过表达PRDM13抑制胶质瘤细胞相关功能基因的测序分析

目的比较过表达PRDM13慢病毒与感染阴性对照病毒的胶质瘤细胞mRNA存在的差异,筛选并分析抑制胶质瘤增殖、迁移相关的基因。方法通过胶质瘤细胞感染慢病毒,建立过表达PRDM13细胞模型,使用转录组测序方法检测两组中差异表达基因,并进行GO分析。结果过表达PRDM13慢病毒细胞模型成功建立,过表达PRDM13可以改变U87细胞的形态,转录组测序检测到实验组和对照组显著性差异表达基因。结论找到抑制胶质瘤增殖、迁移的相关基因,为进一步研究PRDM13的作用机制提供了理论依据。     

同型半胱氨酸致泡沫细胞形成过程中miR-148a与DNMT1相互作用的研究

【目的】 探讨DNMT1和其特异性miRNA二者在Hcy致泡沫细胞形成过程中的作用,阐明特异性miRNA与DNMT1相互调控的分子机制。 【方法】 培养THP-1单核源性泡沫细胞,油红O染色鉴定;生物信息学预测调控DNMT1的特异性miRNA;运用qRT-PCR和Western Blot检测不同浓度Hcy(0、50、100、200、500 μmol/L)及100 mol/L Hcy+叶酸+维生素B₁₂(H+F+V)干预泡沫细胞后,miR-148a和DNMT1的表达。使用慢病毒miR-148a mimic和inhibitor分别过表达和抑制miR-148a,检测其对DNMT1表达的影响;针对miR-148a与DNMT1特异性结合的碱基位点,构建野生型(Wt)和突变型(Mut)的3'UTR荧光素酶报告质粒,与miR-148a mimic共转染,运用双荧光素酶报告基因检测系统检测DNMT1荧光素酶活性。采用胆固醇检测试剂盒分析miR-148a过表达或抑制后对细胞内胆固醇含量的影响。用100 mol/LHcy干预泡沫细胞,通过甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测miR-148a启动子区甲基化改变,同时构建DNMT1重组质粒并感染泡沫细胞,检测DNMT1过表达后miR-148a启动子区DNA甲基化变化。 【结果】 分析提示调控DNMT1的特异性miRNA为miR-148a;不同浓度Hcy干预泡沫细胞后,DNMT1表达降低,miR-148a表达升高,以100 μmol/L Hcy组改变最为明显,差异均有显著性(P<0.05);给予100 μmol/L Hcy+叶酸+维生素B12后上述情况改善(P<0.05)。过表达miR-148a后DNMT1 mRNA和蛋白水平明显下降,而抑制miR-148a后DNMT1 mRNA和蛋白水平明显升高,差异均有显著性(P<0.05)。将WtDNMT1 3'UTR荧光素酶报告质粒与miR-148a共转染,荧光素酶活性显著下降(P<0.05);将MutDNMT1 3'UTR荧光素酶报告质粒与miR-148a共转染,荧光素酶活性无明显改变。提示miR-148a可能通过与DNMT1的mRNA 3'UTR碱基UGCACUG发生互补配对结合,从而靶向抑制其表达。过表达miR-148a后,细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量明显增加;沉默miR-148a后,细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量明显降低(P均<0.05);而细胞内胆固醇酯含量无明显变化。给予100 μmol/L Hcy干预泡沫细胞后,miR-148a甲基化呈显著下降趋势;给予叶酸+维生素B12干预后,miR-148a甲基化水平较Hcy显著升高(P均<0.05)。过表达DNMT1后,miR-148a启动子区DNA甲基化水平升高(P<0.05)。 【结论】 miR-148a是DNMT1的特异性miRNA,其可能通过直接与DNMT1 3'UTR部分碱基序列UGCACUG发生互补配对结合影响DNMT1表达;miR-148a可通过增加泡沫细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量参与Hcy致泡沫细胞的形成过程;DNMT1在miR-148a启动子区甲基化过程中发挥重要作用。     

住院患者对生活护理的需求及护理对策

为了解患者对生活护理需求及护士的实施情况,我们采用自行设计的问卷,用随机抽样的方法对我院的104名一级护理的患者进行调查,根据调查结果进行分析、讨论,做出相应,切实,可行的护理对策。     

吸附无细胞百白破联合疫苗与吸附百白破联合疫苗强化接种后不良反应比较

目的 比较吸附无细胞百白破联合疫苗(ADPT)与吸附百白破联合疫苗(WDPT)强化接种后的不良反应,探讨最适合强化接种的百白破联合疫苗.方法 选择在我院强化免疫接种健康幼儿320人,按照自愿的原则随机均分为ADPT组和WDPT组,ADPT组采用吸附无细胞百白破联合疫苗接种,WDPT组采用吸附百白破联合疫苗接种,接种48 h后随访两组幼儿全身不良反应及局部不良反应情况.结果 两组幼儿接种48 h后在全身不良反应和局部不良反应方面比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),ADPT不良反应轻于WDPT不良反应.结论 强化百白破疫苗接种时,应首选ADPT接种.     

门诊采血室开展优质护理服务的做法与体会

门诊采血室响应卫生部的推广优质护理示范方案,通过弹性排班、信息化普及、提升服务理念、提升技术水平、加强应急培训、绩效方案改革等方面优化服务流程,缩短患者等候时间,调动员工积极性,提升护理质量及效率。     

吸附无细胞百白破联合疫苗与吸附百白破联合疫苗强化接种后不良反应比较

目的 比较吸附无细胞百白破联合疫苗(ADPT)与吸附百白破联合疫苗(WDPT)强化接种后的不良反应,探讨最适合强化接种的百白破联合疫苗.方法 选择在我院强化免疫接种健康幼儿320人,按照自愿的原则随机均分为ADPT组和WDPT组,ADPT组采用吸附无细胞百白破联合疫苗接种,WDPT组采用吸附百白破联合疫苗接种,接种48 h后随访两组幼儿全身不良反应及局部不良反应情况.结果 两组幼儿接种48 h后在全身不良反应和局部不良反应方面比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),ADPT不良反应轻于WDPT不良反应.结论 强化百白破疫苗接种时,应首选ADPT接种.     

吸附无细胞百白破联合疫苗与吸附百白破联合疫苗强化接种后不良反应比较

目的 比较吸附无细胞百白破联合疫苗(ADPT)与吸附百白破联合疫苗(WDPT)强化接种后的不良反应,探讨最适合强化接种的百白破联合疫苗.方法 选择在我院强化免疫接种健康幼儿320人,按照自愿的原则随机均分为ADPT组和WDPT组,ADPT组采用吸附无细胞百白破联合疫苗接种,WDPT组采用吸附百白破联合疫苗接种,接种48...