GnRH缺陷疾病致病基因 RNF216互作蛋白的筛选

目的:通过酵母双杂交实验筛选与环指蛋白216(ring finger protein 216, RNF216)相互作用的蛋白,进一步阐明RNF216在GnRH缺陷疾病中的作用。方法:构建pGBKT7- RNF216重组表达载体,将其转化到Y2HGold酵母中,与人cDNA文库进行杂交,筛选与RNF216相互...     

糖尿病肾损伤早期诊断的尿液联合检测

目的 通过对糖尿病（DM）患者尿液中微量白蛋白（mAlb）、β2微球蛋白（β2-MG）、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、转铁蛋白（TRF）等进行检测，探讨其联合检测对糖尿病肾损伤早期诊断的临床意义。方法利用免疫比浊法、酶法检测50例健康体检者及204例DM患者尿液中mAlb排泄率、β2-MG、NAG、TRF含量，尿蛋白定性及血BUN、CR测定，并分组比较。结果血BUN、CR及尿蛋白阴性糖尿病患者尿液中mAlb、β2-MG、NAG、TRF均明显高于对照组（P〈0．01），后四项联合检测较单项检测阳性率高。结论尿液联合测定有助于了解DM患者的肾损伤情况，其对糖尿病肾病（DN）的预防和早期诊断有重要意义。     

梅毒螺旋体膜蛋白Tp0971经TLR2/NF-κB诱导巨噬细胞分泌细胞因子北大核心CSCD

目的:探讨梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp0971诱导巨噬细胞分泌细胞因子的分子机制。方法:以Tp Nichols株基因组为模板,PCR扩增Tp0971基因并构建重组质粒p ET28a(+)/Tp0971,随后将其转化至表达宿主菌E-.coli Rosseta中,IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白。经去除Tp0971重组蛋白中的内毒素后,将其刺激巨噬细胞,ELISA检测细胞因子IL-8、IL-1β和IL-6的分泌水平。并采用Toll样受体2(TLR2)中和抗体或TLR2 siRNA,以及核转录因子κB(NF-κB)抑制剂PDTC处理细胞,观察TLR2和NF-κB在介导细胞因子分泌中的作用。结果:成功构建p ET28a(+)/Tp0791原核表达载体,并表达出一相对分子量为29 k D的重组蛋白。ELISA结果显示,0.5~10μg/ml Tp0791能以剂量依赖性方式诱导巨噬细胞分泌IL-8、IL-1β和IL-6。采用siRNA沉默TLR2表达,或用TLR2中和抗体封闭后,IL-8、IL-1β和IL-6分泌明显减少。此外,Tp0791也能增加细胞核中NF-κB p65的表达水平,采用NF-κB抑制剂PDTC处理后,细胞因子分泌水平也显著降低。结论:Tp0971经TLR2/NF-κB可诱导巨噬细胞分泌细胞因子。     

儿童腺病毒感染44例临床分析

目的 探讨儿童腺病毒感染的临床特征及其诊治方法.方法 回顾性分析44例腺病毒感染患儿的临床资料,分析其临床特征及诊治方法.结果 44例患儿中腺病毒肺炎27例(61.4％),显著多于其他部位感染(x2 =5.1428、5.8932、6.1478、6.5931,均P＜0.01);6个月至1岁及1～2岁年龄段患儿显著多于＜6个月及＞3岁年龄段(x2=5.3147、4.8329、6.1357、5.3876,均P＜0.01);鼻咽分泌物腺病毒抗原均呈阳性表现,且同时可检出其他病原体阳性,同时可见C-反应蛋白、白细胞计数升高,34例高热患者血培养均为阴性,而5例重症肺炎患儿中有4例出现IgG的明显减低;腺病毒肺炎患儿肺部影像学检查多呈现肺部浸润、斑片状阴影及节段性肺炎等表现,且可累及纵膈或肺门淋巴结,但肺功能影响较小;经抗病毒、抗菌药物及其他对症支持治疗,所有患儿均治愈出院.结论 6个月至2岁婴幼儿腺病毒感染较为常见,以肺部感染最为常见,病原学检查结合临床及血液学、影像学检查诊断并不困难,而治疗则以抗病毒为主,同时辅以抗菌药物及其他辅助治疗,可取的较为理想的效果.     

梅毒螺旋体膜蛋白Tp0971 经TLR2 / NF-κB 诱导巨噬细胞分泌细胞因子

目的:探讨梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp0971 诱导巨噬细胞分泌细胞因子的分子机制。方法:以Tp Nichols 株基因组为模板,PCR 扩增Tp0971 基因并构建重组质粒pET28a(+) / Tp0971,随后将其转化至表达宿主菌E.coli Rosseta 中,IPTG 诱导表达,Ni-NTA 亲和层析柱纯化重组蛋白。经去除Tp0971 重组蛋白中的内毒素后,将其刺激巨噬细胞,ELISA 检测细胞因子IL-8、IL-1β和IL-6 的分泌水平。并采用Toll 样受体2(TLR2)中和抗体或TLR2 siRNA,以及核转录因子资B(NF-κB)抑制剂PDTC 处理细胞,观察TLR2 和NF-κB 在介导细胞因子分泌中的作用。结果:成功构建pET28a(+) /Tp0791 原核表达载体,并表达出一相对分子量为29 kD 的重组蛋白。ELISA 结果显示,0.5 ~ 10 g/ ml Tp0791 能以剂量依赖性方式诱导巨噬细胞分泌IL-8、IL-1β和IL-6。采用siRNA 沉默TLR2 表达,或用TLR2 中和抗体封闭后,IL-8、IL-1β和IL-6 分泌明显减少。此外,Tp0791 也能增加细胞核中NF-κB p65 的表达水平,采用NF-κB 抑制剂PDTC 处理后,细胞因子分泌水平也显著降低。结论:Tp0971 经TLR2/ NF-κB 可诱导巨噬细胞分泌细胞因子。     

2010—2012年万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MIC值的变化

目的了解万古霉素对不同标本来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）最低抑菌浓度（MIC）值的变化。方法收集某院2010-2012年临床分离的MRSA菌株,测定MRSA万古霉素MIC值;并按不同标本来源,对菌株万古霉素MIC值进行分析。结果3年共收集金黄色葡萄球菌1 434株,其中分离自痰标本857株,血液标本239株,其他标本338株;2010-2012年MRSA检出率分别为41.12%（169/411）、44.96%（214/476）和48.08%（263/547）。2010-2012年血液标本分离的金黄色葡萄球菌MRSA检出率分别为29.03%、30.86%、30.21%,痰标本分离的金黄色葡萄球菌MRSA检出率分别为46.89%、51.03%、57.10%;3年间痰标本MRSA检出率均高于血液标本（χ2值分别为6.41、10.36、21.43,均P＜0.05）。血液及痰标本分离的MRSA对万古霉素均敏感。2010-2012年血液标本分离的MRSA万古霉素MIC≥1.00 μg/mL菌株分别占38.89%（7株）、40.00%（10株）及37.93%（11株）,3年间比较,差异无统计学意义（χ2=0.02,P=0.999）;痰液分离的MRSA万古霉素MIC≥1.00 μg/mL菌株分别占36.28%（41株）、40.94%（61株）及49.73%（92株）,3年比较,差异亦无统计学意义（χ2=5.72,P=0.057）。结论该院2010-2012年临床MRSA检出率呈增高趋势。痰标本的MRSA检出率及万古霉素MIC值有所增高;血液标本的MRSA检出率及万古霉素MIC变化不明显。     

CLEC4G与CD34及肝细胞癌侵袭转移之间的关系

目的 探讨C型凝集素结构域家族4成员G(CLEC4G)与肿瘤血管生成标记物CD34之间的表达相关性及其与肝细胞癌(HCC)侵袭转移间的关系.方法 收集2019年1月至2019年12月在株洲市中心医院经外科手术切除的40例HCC标本及相应术前血清标本分为转移组和非转移组,同时收集30例健康体检者血清标本,实时荧光定量聚合...     

CLEC4G在肝脏疾病中的表达及其与肝细胞肝癌的相关性研究

目的探讨C型凝集素结构域家族4成员G(CLEC4G)在肝脏疾病组织中的表达及其与肝细胞肝癌(HCC)患者临床病理特征之间的相关性。方法回顾性分析株洲市中心医院2019年1月-2019年12月经外科手术切除治疗的40例HCC患者癌组织和相应的癌旁组织(距癌组织边缘至少2 cm)及10例正常肝组织标本(肉眼所见尽量远离癌组织边缘)和10例肝硬化标本。利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库筛选HCC转录组数据集,用生物信息学方法制作热图和箱图分析CLEC4G在癌组织和癌旁组织中的表达差异。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测CLEC4G的mRNA表达水平;免疫组织化学法(IHC)检测CLEC4G蛋白的表达水平。计量资料用均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用成组t检验;计数资料以百分比(%)表示,采用χ2检验分析CLEC4G表达与患者临床病理特征之间的相关性。结果热图显示CLEC4G在癌组织中的表达较癌旁组织显著下降,箱图中CLEC4G mRNA在癌组织的相对表达量为(82.5±18.9),在癌旁组织中为(3354.4±296.2),差异具有统计学意义(P<0.001);qRT-PCR及IHC分别表明CLEC4G的mRNA在正常肝组织中表达丰富(3301.3±286.4),在肝硬化(1742.6±208.7)和癌旁组织(1553.2±249.9)中表达明显下降,而在肝癌组织中表达甚少(63.6±32.9),差异具有统计学意义(P<0.001);并且CLEC4G的低表达与HCC患者的肿瘤血管转移有关。结论CLEC4G在正常肝脏组织中大量表达,而随着肝脏疾病的恶性病变进展其表达显著减少,在HCC组织中表达甚少,有望成为HCC良好的病理诊断标志物。     

精子形态和精子活力分析在男性不育诊断中的应用

目的 探讨精子活力和精子形态分析的关系,两者联合检测在男性不育诊断中的应用价值.方法 采用Diff-Quik精子快速染色法对245例男性不育症患者进行精子形态分析和精液常规分析,分析其精子活力、正常精子百分率和畸形精子症百分率,并与对照组进行比较.结果 男性不育患者形态正常精子百分率明显低于对照组;精子活力正常的男性不育患者中,畸形精子症的发生率很高(占35.2%).结论 精子形态是影响男性生育力的重要因素,精液常规和精子形态联合分析,有利于提高男性不育或生育力低下的诊断.