反复种植失败妇女“种植窗”时期子宫内膜组织的细胞骨架蛋白质的差异表达

目的探讨体外受精-胚胎移植治疗周期中反复种植失败(RIF)和已生育正常妇女"种植窗"时期(LH+6~LH+9d)子宫内膜组织蛋白质表达的差异。方法选择RIF妇女和正常对照妇女各4名分为实验组和对照组。采用胶内差异双向电泳、(2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术鉴定子宫内膜组织的差异表达蛋白质。结果两组之间获得16个差异表达蛋白质(其中6个下调表达,10个上调表达),其中10个参与细胞骨架构成,分别是:波形蛋白、埃兹蛋白、Septin 2蛋白、radixin蛋白、纽蛋白、角蛋白8、角蛋白10、角蛋白18、角蛋白19及肌动蛋白。结论本研究结果证实"种植窗"时期RIF妇女子宫内膜组织存在多个细胞骨架蛋白质表达的异常,可能是子宫内膜细胞"质膜转换"缺陷和胚胎种植失败的重要原因。     

不明原因反复种植失败患者“种植窗”期血清雌二醇、孕酮增高与肿瘤坏死因子受体

目的 探讨不明原因反复种植失败（RIF）和正常生育妇女（FC）“种植窗”期血清雌二醇（E2）、孕酮（P）、E2/P水平和子宫内膜组织学时相、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和肿瘤坏死因子受体作用因子3（TRAF3）蛋白质的表达及其变化差异与反复种植失败的关系。方法 2009年10月至2012年3月于中山大学附属第一医院募集34名女性自愿者（反复种植失败患者15例,生育对照组19名）。在黄体生成激素（LH）+6~LH+9 d检测血清E2、P水平,微创法取子宫内膜组织;应用Western blot进行TRAF3的蛋白质水平半定量分析,免疫组织化学技术分析ER、PR和TRAF3定位表达与图象半定量分析。结果 “种植窗”期血清E2、P水平,子宫内膜腺上皮细胞ER、PR,基质细胞ER、PR在两组间差异无统计学意义,但RIF患者血清E2/P显著高于对照组（[WTBX]P[WTBZ]=0.026）。免疫组织化学法分析显示TRAF3主要定位于子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞,基质细胞表达很弱;免疫组化染色光密度值分析和Western blot半定量结果均显示不明原因RIF组TRAF3表达显著降低（[WTBX]P[WTBZ]=0.02）。结论 “种植窗”期子宫内膜组织存在TRAF3的定位与半定量表达;E2/P升高可能影响子宫内膜组织局部分子的表达。     

人子宫内膜细胞体外培养模型的建立

【目的】构建人子宫内膜细胞体外培养模型。【方法】收集子宫内膜组织,采用酶消化、筛网滤过、梯度离心的方法获得腺上皮与基质细胞混合细胞进行体外原代培养,采用光学显微镜下观察体外培养的细胞形态,采用波形蛋白和角蛋白单克隆抗体进行免疫组化法鉴定子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞。【结果】倒置显微镜下发现子宫内膜细胞中腺上皮细胞和基质细胞呈混合生长,其中基质细胞占大部分,为72．0％;腺上皮细胞占小部分,为24．5％,基质细胞和腺上皮细胞免疫组化染色后呈阳性,细胞纯度分别为24．5％和70．5％,两种细胞加起来的纯度为95％。【结论】该方法操作简便,效率高,可建立一个稳定实用的人子宫内膜细胞体外培养体系。     

先天性肾上腺皮质增生症行体外受精-胚胎移植一例分析及文献复习

目的：探讨先天性肾上腺皮质增生症（CAH）基因诊断及行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）助孕治疗的特点。方法：报告1例CAH合并原发性不孕女性患者的临床表现、染色体检查、生化和类固醇激素测定,采用直接基因测序法测定基因型,并进行糖皮质激素替代治疗及IVF-ET助孕治疗。结果：该患者基因突变检测显示CYP21A2基因复合杂合突变,确诊为21-羟化酶缺乏（21-OHD）型CAH,经IVF-ET成功妊娠,孕期予以糖皮质激素干预并进行产前诊断,孕足月分娩一健康男婴。结论：基因检测是CAH遗传学诊断和产前诊断的有效方法,CAH患者进行IVF-ET期间降低雄激素与孕激素可改善助孕治疗结局。     

人绒毛膜促性腺激素与胚胎种植

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是一种由早期胚胎滋养球细胞和胎盘滋养层合体细胞分泌的、两个亚基以非共价健结合的糖蛋白激素.目前认为它是滋养层细胞和众多胚胎源性物质中最早出现的标志物.β-HCG通过内分泌和旁、自分泌途径与靶细胞表面HCG/LH受体(HCG/LH-R)结合在胚胎发育、妊娠早期黄体功能维持和胚胎种植与胎盘形成过程中发挥着不可缺少的生物学作用.