hTERT启动子调控hNIS基因介导肺癌细胞碘摄取和131I治疗的实验研究

目的 构建含人端粒酶反转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠/碘同向转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并靶向转染至肺癌A549细胞中特异性表达.探讨hTERT启动子调控的hNIS基因介导放射性碘治疗肿瘤的可能性.方法 应用AdEasy系统构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS,同时构建巨细胞病毒(CMV)启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV.hNIS作为阳性对照,不含hNIS的重组腺病毒Ad-CMV作为阴性对照.应用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性,摄碘实验检测表达的hNIS蛋白功能,细胞克隆形成实验评价131I对转染肿瘤细胞的毒性作用.结果 成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS及Ad-CMV,并经PCR验证正确.RT-PCR证实hNIS cDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞摄碘能力比阴性对照组Ad-CMV转染的细胞分别提高了23和31倍,且摄碘能力可以被NaClO4抑制.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞均可被131I杀死,2组细胞成活率分别为(31.2±1.45)%和(23.6±4.08)%,而阴性对照组和未转染病毒组分别为(89.0 ±2.99)%和(91.2 ±4.63)%.结论 hTERT启动子调控的hNIS重组腺病毒转染肿瘤细胞后,应用131I治疗有望成为一种新的基因靶向治疗手段.     

人PTEN基因表达载体的构建及其在U251细胞中的表达

背景与目的:克隆人野生型和突变型PTEN的cDNA并构建其表达载体,探讨该表达质粒在人星形胶质瘤细胞U251中的表达情况.材料与方法:分别从新鲜胎盘组织和结肠癌组织中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增人野生型和突变型PTEN基因全长cDNA,分别克隆入pMD 18-T载体上,经PCR、酶切鉴定均为阳性的克隆,进行核苷酸序列分析.再分别将两段基因定向克隆入pcDNA3.1( )载体中构建表达载体,转染入U251细胞.结果:成功克隆了人野生型及突变型PTEN cDNA并成功构建其表达载体,发现突变型PTEN蛋白对细胞生长无明显抑制作用,而野生型PTEN蛋白对细胞生长有明显抑制作用.结论:PTEN可能能抑制肿瘤细胞生长,为后进一步开展PTEN对肿瘤相关功能的研究奠定基础.     

中西医结合治疗老年人胆石病82例

中西医结合治疗胆石病,是近年来发展较迅速的一类方法,特别是对老年人胆石病尤为重要。据统计,老年人胆石病发病率:60～70岁者为40%,80岁以上者为55%左右。由于老年人全身各器官功能及结构状态都在进行性衰退,胆石病的表现往往不典型、病情变化复杂,常合并心血管、呼吸系统疾病,治疗难度较大,出现严重并发症时,病死率也较高。本文总结了于1994年10月～1996年12月用中西医结合方法治疗老年人胆石病82例,疗效较满意,现报告如下:     

解剖性腹腔镜下根治性全膀胱切除术的应用

随着腹腔镜技术不断发展,腹腔镜下根治性全膀胱切除术(laparscopic radical cystectomy,LRC)已成为一种较为成熟且日益规范的微创治疗方法,但传统 LRC由于解剖层次及手术步骤复杂、手术耗时较长、难度较大、学习曲线较长等原因,在多数医院一直难以常规开展.本文回顾我院自 2014 年 1月至2016 年3 月完成的 12 例解剖性 LRC+盆腔淋巴结清扫(pelvic lymph node dissection,PLND)+尿流改道术(urinary diversion,UD),其手术流程优化,难度降低,效果满意,现报告如下.     

连续性血浆滤过吸附治疗严重感染并多脏器功能障碍综合征的临床效果

目的 研究连续性血浆滤过吸附（CPFA）治疗严重感染并多脏器功能障碍综合征（MODS）的临床效果.方法 选择2011年1月～2013年12月本院ICU收治的48例患者,将患者随机分为观察组和对照组,每组各24例.在相同基础治疗的基础上,观察组给予CPFA联合高容量血液滤过（HVHF）治疗,对照组仅行HVHF治疗.观察患者的生命体征变化,行血、肾、血气常规检测,并检测治疗即刻、5h、10h的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、C-反应蛋白（CRP）水平,以评价治疗的安全性及临床疗效.结果 两组治疗后的生命体征、生化指标及APACHEⅡ评分比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;两组治疗即刻的TNF-α、IL-6、CRP水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,观察组治疗5、10 h的TNF-α、IL-6、CRP水平均显著低于对照组（P＜0.05）.结论 CPFA在降低致炎性细胞因子水平、提升抗炎/致炎因子水平方面的效果显著,对严重感染并MODS患者具有显著的临床意义,值得推广.     

杜氏通督理筋手法治疗椎动脉型颈椎病的临床疗效评价

目的：通过180例临床对照研究,观察杜氏通督理筋手法治疗椎动脉型颈椎病（CSA）的临床疗效,及对椎-基底动脉血流动力学指标（TCD）的影响,综合评价其临床疗效。方法：将患者随机分为两组,试验组采用杜氏通督理筋手法,对照组采用高等医药院校五版教材《推拿学》治疗手法。结果：试验组临床主症总显效率为78.79%,总有效率为100%;综合疗效评定总显效率为93.94%,总有效率为100%。对照组主症总显效率为32.26%,总有效率为96.77%;综合疗效总显效率为61.29%,总有效率为100%。结论：两组主症疗效总显效率和综合疗效总显效率经统计学处理有非常显著性差异,试验组明显优于对照组。     

我县门诊结核病患者药物治疗的不依从性与对策

药物治疗要求有序进行,根据医嘱按时、按量服药。对患者来说,药物治疗的成败不仅取决于医生诊断和用药的正确与否,还取决于患者是否严格遵守医嘱。尤其是结核病患者的药物治疗,须遵循“早期、规律、全程、联用、适量”的用药原则。实际上,有不少患者未按时、按量服用指定的药物,     

老年下肢骨折患者的康复护理

目的 探讨老年人下肢骨折的康复与护理指导.方法 对 103 例老年下肢骨折患者进行心理需求分析和健康指导,加强患肢肌肉、关节的功能锻炼.结果 103 例患者经康复护理训练指导,加快了患者的康复进程,增强了患者战胜疾病的信心,有效地防治了骨折并发症的发生.结论 通过正确的心理护理和健康指导可有效地预防骨折并发症,缩短患者卧床时间,最大限度地恢复患肢的功能,减少了患者生理和心理上的痛苦,从而带来较好的社会和经济效益.     

从Th1、Th17细胞极化探讨iMDC负载P258-73肽段干预EAN的机制

目的 观察未成熟髓源树突状细胞负载P258-73肽段干预实验性自身免疫性神经炎的效果,及干预对IL-17、IFN-γ mRNA表达的影响,从Th1、Th17细胞极化的角度探讨其干预机制.方法 P258-73aa负载于体外培养的iMDC,获得P258-73aa-iMDC,用P253-78aa和CFA免疫Lewis大鼠制成EAN动物模型,免疫前7d各组大鼠分别给予PBS、iMDC及P258-73aa-iMDC干预.观察发病情况并作临床评分及病理改变.收集引流淋巴结细胞检测淋巴细胞增殖反应,RT-PCR技术检测大鼠脾脏、淋巴结和坐骨神经中IL-17、IFN-γ mRNA的表达.结果 P258-73aa-iMDC干预组大鼠的平均临床评分、抗原特异性淋巴细胞增殖反应和坐骨神经炎性细胞浸润均降低;IFN-γ 及IL-17 mRNA在脾脏、淋巴结和坐骨神经中的表达也明显降低.结论 P258-73aa-iMDC通过影响IL-17、IFN-γ 的分泌,影响Th1、Th17细胞极化,抑制抗原特异性淋巴细胞增殖,从而减轻EAN的发病,这可能是其诱导免疫耐受的机制之一.

Abstract：

Objective To explore the improving potential of immature myeloid dendritic cell (Imdc) pulsed with P258-73aa peptide (P258-73aa-Imdc) in experimental autoimmune neuritis (EAN) ,and to explore the role of Th1/Th17 cells polarization in this tolerance therapy by detecting the expression of IL-17 and IFN-γ mRNA. Methods P258-73aa21 was pulsed with Imdc in vitro to get P258-73aa-iMDC. Rats of each group were immunized with P253-78aa and CFA. 7 days before immunization, each group was injected with PBS or iMDC or P258-73aa-iMDC respectively. Clinical scores of each group and histopathological changes were evaluated and the lymphocyte proliferation response was assayed; IL-17 and IFN-γ mRNA in spleen,lymph node and sciatic nerves were measured by RT-PCR. Results The P258-73aa-iMDC interferred group had lower average clinical score and suppressed antigen specific lymphocyte proliferation, as well as milder infiltration by the inflammatory cells in sciatic nerves. Meanwhile, the expression of IL-17/IFN-γ mRNA in spleen, lymph node and sciatic nerves were also decreased. Conclusion The protective effect of P258-73aa-iMDC could be associated with the inhibition of lymphocyte proliferation and IL-17, IFN-γ through the polarization of Th1/Th17 cells,which is probably one of the tolerance mechanism of P258-73aa-iMDC in EAN.