封闭负压固定技术在特殊部位植皮中的应用

目的:在难以加压固定的特殊部位应用封闭负压技术进行植皮区固定,并观察术后效果,为提高特殊部位植皮成活率提供更好的选择。方法:2012年1月～2013年1月,选取105例颜面部、颈部、腋窝、下腹部,会阴等处瘢痕切除松解后需行植皮术的患者,随机分为两组,分别采用封闭负压固定法或传统加压包扎固定法,观察并比较两组间植皮成活率、术后平均换药次数、二次手术率、术后平均住院时间等。结果:术后封闭负压固定组植皮成活率高于加压固定组(98%vs.92%,P<0.05),术后平均换药次数减少(2.5±0.8 vs.4.3±0.7,P<0.01),二次手术率降低(1.8%vs.6.2%,P<0.01),平均住院时间明显缩短(4.5±1.3 vs.6.7±1.1,P<0.05)。经3个月以上随访,封闭负压固定组皮片外观及功能均达到了较满意的效果。结论:对难以均匀加压及固定的特殊植皮区域,选择封闭负压技术,方法简便易行,能起到良好的加压、固定和引流作用,有效的提高了植皮的成活率。     

光气染毒小鼠急性肺损伤的浓时积与效应关系研究

目的通过比较光气染毒浓时积（Ct）的两个参数（浓度C与时间t）对染毒小鼠急性肺损伤程度的影响，探讨光气导致急性肺损伤的机制。方法以不同浓时积和固定浓时积不同浓度与时间进行光气染毒，测定肺脏湿干比、丙二醛（MDA）含量和髓过氧化物酶活力以及血清中MDA含量。结果随染毒浓时积增加，小鼠中毒死亡率增加（P〈0．001）；浓时积固定为12ml·min时，染毒浓度增加，小鼠中毒死亡率增加（P〈0．01），肺湿干比增加（P〈0．001），肺脏髓过氧化物酶活力和MDA浓度升高（P〈0．05）。结论光气染毒随浓时积增加，动物中毒死亡率升高，但在浓时积相同的条件下，暴露毒剂的浓度与暴露时间对急性中毒的影响不同；暴露毒剂的浓度高低对中毒程度的影响远大于暴露时间的影响，短时间高浓度的光气吸入会比低浓度长时间的光气吸入造成更为严重的肺部损伤。     

γ射线照射引起氧化损伤促进衰老

目的：利用γ射线照射引起氧化损伤,观察氧化损伤与衰老的关系。方法：将60只昆明小鼠随机分成对照组、D-半乳糖组、γ射线组和D-半乳糖＋γ射线组,共4组,每组15只。D-半乳糖组于小鼠腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,γ射线组给予γ射线全身照射,D-半乳糖＋γ射线组在小鼠腹腔注射D-半乳糖的同时给予射线照射,对照组给小鼠腹腔注射等量的生理盐水。各组小鼠按上述处理80d后处死,取材,观察肝、脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量,脂褐素含量,血清晚期糖基化终产物（AGEs）水平和肝组织β-半乳糖苷酶染色情况。结果：与对照组相比,D-半乳糖组小鼠肝、脑组织的SOD活性降低（P〈0.05）,MDA含量、血清AGEs水平和脂褐素含量升高（P〈0.05）,肝脏β-半乳糖苷酶染色呈阳性改变;γ射线组小鼠肝、脑组织SOD活性降低（P〈0.05）,MDA含量、脂褐素含量升高（P〈0.05）,肝脏β-半乳糖苷酶染色呈阳性改变,血清AGEs水平变化不明显（P〉0.05）。与D-半乳糖组相比,D-半乳糖＋γ射线组小鼠肝、脑组织的SOD活性降低（P〈0.05）,MDA含量、血清AGEs水平和脂褐素含量升高（P〈0.05）,肝脏β-半乳糖苷酶染色表达增强。结论：γ射线全身照射后可加重氧化损伤,进而促进衰老的改变。     

钠氢交换蛋白1抑制剂对严重烧伤后多脏器损伤大鼠的保护作用研究

目的 探讨钠氢交换蛋白1(NHE1)抑制剂对严重烧伤后全身多脏器功能损伤大鼠的保护作用,并探讨其潜在的机制.方法 常规方法建立30%体表面积烫伤的大鼠模型.用NHE1抑制剂(卡立泊来德)干预后,通过观察组织病理学及炎症因子的改变来探讨NHE1在烧伤后多脏器损伤时所起的作用.结果 NHE1在烧伤后大量表达,而NHE1的抑制剂可显著减轻烧伤后心脏、肺脏、肾脏及小肠的损伤.同时NHE1抑制剂也可以降低肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、髓过氧化物酶(MPO)水平.结论 NHE1抑制剂显著减轻烧伤后大鼠多脏器损伤,其部分机制可能是抑制了组织的炎症反应.     

RhoA基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响

Objective To construct a RhoA-siRNA expression vector and determine its role on the malig-nant behavior of HepG2 cells.Methods A RhoA-siRNA DNA fragment was synthesized and cloned into the expression vector of pGenesil-1.The constructed Rhon-siRNA DNA plasmid was stably transfected into HerG2 cells by lipofectamine,and then HepG2 cells were divided into the HepG2/RhoA-siRNA group (HepG2 cells were transfected with pGenesil-1-RhoA-siRNA),HepG2/control group(HepG2 cells were transfected with control plasmid) and HepG2 group (without plasmid transfection).The inbibitory effect of RhoA-siRNA on RhoA protein expression was shown by Western blot.The proliferation,migration,growth potentiality and cell cycle of transfected HepG2 cells were evaluated by MTT assay,wounded healing,the plate cloning formation test and flow cytometry,respectively.All data were analyzed by one-way analysis of variance (ANOVA) and chi-square test.Results The expression of RhoA protein in the HepG2/RhoA-siRNA group was,significantly decreased compared with that in the other two groups (F=178.19,P<0.05).Scratched cells were healed within 48 hours in the HepG2/control group and HepG2 group,but not in the HepG2/RhoA-siRNA group.The clone formation rates in the HepG2/RhoA-siRNA group,HepG2 group and HepG2/control group were 39%±3%,67%±5%and 70%±6%,respectively,with a significant difference among the three groups(χ2=33.34,38.69,P<0.05).Flow cytometry showed that the number of cells transfected with RhoA-siRNA was highest in the G0/G1 phase and lowest in the S phase(F=70.46,76.57.P<0.05).Conclusion The RhoA-siRNA expression vector can effectively suppress the proliferation and migration of HepG2 cells,which may provide a novel gene therapy for hepatocellular carcinoma.     

热损伤角质形成细胞培养上清对真皮成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1表达的影响

目的探讨角质形成细胞(keratinocytes,KC)热损伤后对真皮成纤维细胞(fibroblasts,Fb)Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)表达的影响。方法分离培养人正常Fb及KC,分别建立KC、Fb热损伤模型;收集正常及热损伤12 h后细胞培养上清,并配制成浓度为50%的细胞条件培养液。根据培养液不同将第3～5代Fb分为3组,分别采用含50%热损伤KC培养上清(A组)、含50%正常KC培养上清(B组)的条件培养液及单纯DMEM(C组)培养,24 h后收集3组细胞;另于培养0、1、2、6、12、24、48 h分别收集A组细胞。采用含50%热损伤Fb培养上清的条件培养液培养Fb,于0、1、2、6、12、24、48 h收集细胞。采用实时荧光定量PCR检测各时间点KC热损伤条件培养上清对FbⅠ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA表达影响,以及Fb热损伤条件培养上清对Fb MMP-1mRNA表达影响。结果 KC热损伤条件培养上清培养24 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均显著高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。培养2、6、12、24、48 h,A组Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP-1 mRNA相对表达量均高于0 h(P<0.05),1 h与0 h差异无统计学意义(P>0.05);随培养时间延长相对表达量逐渐增高,2 h后各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Fb热损伤条件培养上清培养1、2、6、12、24、48 h,MMP-1 mRNA相对表达量与0 h比较,差异均有统计学意义(P<0.05);培养2 h后相对表达量逐渐降低,各时间点间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论热损伤后KC培养上清对FbⅠ、Ⅲ型胶原及MMP-1的表达具有调控作用。     

股前外侧游离皮瓣在深度电击伤创面早期修复中的应用

随着社会工业化的发展,电击伤逐年增多.该类患者伤情独特,具有入口和出口,同时伴有血管损伤和继发血栓等,容易造成创面加深或深部组织外露,截肢率及病死率较高.2009年6月-2011年7月,笔者采用股前外侧皮瓣游离移植的方式早期封闭深度电击伤创面,取得预期临床效果.     

RhoA基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖和迁移能力的影响

目的 构建RhoA-siRNA表达载体,研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响.方法 利用pGenesil-1 质粒构建RhoA-siRNA表达载体,以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系,并分为3组.转染 pGenesil-1-RhoA-siRNA 载体者为HepG2/RhoA-siRNA组,转染随机对照载体者为HepG2/control组,未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组.Western blot检测RhoA-siRNA对其蛋白表达的抑制情况.分别采用MTT法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能,流式细胞仪检测细胞周期变化.采用单凶素方差分析、x2检验比较各组差异.结果 3组细胞蛋白表达水平比较,HepG2/RhoA-siRNA组RhoA蛋白的表达明显下调(F=178.19,P<0.05).HepG2/control组和HepG2组细胞划痕损伤在48 h内愈合,而HepG2/RhoA-siRNA组则不能愈合.HepG2/RhoA-siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2/control组,分别为39%±3%、67%±5%、70%±6%,其差异有统计学意义(χ2=33.34,38.69,P<0.05).RhoA基因沉默显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖,细胞周期中G0/G1期细胞数量增多而S期细胞数量减少(F=70.46,76.57,P<0.05).结论 RhoA-siRNA表达载体能抑制肝癌HepG2细胞的增殖和迁移,可为肝癌的基因治疗提供新的方法.     

腹部窄蒂轴型皮瓣的设计及临床应用

目的改良以往腹部轴型皮瓣关于蒂部的设计方法,以期获得更好的临床效果。方法本组患者共22例,设计25个腹部轴型皮瓣,其中脐旁皮瓣6个,下腹部皮瓣19个,皮瓣大小为5.0 cm×9.0 cm-11.0 cm×25.0 cm,血管蒂部设计宽度为3.0-4.5 cm,长度3.0-5.0 cm。用于手及腕部创面的修复22处,用于前臂及肘关节创面的修复3处。皮瓣转移后1周开始血运训练,3-5 d后断蒂。结果 25例皮瓣均成活良好,无一例出现血运障碍,皮瓣平均断蒂时间为（10±1.8）d。结论腹部轴型皮瓣进行窄蒂设计后增加了其临床应用的灵活性和安全性,缩短了住院时间。     

siRNA沉默NHE1基因对MHCC97-H肝癌细胞侵袭迁移的影响

目的:探讨RNA干扰沉默NHE1基因后对人肝癌细胞株MHCC97-H细胞侵袭迁移的影响,方法:应用NHE1基因小干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)转染人肝癌细胞株MHCC97-H细胞,同时设立空白对照组和无关对照组.转染成功后采用RT-PCR和Western blot分别从基因和蛋白水平...