环境化学物暴露对2型糖尿病基因的富集进程和通路影响研究

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）共同差异表达基因的富集进程和通路，并进一步发现影响T2DM的环境化学物质。方法 通过比较毒理基因组学数据库（CTD）中获取直接作用的T2DM相关基因及化学物质，从GEO数据库中获取T2DM关联的基因。对T2DM关联的共同关键基因进行富集分析，获取共同基因/蛋白可能参与的生物进程或信号通路。结果 共有469个与T2DM关联的基因，200个关键基因/蛋白富集发现，这些关键基因/蛋白参与了MAPK级联正调控、细胞因子介导的信号通路、ER到高尔基体的顺行转运、细胞外刺激应答等信号通路。结论 环境化学物质能在基因水平上影响T2DM的发生发展。     

脓毒症期间T细胞亚群在主要免疫器官内的变化

目的:探讨脓毒症期间不同免疫器官内T细胞亚群的比例和数量变化。方法:将8周龄的雌性C57BL/6小鼠随机分为脓毒症组和对照组,脓毒症组通过盲肠结扎穿刺法构建脓毒症小鼠模型,对照组为假手术组。分别于脓毒症早期(造模后24 h)和晚期(造模后16 d)通过流式细胞术检测小鼠脾脏、腋窝及腹股沟淋巴结和骨髓中CD4 ...     

EB病毒早期基因BHRF1-Bcl-2的病毒性同源基因

BHRF1是近年来得到确认的EBV新的致癌基因，在结构上和功能上与细胞原癌基因Bcl-2相似，属Bcl-2家族成员。由于其抑制细胞凋亡和细胞转化作用而受到广泛关注，本文就BHRF1的作用特点、与bcl-2的关系以及应用前景作一综述。     

EB病毒早期基因BHRF1-Bcl-2的病毒性同源基因

BHRF1是近年来得到确认的EBV新的致癌基因,在结构上和功能上与细胞原癌基因Bcl-2相似,属Bcl-2家族成员.由于其抑制细胞凋亡和细胞转化作用而受到广泛关注,本文就BHRF1的作用特点、与bcl-2的关系以及应用前景作一综述.     

靶向EBV潜伏期基因EBNA2小干涉RNA系统的构建

[目的]构建携带靶向EBV核抗原EBNA2(EBV nuclear antigen,EBNA)的pSUPER.retroRNAi逆转录病毒载体,进而筛选出稳定产毒的细胞克隆。[方法]用DNA重组技术将60nt能转录产生靶向EBNA2小发夹RNA(smallhairpin RNA,shRNA)的寡核苷酸序列定向插入逆转录病毒载体pSUPER.retro,并用限制性内切酶酶切和测序鉴定;脂质体法将重组逆转录病毒载体转染包装细胞系PheonixA,G418筛选稳定产生逆转录病毒的细胞克隆。[结果]重组逆转病毒载体经限制性内切酶酶切,电泳后可观察到7167bp和281bp两条DNA条带;测序鉴定结果表明序列正确;重组载体转染的包装细胞经G418筛选获得能产生逆转录病毒的抗性细胞克隆,病毒滴度为2.5×104CFU/ml。[结论]成功构建和筛选出靶向EBV潜伏期基因EBNA2的pSUPER retroRNAi逆转录病毒载体以及稳定产毒的细胞系,为深入探讨EBNA2基因的细胞转化和抗凋亡作用提供了实验基础。     

姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的 研究姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制. 方法 96只wistar大鼠随机分为四组:假手术组(N组)、缺血再灌注组(IR组)、溶剂对照组(D组)和姜黄素组(C组).构建大鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型,分别于再灌注1、3和6 h取血和肝组织,检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)水平,EuSA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性,行病理组织学观察,并用免疫组化法测定核因子-kB(NF-kB)的表达. 结果与IR组和D组比较,C组ALT水平和TNF-α的活性明显降低(P＜0.05),且肝脏组织损伤轻;C组NF-kB的表达也明显低于IR组(P＜0.05). 结论姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能是姜黄素抑制了NF-kB的表达进而减少了炎性介质的释放.     

EBV相关胃癌ras基因突变及法尼基转移酶β-亚单位基因的表达

目的:探讨EBV相关胃癌(EBVaGC)、EBV阴性胃癌(EBVnGC)及相应癌旁组织中ras基因突变和法尼基转移酶(FTase)的表达意义.方法:应用PCR-RFLP技术检测EBVaGCs13例、EBVnGCs45例以及相应癌旁组织58例中H-ras12和K-ras12,13密码子点突变情况;RT-PCR技术检测FTaseβ亚单位mRNA的表达水平.结果:共检测到H-ras12位点突变2例,突变率为3.45%(2/58),均发生在EBVnGCs,未发现K-ras12和13密码子点突变.58例癌组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.93±0.39,癌旁组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.78±0.26,两者有显著性差异(t=2.44,P=0.02).EBVaGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.80±0.19,EBVnGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平为0.96±0.43,两者无显著性差异(t=1.93,P=0.06);EBVaGCs和癌旁组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t=0.54,P=0.60);EBVnGCs和癌旁组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平有显著性差异(t=2.39,P=0.02);2例BHRF1阳性和11例BHRF1阴性EBVaGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平无显著性差异(t=0.26,P=0.80);6例BARF1阳性和7例BARF1阴性EBVaGCs组织中FTaseβ亚单位mRNA表达水平亦无显著性差异(t=1.59,P=0.14).结论:胃癌组织ras基因突变率较低,胃癌组织中FTaseβ亚单位mRNA明显高于癌旁组织.EBVaGC组织中ras基因突变、FTaseβ亚单位表达与EBV感染无明显相关性.