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目的 评价实时荧光RT-PCR和核酸依赖性序列扩增法(NASBA)两种方法在呼吸道多病原检测中的应用价值。方法 收集北京地区急性呼吸道感染病例标本140份,分别采用实时荧光RT-PCR方法和NASBA方法对样本进行平行检测并对两种方法的病原检出限、重复性、检测一致性及检测时间等指标进行比较。结果 两种检测方法批内重复CV值均<5%,重复性较好;实时荧光RT-PCR方法对脊灰毒株核酸和H1N1病毒核酸最低检出限分别为5.62 CCID50 /0.1 ml(107 倍稀释)和103倍稀释度,NASBA方法最低检出限分别为56.2 CCID50 /0.1 ml(106 倍稀释)和102倍稀释。实时荧光RT-PCR灵敏度略优于NASBA方法。针对两种方法共同检测呼吸道病原体种类,实时荧光RT-PCR和NASBA方法检测阳性率分别为89.28%(125/140)、70%(98/140)。两种方法对甲型H1N1病毒、肠道病毒及新型冠状病毒的检测结果一致性达100%,对甲型流感病毒、甲型H3N2、副流感病毒1-4型的检测结果基本一致, Kappa 值范围为0.81~1;对冠状病毒229E/HKU1/OC43/NL63、鼻病毒、呼吸道合胞病毒和乙型流感病毒的检测结果一致性较好, Kappa 值范围为0.61~0.80;对人偏肺病毒的检测结果一致性差, Kappa 值仅为0.55。实时荧光RT-PCR方法检测时间为90 min,NASBA方法仅需40 min即可完成。 结论 实时荧光RT-PCR方法灵敏度较高,适合对大批量临床样本进行筛查;NASBA方法检测时间短,不易污染,适用于时限性强但对灵敏度要求不太高的应用场景,如临床上重症呼吸道感染者的快速检测。建议根据不同需求和应用场景,选择合适的检测方法和产品。 相似文献
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人呼吸道合胞病毒(HRSV)属于肺炎病毒科,正肺病毒属,非节段性单股负链RNA病毒。HRSV主要引起呼吸道感染,已经成为婴幼儿和5岁以下儿童呼吸道感染住院的主要原因之一,也是成年人、老年人以及免疫缺陷患者严重呼吸道疾病的主要病原体之一。 目前,临床尚无有效的HRSV疫苗或治疗方法。 HRSV有A、B两个亚型及多个基因型,不同亚型及基因型流行病学特征不同。 本研究对HRSV病原学、分子流行病学、疫苗研究及HRSV检测分型技术等进行综述,为HRSV疫苗研究及相关呼吸道传染病的防治和监测预警提供重要的理论依据。 相似文献
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