人血浆凝血酶原和异常凝血酶原的BA-ELISA法检测

应用与凝血酶原及异常凝血酶原有免疫交叉反应的非Ca(Ⅱ)依赖性抗人凝血酶原抗体,建立夹心BA-ELISA法,检测人血浆凝血酶原的最低浓度可达1ng/ml。血浆经皂土和柠檬酸钡吸附处理,除去纤维蛋白原和凝血酶原后,可用本法检出存留于血浆中的微量异常凝血酶原,并测得健康人血浆异常凝血酶原的均值为74.61±19.43ng/ml。本法操作简便,特异性强,重复性好。     

对称动态动脉硬化指数对原发性高血压患者早期肾功能损害的预测

目的：探讨对称动态动脉硬化指数（S-AASI）对原发性高血压患者早期肾功能损害的预测价值。方法：选择原发性高血压患者300例,测量患者的动态血压参数并计算S-AASI,检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）/肌酐（NAG/Cr）,化验血清肌酐并计算Ccr。根据S-AASI的四分位数将受试者分为A、B、C、D 4组。比较4组患者各参数的差别,并行S-AASI与尿NAG/Cr等参数的多元相关回归分析。结果：①4组的年龄随S-AASI水平的增高依次增高（P〈0.05）。A、B组高血压病程差异无统计学意义（P〉0.05）,B、C、D组高血压病程依次延长,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。②4组之间的血清肌酐比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但4组尿NAG/Cr及微量蛋白尿阳性率均依次增高,而Ccr依次降低,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。③多元线性回归分析显示S-AASI与尿NAG/Cr（β=0.470,P〈0.001）、Ccr（β=-0.322,P〈0.05）具有相关性。尿NAG/Cr每增加1 IU/g,S-AASI相应增加0.005;Ccr每降低1 ml/（min.1.73 m2）,S-AASI相应增加0.003。结论：S-AASI可作为高血压早期肾功能损害的预测指标。     

基于风险识别的临床生化实验室安全管理模式初探

正过去临床实验室病原微生物因子的生物风险管理较受重视,实验室生物安全管理的投入和措施较多[1-3],但从临床实验室质量安全体系构建的完整性角度讲,实验室安全管理工作的全面性尚存不足。目前中国合格评定国家认可委员会(CNAS)发布的医学实验室质量和能力认可准则(CL02)[4]、国家卫计委发布的等级医院评审实施细则(2011)[5]等文件均对除生物风险外的其他安全风险如实验室内医疗安全风险、信息     

2013-2015年血培养阳性标本污染情况分析

目的 分析探讨昆明市第一人民医院2013-2015年血培养污染率、污染途径、污染细菌构成比,为有效防止血培养污染提供依据.方法 对昆明市第一人民医院3年来共送检的34 713例血培养样本的污染情况进行回顾性分析.结果 血培养送检样本数34 713例,阳性培养样本数2 860例,总计污染样本数361例,污染率1.04%.按年度分类,2015年度血培养污染率最低;按季度分类,4个季度污染率差异不大;按内、外科两大系统分类,内科系统污染率1.06%,外科系统污染率0.96%;按科室分类,内科系统中污染率最高的科室是血透中心,污染率为2.71%,其次为重症医学科(ICU),污染率2.23%;外科系统中污染率最高的科室是乳腺科,污染率为2.30%,其次为骨科,污染率为1.92%;按污染菌菌株构成统计,人葡萄球菌污染居首位,占32.41%,其次为表皮葡萄球菌,占31.30%.结论 医院血培养污染率较高,污染途径多样化,血培养污染问题不容忽视,污染的细菌以血培养单瓶报阳的凝固酶阴性葡萄球菌为主.     

3种方法对临床菌血症样本细菌DNA提取的比较

目的寻找一种简单、有效的提取临床菌血症样本细菌DNA的方法．方法分别用碱液加热裂解法、溶菌酶法和商品DNA提取液法提取细菌DNA,用临床常见病原菌特异性引物,进行PCR扩增．结果（1）商品DNA提取液法提取革兰阴性菌DNA,经PCR扩增后得到特异性目的片段,但未扩增出革兰阳性菌的特异性目的片段;（2）碱液加热裂解法、溶菌酶法提取革兰阴、阳性菌DNA,经PCR扩增后均得到特异性目的片段,但碱液加热裂解法比溶菌酶法能扩增到更低浓度的细菌DNA目的片段．结论碱液加热裂解法是3种方法中最简单有效的细菌DNA提取方法,适用于临床病原菌基因组DNA提取．     

大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药耐药机制的研究近况

喹诺酮类药物是一类化学合成药物,由于其具有较强抗菌活性,临床上已广泛用于各种细菌性感染。随着喹诺酮类药物在临床上越来越广泛的应用,喹诺酮类药物的耐药也逐渐上升。已知细菌对喹诺酮类药物的主要耐药机制为:①靶位基因Ⅱ型拓扑异构酶即DNA回旋酶基因(gyrA和gyrB)和拓扑异构酶Ⅳ基因(parC和parE)突变;②细菌膜通透性的降低和膜上药物主动外排泵的激活;③质粒上qnr基因介导细菌对喹诺酮类耐药。     

高脂血症患者APOB／CIII／E基因多态性交互作用的研究

目的探讨原发性高脂血症载脂蛋白（Apo）B、CIII、E基因中ApoB MspI、ApoB XbaI、ApoB EcorI、ApoCIII3175、ApoCIII3206、ApoE112／158等7个位点基因多态性间的交互作用。方法采用病例一对照相关性研究策略，选择昆明地区汉族作为研究对象，用基因芯片检测技术，对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行ApoB MspI、ApoB Xbal、ApoB EcorI、ApoCIII3175、ApoCIII3206、ApoE112／158等6个位点基因多态性进行检测。用比值比（odd ratio，OR）估计相对危险度。用MDR分析多基因相互作用。结果用MDR分析法，对昆明地区汉族高脂血症患者上述6个位点基因型多态性的基因-基因交互作用进行了分析，发现两位点MspI—E112／158、三位点MspI—CIIB206-E112／158和四位点MspI—XbaI—CIII3206-E112／158这三种模型均具有统计学意义（P〈0．001），但三位点MspI—CIII3206-E112／15模型的交叉验证一致性系数最大（10／10）为最佳模型，该模型包含了位点ApoBMspI、ApoCIII3206和ApoE112／158位点．提示这三个基因位点之间可能存在基因-基因交互作用。该模型的Odd Ratio为14．870（95％CI：1．305—169．43）。结论发现昆明地区汉族人群7个高脂血症候选基因位点中，MspI—CIII3206-E112／158三个基因多态性之间可能存在基因-基因交互作用。     

产ESBLs大肠埃希菌的耐药表型及水平传播研究

目的了解昆明市第一人民医院临床分离的大肠埃希菌超广谱p内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases，ESBLs）的耐药表型和水平传播情况。方法对2005年1月～12月昆明市第一人民医院临床分离的197株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs，用Kirby—Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验；用接合试验了解产ESBLs基因是否定位于质粒，并对接合子进行KB法药敏试验和ESBLs表型确证。结果197株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌104株，检出率52．79％。在各类标本中产ESBLs菌株在纤维支气管镜（bronchofibroscope，BF）刷片中分离率最高（75％），就科别来看内分泌科标本的产ESBLs大肠埃希菌的分离率最高（78.57％）。除亚胺培南和阿米卡星外，产ESBLs菌株对其他15种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P〈0．01）。104株产ESBLs菌株中有91株符合供体菌的标准,64株接合成功，接合子均确证产ESBLs，其接合率为70．33％。64株供体菌及其相应接合子的药敏结果显示除复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、庆大霉索、头孢吡肟和头孢西丁外，供体菌及其接合子对其他12种药物耐药率无显著性差异（P〉0．05）。结论昆明市第一人民医院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，临床应加强对大肠埃希菌耐药性的监测，严格掌握抗生素的使用指征，防止耐药菌株的传播流行。     

产ESBLs大肠埃希菌CTX—M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌中的检出率，并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验；采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M酶基因型，对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株（52．79％）ESBLs表型检测阳性，其中91株符合供体菌标准，64株（70．33％）接合成功，接合子均确证产ESBLS。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株（94．23％）携带CTX-M型基因，其中38株（36．54％）检出blaCTX-M-1组基因，69株（66．35％）检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株（79．69％）携带CTX-M型基因，其中18株（28．13％）检出blaCTX-M-1组基因，35株（54．69％）检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主，同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。     

ABO-HDN“二孩”患儿多项指标的联合检测分析

目的对确诊为ABO新生儿溶血病(ABO-HDN)的"二孩"患儿,对产前与产后多项相关检测指标进行综合分析,做到早预防、早诊断、早治疗。方法选取2013-2016年在该院检查并确诊为ABO-HDN患儿92例,产前微柱凝集法检测父亲、母亲血型及母亲不规则抗体筛选,母亲血清IgG抗A(B)抗体效价,产后微柱凝集法进行新生儿溶血3项试验,根据新生儿溶血3项试验结果,分成5组。A组:直抗试验(+)、游离试验(+)、释放试验(+);B组:直抗试验(-)、游离试验(+)、释放试验(+);C组:直抗试验(+)、游离试验(-)、释放试验(+);D组:直抗试验(-)、游离试验(-)、释放试验(+);E组:直抗试验(+)、游离试验(-)、释放试验(-);全自动分析仪检测患儿总胆红素、非结合胆红素、血红蛋白、网织红细胞百分比、乳酸脱氢酶水平。结果92例ABO-HDN患儿经溶血3项试验,发现5组母亲IgG抗A(B)抗体效价越高,患儿病情越严重,差异具有统计学意义(P0.05);网织红细胞百分比与乳酸脱氢酶在5组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论产前产后多项实验室指标联合检测,对诊断"二孩"ABO-HDN更为准确,同时有助于掌握患儿病情发展状态,降低并发症和后遗症的出现。