侵袭性真菌感染实验诊断的研究进展

近年来,随着大量广谱抗生素、皮质激素、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用.造血干细胞移植、实体器官移植和艾滋病患者的增加,侵袭性真菌感染(IFI)逐年增多,其发病率和病死率居高不下.真菌感染的实验室诊断已成为诊断IFI的重要依据,同时病原真菌的实验室鉴定也具有指导临床治疗以及流行病学研究的双重意义.此文就近年来IFI实验诊断方面的研究进展作了综述.     

侵袭性真菌感染实验诊断的研究进展

近年来,随着大量广谱抗生素、皮质激素、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用.造血干细胞移植、实体器官移植和艾滋病患者的增加,侵袭性真菌感染(IFI)逐年增多,其发病率和病死率居高不下.真菌感染的实验室诊断已成为诊断IFI的重要依据,同时病原真菌的实验室鉴定也具有指导临床治疗以及流行病学研究的双重意义.此文就近年来IFI实验诊断方面的研究进展作了综述.     

血流感染患者分离的肺炎克雷伯菌高毒力荚膜型和毒力基因分析

目的研究社区获得性血流感染肺炎克雷伯菌(CAK)与医院获得性血流感染肺炎克雷伯菌(HAK)、高黏液表型肺炎克雷伯菌(HMVKP)与普通肺炎克雷伯菌(CKP)主要荚膜血清型、毒力基因的差异,并探讨毒力因子与产超广谱β内酰胺酶(ESBL)的关系。方法收集2014年1月至2015年1月分离于临床血流感染患者肺炎克雷伯菌41株,利用拉丝试验检测高黏液(HMV)表型,PCR方法及基因测序检测主要荚膜型和毒力基因,Vitek 2 Compact系统进行菌株耐药性检测。结果 17株(41.5%)拉丝试验阳性;主要荚膜分型K1型8株(19.5%),K2型5株(12.2%),K57型3株(7.3%),3类荚膜血清型共占39.0%;黏液表型编码基因A(rmp A)阳性19株(46.3%),其中16株HMV表型阳性;20株菌需氧菌素基因aerobactin阳性,其中19株rmp A阳性。CAK与HAK的HMV表型(65%/19%)、rmp A(70%/2.38%)、aerobactin(70%/28.6%)阳性率差异具有统计学意义(P0.05)。HMVKP与CKP的荚膜血清型K1(35.29%/8.33%)、毒力基因rmp A(94.12%/12.5%)和aerobactin(94.12%/16.67%)阳性率差异具有统计学意义(P0.05)。CKP耐药情况较HMVKP严重。非产ESBL菌株较产ESBL菌株的HMV表型、高毒力荚膜型K1/K2/K57及毒力基因rmp A和aerobactin的阳性率高,差异具有统计学意义。结论高毒力荚膜血清型、毒力基因主要见于CAK,且HMV表型菌株携带更多的毒力因子,这类菌株大多为非产ESBL的敏感株。     

2014-2018年ICU真菌血症病原菌分布及抗菌药物敏感性分析

目的:研究我院ICU科室真菌血症病原菌的分布特点和药敏结果,为真菌血症的临床诊断和抗菌药物治疗提供依据。方法:对我院2014-2018年,5年间ICU科室血培养分离酵母样真菌且符合真菌血症诊断标准的临床资料进行回顾性分析,应用WHONET 5.6软件对菌株分布和药敏结果进行统计。结果:ICU确诊真菌血症患者共129例,致病菌主要为近平滑念珠菌（59株,45.7%）、白色念珠菌（22株,17.1%）、光滑念珠菌（14株,10.9%）和热带念珠菌（12株,9.3%）。真菌血症以男性患者（72.1%）居多,好发于65岁及以上老年（64.3%）;重症医学科（55.8%）和老年病房ICU（20.2%）分离率较高。所有菌株对5-氟胞嘧啶和两性霉素B敏感性较高,对唑类药物出现不同程度耐药。结论:我院真菌血流感染以近平滑念珠菌为多见。光滑念珠菌、热带念珠菌、红酵母属对唑类药物的敏感性相对较低。推广质谱、分子生物学等快速鉴定技术,了解真菌血症病原菌对抗菌药物的敏感性,对ICU真菌血流感染患者的早期诊治和预后有着重要意义。     

2015-2018年血流感染病原菌菌群分布及耐药性分析

目的:对我院血培养常见病原菌的菌群分布及耐药性进行分析,为临床血流感染治疗和合理应用抗生素提供依据。方法:对我院2015-2018年血培养阳性标本病原菌菌群分布及耐药性进行统计分析。结果:2015-2018年血培养标本分离细菌2 587株,革兰阴性菌1 243株（48.05%）,革兰阳性菌1 123株（43.41%）,真菌221株（占8.54%）;主要革兰阴性菌为大肠埃希菌（482株/18.63%）、肺炎克雷伯菌（271株/10.48%）、铜绿假单胞菌（97株/3.75%）;主要革兰阳性菌为凝固酶阴性葡萄球菌（583株/22.54%）、金黄色葡萄球菌（157株/6.07%）等;主要真菌为近平滑念珠菌（106株,4.10%）、白色念珠菌（32株,1.24%）等;4年间大肠埃希菌对头孢西丁的耐药率逐渐下降（P＜0.01）,肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率从2.00%上升至10.05%（P＜0.05）,共检出33株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌。结论:我院血培养标本以革兰阴性菌为主,其中大肠埃希菌检出率最高,同时肺炎克雷伯菌检出率呈逐年增长趋势。临床应根据药敏结果合理应用抗生素,及时调整治疗方案,降低血流感染的死亡率。     

鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对替加环素体外敏感性检测的方法学评估

目的 评估不同药敏试验方法检测鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对替加环素的体外药敏结果.方法 连续收集2012年1月至3月临床感染患者分离的50株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)和49株肺炎克雷伯菌,采用微量肉汤稀释法、Vitek-2法、MIC Test Strip(MTS)法及纸片扩散法分别测定替加环素对两种细菌的敏感性,并以微量肉汤稀释法为参考方法,评估Vitek-2法、MTS法及纸片扩散法与参考方法的一致性.结果 按照美国食品药品监督局(FDA)的判断标准,微量肉汤稀释法、Vitek-2法和MTS法检测替加环素对CRAB和肺炎克雷伯菌的敏感性分别为94.0％/91.8％,68.0％/91.8％和90.0％/91.8％.对于CRAB,Vitek-2法和MTS法与参考方法的基本一致率/分类一致率(EA/CA)分别为94.0％/72.0％和92.0％/90.0％,66.0％ (33/50)的菌株Vitek-2法检测的MIC值比参考方法高1～2个稀释度,MTS法检测的MIC值存在32.0％ (16/50)偏高及22.0％ (11/50)偏低;对于肺炎克雷伯菌,Vitek-2法和MTS法与参考方法的EA/CA分别为95.9％/98.0％和83.7％/91.8％,36.7％ (18/49)的菌株Vitek-2法检测的MIC值比参考方法低1～3个稀释度,79.6％(39/49)的菌株MTS检测的MIC值比参考方法低1～3个稀释度.Vitek-2法和MTS法检测两种细菌均未出现重大误差(VME)和大误差(ME).纸片扩散法与参考方法相比,对于CRAB,采用敏感/耐药(≥14 mm/≤10 mm)折点,CA为94.0％,高于Jones等推荐的折点(≥16 mm/≤12 mm,CA为82.0％);对肺炎克雷伯菌,采用敏感/耐药(≥14 mm/≤10 mm)折点,CA为93.9％,高于FDA中肠杆菌的折点(≥19 mm/≤14 mm,CA为67.3％).结论 对于CRAB菌株,MTS法与微量肉汤稀释法的一致性较高,MIC结果存在一定程度的偏差;对于肺炎克雷伯菌,Vitek-2法与微量肉汤稀释法的一致性较高,MIC结果存在一定程度的偏低;纸片扩散法与微量肉汤稀释法一致性较低,针对不同细菌其判定折点需进一步研究.     

2010年CMSS对革兰阴性杆菌耐药性监测报告

目的 监测2010年中国革兰阴性杆菌的耐药性.方法 收集2010年9-12月全国13家教学医院的1 259株非重复的革兰阴性杆菌.菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定美罗培南等广谱抗菌药物的MIC.药敏结果判断采用CLSI 2011年M100-S21标准.结果 14种抗菌药物对845株肠杆菌科细菌的抗菌活性,敏感性依次为美罗培南829株(98.1％)、阿米卡星794株(94.0％)、亚胺培南761株(90.0％)、哌拉西林/他唑巴坦739株(87.5％)、头孢吡肟701株(83.0％)、厄他培南696株(82.4％)、头孢哌酮/舒巴坦678株(80.3％)、黏菌素637株(75.4％)、头孢他啶591株(70.0％)、环丙沙星499株(59.1％)、头孢西丁463株(54.8％)、头孢曲松452株(53.5％)、头孢噻肟442株(52.3％)、米诺环素435株(51.5％).大肠埃希菌中ESBL的发生率为61.3％ (106/173),高于肺炎克雷伯菌[41.2％ (70/170)].大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦保持较好的敏感性,而对环丙沙星、头孢曲松和头孢噻肟的耐药率较高.肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星和黏菌素的敏感率均保持在90％以上,而对头孢曲松和头孢噻肟的耐药率较高.阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸菌,对美罗培南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南的敏感率都保持在80.0％以上.对于铜绿假单胞菌敏感性较高的药物为黏菌素(98.4％,182株)、阿米卡星(85.9％,159株)、哌拉西林/他唑巴坦(80.0％,148株)、头孢他啶(79.5％,147株)、美罗培南(74.1％,137株)、环丙沙星(74.1％,137株)、头孢吡肟(73.5％,136株)、亚胺培南(71.9％,132株)和头孢哌酮/舒巴坦(70.8％,131株).鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的敏感率小于37.0％,对米诺环素敏感率为47.8％.97.8％(176株)的鲍曼不动杆菌对黏菌素敏感,泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌发生率分别为60.1％(108株)和18.9％(35株).结论 碳青霉烯类对肠杆菌科仍保持高活性,但鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的耐药性增加,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药性显著增加.     

2012年中国CHINET血培养临床分离菌的分布及耐药性

目的了解2012年中国CHINET血培养分离菌的构成及耐药性。方法对中国CHINET 细菌耐药监测网2012年1月至12月所有血培养分离菌,按统一方案用K‐B纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验。结果2012年自血标本中共获分离菌8490株,其中革兰阳性球菌占56．0％,革兰阴性杆菌占44．0％。居前10位的分离菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌（CNS ）（35．5％）、大肠埃希菌（16．4％）、克雷伯菌属（9．8％）（其中91．1％为肺炎克雷伯菌）、肠球菌属（7．2％）、金黄色葡萄球菌（金葡菌）（7．2％）、不动杆菌属（5．9％）（其中93．8％为鲍曼不动杆菌）、草绿色链球菌（4．3％）、铜绿假单胞菌（3．2％）、肠杆菌属（2．4％）和洋葱伯克霍尔德菌（1．5％） ,占所有分离菌株的93．5％。甲氧西林耐药金葡菌（M RSA ）、甲氧西林耐药 CNS （MRCNS）分别占金葡菌和CNS的50．8％和61．7％。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和氨苄西林的耐药率分别为29．0％和10． 9％,屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。草绿色链球菌对青霉素的耐药率为3．8％。儿童分离株中青霉素耐药肺炎链球菌株为31．2％,与成人分离株大致相仿（34．1％）。葡萄球菌属、肺炎链球菌、其他链球菌属和粪肠球菌中均未发现万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,屎肠球菌对万古霉素的耐药率为3．5％。大肠埃希菌、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属和枸橼酸菌属等肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药率均在10．0％以下,唯克雷伯菌属对碳青霉烯类耐药率为11．2％～19．8％。不发酵糖革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药率较高,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率近30．0％,对不动杆菌属耐药率达70．0％以上。结论2012年中国CHINET监测资料显示,血培养分离菌仍以革兰阳性菌为主,但检出比例有所下降,革兰阴性菌有所上升。血培养分离株对常用抗菌药物耐药性仍严重,尤其革兰阴性菌对碳青霉烯类耐药率呈上升趋势。因此应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施抑制耐药菌传播。