浙江省1997至2000年肾综合征出血热监测分析

目的：通过对肾综合征出血热（HFRS）监测分析,掌握全省HFRS的流行规律,控制其暴发流行,进一步降低该病的发病率,为制定防制措施提供依据。方法：采用直接免疫荧光（FAT）法,检测鼠肺HV抗原,采用间接免疫荧光（IFAT）法检测HFRS病人,健康人血清及鼠血中HV抗体,结果：1997－2000年全省共发病9041例,年均发病率为5．08／10万,死亡48人,病死率为0．53％,病例仍主要分布在沿钱塘江两岸的浙东和浙西丘陵区,浙南山区次之,浙北平原区和海岛区病例较少,全省11个地市均有发病,以浙东和浙西丘陵区的绍兴,宁波,台洲,衢州,杭州和金华6市发病最多。宿主动物野外以黑线姬鼠为优势种,占80．79％,室内以褐家鼠为优势种,占80．91％,结论：需要进一步加大监测力度,同时接种HFRS疫苗。     

浙江省肾综合征出血热(HFRS)-Ⅰ型鼠脑纯化疫苗安全性、血清学、防病效果和免疫策略研究

目的　现场观察、考核兰州生物制品研究所生产的HFRS -Ⅰ型鼠脑纯化疫苗的安全性、血清免疫学与防病效果 ,并确定其免疫程序和免疫策略。方法　试验组和对照组按随机整群分组法进行分组 ;采用 0、7、2 8d及免后 1年加强 1针的免疫程序 ;分别采集免前、全程接种后 2周、加强前、加强后两周、加强后 1、2、3、4、5年的部分接种者全血和微量耳垂血 ,分别测定其中和抗体和IFA抗体 ,观察疫苗的血清免疫学效果和现场流行病学防病效果。结果　在 1995年 8月～ 2 0 0 1年 12月的 6年时间里从疫苗开始接种到加强后 5年 ,观察了HFRS -Ⅰ型鼠脑灭活纯化疫苗的安全性、血清免疫学效果和流行病学防病效果等。纵观结果 :证明该疫苗除了因疫苗中残留蔗糖导致较重较普遍的局部反应外 ,未发现其他严重的副反应 ,证明疫苗有较好安全性。从血清免疫效果看 ,86例全程接种后两周的免疫者血清 ,IFA抗体阳转率达 10 0 % ,中和抗体阳转率为4 4 4 4 % (8/ 18)。 1年后 ,IFA抗体和中和抗体阳性率分别下降到 2 8 5 7%和 14 80 %。但加强后 2周的血清IFA抗体和中和抗体阳性率分别反弹至 83 33%和 5 5 5 6 % ,其抗体几何平均滴度也随之回升 ,但不十分明显。此外 ,在加强后 2年IFA和中和抗体阳性率再次下降到较低水平 ,分别为     

SARS冠状病毒CT基因型发现及相关特征

目的 研究SAPS冠状病毒基因型及相关特征。方法 对杭州市首例SAPS病人分离的SAPS冠状病毒ZJ01株进行全基因组测序，并在GenBank数据库登录。记录号：AY297028，版本号：gi：30910859。整个全基因组由29715bp组成。使用GeaBank数据库中最新登陆的SARS病毒的基因组进行序列比对、突变点分析和多态性分析、特殊片段的系统进化分析。结果 发现在ZJ0l株的9391、17555、21712、22213和27819位点，分别是T、T、G、T和T核苷酸碱基，和CenBank数据库中的其他SARS冠状病毒株比较，除第l、2、4和5突变位点(C：G：C：C／T1 T1 T2 T)之外，发现在21712位点(第3个)A／G突变也参于这一遗传标识。因此我们提出5个突位点将17株病毒分为两种基因型的新概念，即C：G：A：C：C与T：T：G：T：T两型，简称C型和T型。ZJ01病毒株属于T基因型．在中国大陆内地是首次发现和发表。突起蛋白基因片断的进化树分析，广州的GZ01 C基因型株进化距离和其他病毒株相差甚远；比较而言，和C基因型BJ0l、CUHK-Wl病毒株较为接近，其次是T基因型的Fl和F2组。5个突变位点(C：G：A：C：C／T：T：G：T：T)的两个发生在编码突起蛋白(S)的基因中，分别是A／G和C／T突变，由此引起的突起蛋白(S)氨基酸变化是Asp／Gly(天门冬氨酸／甘氨酸)和Thr／Ile(苏氨酸／异亮氨酸)。结论 这些基因型特征和变异是否会引起生物学及临床症状的差异是非常值得重视的。     

汉坦病毒N蛋白的重组表达及其用于IgM直接捕捉ELISA的建立和应用

目的克隆并表达汉坦病毒（HV）Z10株（HV—Z10）N蛋白（NP）编码基因，建立基于辣根过氧化酶（HRP）标记重组NP（rNP）的rNP—IgM直接捕捉ELISA，检测肾综合征出血热（HFRS）患者血清并评价其检测效果。方法PCR扩增HV—Z10株NP编码基因，基因工程方法构建NP编码基因原核表达系统pET28a—Z10N—E．coli BL21DE3。SDS-PAGE了解rNP表达情况，离子交换法和Ni—NTA亲和层析法提纯rNP。Western blot检测rNP的特异性免疫反应性。建立HRP标记rNP—IgM直接捕捉ELISA检测HFRS患者血清样品，并与常规HV—IgM间接捕捉ELISA进行比较。结果pET28a—Z10N—E．coli BL21DE3高效表达rNP。提纯rNPSDS-PAGE显示单一蛋白条带，HV-IgG能有效识别rNP并与之结合。94．73％（90／95）HFRS患者血清样品rNP—IgM直接捕捉ELISA检测结果阳性，HV—IgM间接捕捉ELISA阳性率为92．63％（88／95）。两种IgM捕捉ELISAs检测的HFRS患者血清样品A450值分布及对多份不同稀释度血清检测的A450，均值变化均相似。结论成功构建了HV—Z10株NP编码基因高效原核表达系统。所建立的rNP—IgM直接捕捉ELISA可作为HFRS简便、安全、敏感、特异的血清学诊断新方法。     

辽宁省首次从病人血清中分离出肾综合征出血热病毒及鉴定

目的：从临床确诊的肾综合征出血热（HFRS）患者血清中分离出汉坦病毒（HV）,并对分离到的病毒进行分型鉴定,填补了辽宁省从人体血液中分离HFRS病毒的空白。方法：采集发病在一周内临床确诊为EHF患者的血液（急性期血）直接用VERO-E6细胞分离病毒,并用间接免疫荧光（IFAT）及RT-PCR方法对分离到的毒株进行确定和分型鉴定。结果：从2005年至2006年度全省共收集符合做病毒分离的急性期血液样本40份,其中随机选择20份样本先接种长爪沙鼠,另外20份采用VERO-E6细胞直接分离。从接种动物肺脏中未分离出病毒,直接细胞分离分出病毒株1株。结论：对于急性期病人血分离肾综合征出血热病毒采用细胞分离比动物分离的方法似乎更安全、更经济且有利于提高分离率。     

肾综合征出血热病毒高效价免疫血清抗体毒株的筛选

肾综合征出血热（HFRS）是由布尼亚病毒科汉坦病毒属引起的急性传染病。在HFRS病毒和疫苗的研究工作中，常采用间接免疫荧光抗体（IFA）技术和直接荧光抗体（FA）技术。利用高效价兔抗HFRS病毒免疫血清制备的荧光血清在检测HFRS病毒抗原：亡作中，具有特异、快速的优点忙，而荧光血清的质量与免疫血清的效价有直接关系，不同生物学特性的HFRS毒株免疫敏感动物家兔后，其免疫血清的效价有一定的差异。因此，能产生高效价免疫血清的毒株筛选是制备高质量荧光血清的关键。     

1995至1996年浙江省肾综合征出血热监测分析

１９９５至１９９６年浙江省肾综合征出血热监测分析赵芝雅龚震宇翁景清傅桂明姜理平为了掌握全省肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）流行规律，控制本病暴发流行，根据《浙江省肾综合征出血热预防和控制计划》和《浙江省肾综合征出血热监测计划》，开展了监测工作。现将１９９５...     

浙江省肾综合征出血热鼠间疫情调查

肾综合征出血热(简称HFRS)是一种多宿主自然疫源性疾病,主要传染源为鼠类.为全面了解我省HFRS宿主动物鼠间疫情特点,更好地控制传染源,加强HFRS防制,现将1994～1996年全省HFRS宿主动物资料进行整理、分析,报告如下:1 材料和方法1.1 鼠类来源 统一用江西贵溪捕鼠器械厂生产的中号铁板夹,用夹夜法定期在室内外捕鼠,调查鼠种构成和计算鼠密度.解剖取鼠肺和用滤纸擦鼠血,置低温冰箱冷冻保存待检.     

浙江省近年肾综合征出血热流行特征分析

目的 了解近年全省的流行规律,更好地制订２１世纪的防制措施,进一步降低发病率。方法 采用直接,免疫荧光法（ＦＡＴ）检测鼠肺ＨＶ抗原;采用间接免疫荧光法（ＩＦＡＴ）检测ＨＦＲＳ病人、健康人血清以及鼠血中ＨＶ抗体。结果 １９９７－１９９９年全省共发病７５３４例,年均发病率烟５.６５／１０万,死亡３９人,病死率为０.５２％。病5例仍主要分布在沿钱塘江两岸的浙东和浙西丘陵区,浙南山区和浙北平原区次之,海岛区无病例,全省１１个地市中１０个地市有病人,以浙东和浙西丘陵区的绍兴、宁波、台州、衢州、杭州和金华六市发病最多,占全省病例总数的８７.４４％。宿主动物罢外以黑线姬鼠为优势种,占８０.２４％,室内以褐家鼠为优势种,占８５.００％。全省鼠平均带病毒率为３.28％。结论 要加强宁波等高发疫区的监测,同时推广接种ＨＦＲＳ疫苗。     

浙江省肾综合征出血热纯化灭活疫苗现场免疫效果和免疫策略研究

本文报告肾综合征出血热纯化灭活疫苗在浙江省高发疫区大面积人群接种后的安全性、血清学和流行病学近期防病效果。本次共接种１０４６０人，全程接种者占９７．３０％；对照１６１５９人。全程接种后两周荧光抗体阳转率为９８．５５％（６８／６９），中和抗体阳转率为４４．８３％，几何平均滴度分别为６９．３６和４．４４。经一个流行期观察，接种组无发病；对照组发病１２例，发病率为７４．２６／１０万，人群近期保护率达１００％。人群接种后局部和全身反应较明显，注射局部疼痛感达１００％，但均未发生异常反应（包括隐性感染者）。预测疫苗接种后当年发病数减少了３３例，取得一定的经济和社会效益。