实用缺锌动物模型的饲料研究

研究实用缺锌饲料是建立缺锌动物模型的重要条件。以蛋清为缺锌饲料的蛋白质原料,经EDTA络合后,锌含量可低于0.8mg/kg,与经EDTA处理后的大豆粉、酪蛋白含锌量比较。结果显示,经处理后的蛋清含锌量明显低于大豆粉、酪蛋白中的锌含量。使用处理后蛋清配制的缺锌饲料锌的含量为1.07～2.16mg/kg。本法制成的饲料价格便宜,含锌量低,是一种实用的缺锌动物模型的半合成饲料。     

氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究

为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测。结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100％,均可破坏HAV核酸5’非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性)。结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5’非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5’非编码区以判定HAV灭活与否。     

免疫磁性粒子分离水和食品中鼠伤寒沙门菌的初步研究

自新中国成立以来,各种传染病的发病率,尤其是烈性传染病得到了有效的控制.但常见的肠道传染病诸如通过水和食品为媒介引起的食物中毒、伤寒、菌痢,却每年都有发生,甚至有时是暴发流行.     

免疫磁性粒子的制备及性能初步观察

目的：将免疫磁性分离技术应用到水和食品致病微生物检验工作中，达到快速地从样品中分离致病生生物的目的，以提高检测速度。方法：对磁性粒子首先进行高分子物质的包被，继而进行了三种磁性粒子对细菌的非特异性吸附现象和免疫磁性粒子对细菌特异性结合能力的观察。结果：示经包被的磁性粒子对细菌有很强的非特异性吸附，免疫磁性粒子对相应的细菌方法节省很多时间，可快速从样品中分离出致病微生物。     

氯灭活甲型肝炎病毒与其核酸变化关系的研究

为了解氯灭活ＨＡＶ与ＨＡＶ核酸变化的关系，采用大片段逐步步移ＲＴ一ＰＣＲ技术对ＨＡＶ核酸全序列进行扫描。结果，在２５℃以１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用３０ｍｉｎ，可完全灭活ＨＡＶ，而５ｍｇ／Ｌ有效氯作用６０ｍｉｎ则不能。在ＨＡＶ核酸全序列中，各部分对氯的抗力不一，以５′ＮＴＲ为敏感。用１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用３０ｍｉｎ，检测其为阴性，其次为３′ＮＴＲ，当１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用６０ ｍｉｎ时，亦为阴性；结构区的某些片段对氯的抗力较强。以１０ｍｇ／Ｌ有效氯作用３０ｍｉｎ，进一步缩小氯对ＨＡＶ核酸作用敏感区间｛即近５′ＮＴＲ）的检测发现，病毒最初的１～６７１ｂｐ检测呈阴性，而６６９～１０２３ｂｐ仍呈阳性。结果表明，氯灭活ＨＡＶ与其核酸５′ＮＴＲ的损伤一致，在充分了解氯对ＨＡＶ作用机理的基础上，ＰＣＲ可用于消毒效果的评价。     

PCR检测甲型肝炎病毒研究进展

甲型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＡｖｉｒｕｓ ,ＨＡＶ )是一种单股正链ＲＮＡ病毒 ,是全球急性传染性肝炎的主要病因 ,因为很容易引起甲型肝炎 (以下简称甲肝 )暴发流行 ,日益引起众多卫生工作者的普遍关注。目前评价饮水卫生的微生物指标并不能揭示感染性病毒的存在 ,因此如何建立一套有效的ＨＡＶ检测方法在控制甲肝发病、流行过程中显得尤为重要。通过细胞培养检测ＨＡＶ不仅灵敏度差、操作复杂 ,而且病毒的培养周期长 ,不易获得高滴度病毒 ,因此限制了它的应用。ＰＣＲ以其更高的灵敏度和特异性 ,广泛应用到微生物检测领域 ,目前已建…     

氯对甲型肝炎病毒抗原性及核酸多态性影响的研究

为了探讨氯灭活甲型肝炎病毒 (HAV)的机制 ,采用酶联免疫吸附试验和RNA的随机引物扩增指纹图谱技术分别检测在氯灭活HAV前后病毒抗原以及核酸多态性的变化。结果显示 :灭活病毒的感染性(加氯 10mg L或 2 0mg L接触 30min)先于破坏病毒的抗原性 (加氯 10mg L或 2 0mg L接触 6 0min) ,当病毒感染性被灭活时 ,往往可以看到病毒核酸多态性的变化。结果表明 :氯灭活HAV可能是通过破坏核酸局部片段所致。     

免疫PCR检测沙门菌方法的建立及其应用

1992年Sano等人[1]首次报告用免疫PCR方法检测微量的牛血清白蛋白.该方法将PCR技术的高敏感性与抗原抗体反应的持异性结合起来,具有极高的敏感性和特异性,更使PCR技术应用于对蛋白等非核酸类物质的检测.髓后的报道大都用于检测HBsAg[2]、TNF[3]等可溶性蛋白.本文利用链亲和索和生物素之间的高度亲和力,采用生物素化羊抗鼠IgG作二抗,将单抗与DNA相连接,建立免疫PCR检测方法,用以检测颗粒性抗原细菌,并与ELISA方法进行了比较.     

丁胺卡那去除甲肝病毒培养细胞中支原体的效果观察

探索丁胺卡那云除ＨＡＶ培养细胞中污染支原体的效果,发现常规剂量（１００Ｕ／ｍｌ）的丁胺卡那效果不显著,而采用突击处理（３００Ｕ／ｍｌ）与常规处理协同应用,取得显著效果：细胞形态恢复正常,种植病毒后维持时间延长,且不影响细胞对病毒的敏感性。     

两种反转录聚合酶链反应检测甲型肝炎病毒

目的 建立一种灵敏、特异的RT－PCR 方法检测环境中的HAV。方法 对两种RT－PCR，即常规两步法RT－PCR和一步法RT－PCR检测HAV的效果进行了观察，并采用半套式PCR对扩增产物的特民划性进行验证。结果两种RT－PCR与半套式PCR检测HAV均得到预期条带，所设计的引物对其它的肠道病毒扩增呈阴性；在同等反应条件下，一步RT －PCR的反应效率远高于常规RT－PCR，二者的检测灵敏度也有显著性差异，一步RT－PCR的检测灵敏 度为10TCID50／ml，两步法RT－PCR检测灵敏度为10^3TCID50/ml.结论 一步RT -PCR较常规RT-PCR易于操作,重复性好,不易污染,具有更高的反应效率和灵敏度.