氡致BEAS-2B细胞早期恶性转化的研究

目的了解氡致BEAS-2B细胞早期恶性转化的特征。方法通过细胞气体染毒装置,将永生化的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)暴露于放射性气体氡,通过测定经氡照射后细胞周期、凋亡率、线粒体膜电位,判断照射后BEAS-2B细胞是否存在早期恶性转化趋势。结果染氡后细胞G1期缩短,S期延长,染氡细胞传代后晚期代数细胞凋亡率相比早期代数细胞降低,线粒体膜电位降低。结论短期染氡后,细胞周期等指标发生变化,出现恶性转化趋势。     

针灸治疗腰椎间盘突出症临床研究

综述近年来针灸治疗腰椎间盘突出症的方法和临床研究进展,得出如下结论：针灸在腰突症的保守治疗方法中占有不可替代的重要地位.今后应建立统一的疗效标准,加强研究深度,总结出公认的最佳治疗方法或方法组合,最大程度地发挥针灸治疗腰突症的优势和潜力.     

DNA修复基因甲基化与肿瘤发生关系的研究进展

肿瘤抑制基因的异常甲基化可能导致基因的表达沉默,当DNA修复基因包括MGMT、hMLH及BRCA等发生甲基化会导致修复蛋白合成减少,细胞修复损伤能力降低,基因组稳定性降低,基因突变的概率增高最终导致肿瘤发生.     

线粒体部分敲除对氡染毒人支气管上皮细胞损伤效应的影响

[目的]观察线粒体部分敲除对氡染毒人支气管上皮细胞的损伤效应。[方法]分别对线粒体DNA部分敲除的人支气管上皮细胞（ρ-HBE细胞）和未经敲除的ρ＋HBE细胞暴露20000Bq/m3的氡及氡子体,观察两种受试细胞第10代（低剂量组,ρ＋HBE-Rn10和ρ＋HBE-Rn10）及第30代（高剂量组,ρ-HBE-Rn30和ρ-HBE-Rn30）细胞的增殖能力、细胞周期以及活性氧（ROS）水平的变化。[结果]氡染毒后,两高剂量组和低剂量组（ρ＋HBE-Rn10）细胞存活分数（SF）均降低;低剂量组ρ＋HBE细胞中的S期细胞减少,G2/M期细胞增加,高剂量组的S期细胞增加,G1期细胞减少;各染毒剂量的ρ＋HBE细胞和ρ-HBE细胞,ROS水平均升高（P〈0.05）。[结论]经氡染毒后,ρ-HBE细胞在生长速度、细胞周期、ROS产生量等生物学指标上与ρ＋HBE细胞有明显改变,表明氡所产生的细胞损伤效应与线粒体的结构和功能障碍密切相关。     

基于T7核酸外切酶的一步法克隆初探

目的 检测T7核酸外切酶是否可用于同源重组介导的DNA片段重组克隆技术.方法 利用PCR方法克隆pUC 19片段和卡那霉素供体片段后与T7核酸外切酶混合反应,将反应物直接转化大肠杆菌并克隆计数.结果 末端互补的线性化双链DNA分子与T7核酸外切酶反应后,无需纯化,即可直接用于转化大肠杆菌.和其他不依赖于连接酶的克隆法相似,T7核酸外切酶的一步克隆法(T7 exonuclease dependent one-step cloning,EDOC)的效率与末端互补序列的长度成正比,互补序列大于等于10 bp时即可稳定地产生克隆,互补区内的突变不利于同源重组发生.测序结果显示EDOC是一种精确克隆法,并未发现缺失,插入和点突变生成.结论 证实了T7核酸外切酶可被用于重组DNA的精确拼接,并成功建立了依赖于EDOC.     

“二位学说”理论

针刀治疗是一种闭合性的微创手术治疗方法,治疗时在非直视下既要保证手术操作的安全性,又要取得很好的临床疗效,这与我们是否能够直接作用于真正的病灶部位以及拥有宏观的三维立体感有着直接关系。二位学说理论是通过临床表现及相关骨性标志,准确找到病灶体表位,也就是我们所说的第一位。术者在施术过程中根据手感、针感等感觉找到体内的第二位。在第二个位上进行治疗可以更好地直达病所,解决患者的根本问题,但是这需要术者拥有丰富的临床经验,扎实的解剖学基础,结合医者的手感、患者及时反馈的针感和施术者的脑感,构建起宏观的三维立体感,行安全有效之术。     

经蝶入路显微切除垂体瘤术后的观察与护理

目的探讨垂体瘤术后的护理措施,总结护理经验。方法对22例垂体瘤术后进行观察与护理。结果22例经回访1~8年,视力视野障碍均有不同程度改善12例,内分泌改善10例。结论针对患者术后易出现的并发症,早期采取相应的治疗和护理措施,对手术的成功有十分重要的辅助作用。     

DNMTs在长期氡暴露致BEAS-2B细胞恶性转化过程中的作用

目的检测经长期氡暴露而发生恶性转化的人永生化支气管上皮细胞(BEAS-2B)中甲基化转移酶(DNMT)基因的动态变化,从表观遗传学层面探索氡致肺癌的作用机制。方法应用流式细胞仪分析法,软琼脂集落形成及裸鼠成瘤实验鉴定长期氡暴露过程中BEAS-2B细胞的恶性转化程度,以QPCR方法检测DNMT1、DNMT3A的mRNA表达量。结果与对照组细胞相比,染氡30代传代至40代的细胞软琼脂克隆形成率已升高至27.27%±1.10%(P<0.05),转化细胞在裸鼠体内成瘤率达到30%(P<0.05),呈低分化癌;QPCR结果显示各染氡组传至40代细胞DNMT1 mRNA表达量均低于对照组,DNMT3A mRNA表达量均高于对照组。结论建立并确认了体外染氡诱发BEAS-2B细胞恶性转化模型,且细胞恶性程度随染氡代数和传代代数的增加呈现剂量-效应关系,细胞出现移植成瘤。本试验条件下,DNMTs表达的改变导致细胞增殖失控,打破内环境平衡,这可能是在表观遗传学中,长期氡暴露致BEAS-2B细胞恶性转化的机制之一。     

一起医疗事故行政处罚案例引起的思考

《医疗事故处理条例》自2002年实施以来,为妥善解决医疗纠纷争议,保护医患双方的合法权益起到了十分重要的作用。但随着我国法制的不断健全,人们法制意识、维权意识的不断增强,《医疗事故处理条例》在解决各类医疗纠纷时已出现明显桎梏。现结合一起医疗事故行政处罚案例,探寻《医疗事故处理条例》在实际运用过程中存在的问题,并提出相应建议。     

小动物CO_2安乐死装置的应用研究

目的为了充分了解CO2安乐死装置的应用和进行动物安乐死的效果,比较动物种属和数量与死亡时间有无差异,为评价和使用CO2安乐死提供依据。方法用HOPE-MED8160型小动物善终处置设备对三种实验室常用的啮齿类小动物(大鼠、小鼠、豚鼠)进行CO2安乐死处理,向安乐死仓内缓慢充入CO2气体直到到达最高浓度99.9%,分别观察1只、5只、10只动物在进行CO2安乐死时达到死亡的CO2浓度,动物死亡所需要的时间,动物在死亡过程中的各种反应,包括神经行为改变、呼吸变化,无线遥测系统检测的心率、体温以及活动度的变化等。结果随着CO2浓度的增加,动物的呼吸先加快、加深后减慢,最终变得极其微弱直至死亡,心率逐渐减慢至0。大鼠和小鼠的死亡时间(分别是(4.80±0.64)min和(4.28±0.58)min)和死亡时CO2浓度(分别是(89.20±4.32)%和(87.33±2.52)%)之间无统计学差异(P>0.05),豚鼠死亡时间较长,(5.92±0.77)min,死亡时的CO2浓度达到99.9%。动物的心跳终止均是在呼吸停止后一小段时间(约0.5min)。同时放置同种动物数量越多,死亡需要时间会有所延长。动物体温在整个安乐死过程中基本没变化,活动度在开始通CO2时有所增加,大约到30%～40%的CO2浓度时活动度变为0。结论 CO2小动物善终处置设备可以进行安乐死,动物在死亡过程中无明显的挣扎、抽搐现象。CO2处理是一种合适的动物安乐死方式。