高的捕获抗体,分别与相应检测抗体平行组合,确定最优的配伍组合条件建立检测方法.其次,对该法的敏...     

早期联合治疗对陈旧性股骨干骨折手术治疗效果的影响

目的:对陈旧性股骨干骨折术前早期进行骨科医师、康复医师及护理的联合指导膝关节功能工作,观察早期引入功能锻炼治疗的的疗效.方法:将符合研究标准的股骨干骨折患者随机分为两组,一组为联合治疗组,入院后骨科医师与收治科室医师、康复师、护理进行联合治疗及时调整骨牵引、进行适当的早期膝关节功能锻炼.另一组为对照组,骨科医师进行骨牵引处理后收入需行优先急诊处理的普外、胸外、神经外科等科室,待病情平稳后转入骨科进行手术治疗.根据纳入标准,每组各收集病例30人.对两组的年龄、手术时机、手术时间、术中是否进行股骨的短缩处理、术后3个月膝关节屈膝功能予以记录并进行统计学分析.结果:两组患者的年龄、手术时机差异均无统计学意义.联合组手术时间及术中行股骨短缩例数少于对照组;联合组术后3个月膝关节主动屈曲活动范围优于对照组.结论:早期联合治疗,术前引入膝关节功能治疗、规范化牵引,更有利陈旧性股骨干骨折的手术治疗,有利于恢复更好的膝关节功能.     

宣教材料在飞行人员健康教育中的应用

目的探讨健康宣教彩页和保健手册在飞行人员健康教育中的作用。方法观察组在进行集体宣教和一对一口头宣教的基础上,发放健康宣教彩页和保健手册;对照组仅进行集体宣教和口头宣教。结果观察组对健康教育的满意度高于对照组;自行编制的健康教育试题观察组得分高于对照组。结论健康宣教彩页和保健书籍的应用,能够提高飞行人员健康教育效果和满意度。     

1例以酮症酸中毒起病的初发2型糖尿病的护理

正随着人口老龄化、人们生活方式的改变,我国糖尿病的患病数量正逐年增加。根据国际糖尿病联盟的数据,中国2013年糖尿病的患病人数为9 840万,居全球首位。预计到2035年,中国的糖尿病患病人数将达到1.43亿~([1])。糖尿病已经成为一种严重威胁人类健康的重要疾病。根据糖尿病的临床表现和病理生理机制,目前主要将糖尿病分为1型和2型两大类~([2])。