结核分支杆菌药物敏感性检测方法比较

在结核病发现与规范化治疗中,结核菌耐药情况日益严重.因此,准确进行分支杆菌的培养与鉴定至关重要.本分别采用改良罗氏培养基常规培养方法、全自动分支杆菌检测系统（BACTEC MGIT 960 System,美国BD公司）仪器法、聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析3种方法,检测分离菌株对利福平（RFP）、链霉素（SM）的敏感性与耐药性,并进行分析比较.结果报告如下.     

噬菌体法检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的研究

目的 建立噬菌体生物扩增法（PhaB法）快速测定乙胺丁醇耐药性的实验体系,探讨PhaB法在测定结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的应用价值.方法 应用PhaB法测定115株临床分离结核分枝杆菌耐药性,并与BacT/ALERT 3D药敏试验结果相比较,对耐药性测定结果不一致的菌株测定其最低抑菌浓度.结果 115株结核分枝杆菌临床分离株中经BacT/ALERT 3D测定敏感89株,耐药26株;PhaB法测定敏感93株,耐药22株.两种方法测定均为敏感87株,均为耐药20株,两种方法测定药敏结果相符率为93.0%;结果不符8株,不符合率6.96%.如以BacT/ALERT 3D药敏结果为判断标准,则PhaB法检测乙胺丁醇耐药性的敏感性为76.9%（20/26）,特异性为97.8%（87/89）,阳性预测值为90.9%（20/22）,阴性预测值为93.5%（87/93）,准确性为93.0%（107/115）.结论 PhaB法检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性只需3天时间,操作简便,不需特殊仪器设备,可作为结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性快速筛选方法之一.     

噬菌体生物扩增法与3D培养检测结核分枝杆菌的对比分析

目的探讨噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法对117份肺结核患者痰和体液标本进行噬菌体生物扩增法检测并与3D培养进行对比分析。结果痰噬菌体生物扩增法阳性率为43.9%,3D培养为27.1%;体液噬菌体生物扩增法阳性率为80.0%,3D培养为0。结论噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌明显优于3D培养。     

噬菌体法与BacT／ALERT3D检测吡嗪酰胺对耐药性结核分枝杆菌的比较研究

【目的】建立噬菌体生物扩增法（PhaB法）快速测定吡嗪酰胺（PZA）耐药性,探讨其在结核分枝杆菌（MTB）PZA耐药性测定中的应用价值。【方法】应用MTB噬茵体法快速MTB耐药的PhaB方法并用于测定115株MTB-1盎床分离株耐药性。同时与BacT／ALERT3D药敏试验结果相比较,对耐药性测定结果不符合的菌株测定其最低抑茵浓度（MIC）。【结果]PhaB法检测PZA耐药性的最佳测定条件为pH值5．5、药物浓度200mg／L、37℃作用48h。115株临床分离株,PhaB法敏感90株,耐药25株;BacT／ALERT3D法敏感87株,耐药28株;其中两种方法均敏感85株,均耐药24株,即测定结果相符109株,符合率94．78％;测定结果不符6株,不符合率5．22％。如以BacT／ALERT3D测定结果为判断标准,则PhaB检测PZA耐药性的敏感性为85．71％（24／28）,特异性为97．70％（85／87）,阳性预测值为96％（24／25）,阴性预测值为94．44％（85／90）,准确性为94．78％（109／115）。【结论]PhaB法检测PZA耐药性只需2～3d时间,操作简便,不需特殊仪器设备,可作为MTB的PZA耐药性快速筛选方法。     

噬菌体生物扩增法检测结核性液体标本的临床应用价值

目的评价噬菌体生物扩增法(PhaB法)检测结核性液体标本的临床应用价值。方法应用BacT/ALERT 3D培养法(3D培养法)、PhaB法对142例液体标本进行检测,其中结核病例组122例,包括胸腹腔积液69例、脑脊液26例、尿液10例、脓汁及干酪物10例、其他7例,对照组非结核病例20例,并以3D培养法为金标准,评价2种检测方法对结核性液体标本的诊断价值。结果 PhaB法、3D培养法检测阳性率分别为43.4%(53/122)、32.8%(40/122);PhaB法与3D培养法对比,差异有统计学意义(χ2=5.87,P<0.05);以3D培养法结果为金标准,则PhaB法检测准确度、敏感性为92.5%和100%。结论①PhaB法检测结核性液体标本具有较高的敏感性和特异性,且操作简便、快速,可以在肺外结核诊断中常规应用;②3D培养法可做分枝杆菌药物敏感性试验和菌型鉴定,但需时较长。     

噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用

目的探讨噬菌体生物扩增法（料-aB）快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法对108例肺结核患者痰标本进行噬菌体裂解试验，并与集菌涂片，BacT／ALERT 3D检测仪法相比较。结果噬菌体裂解法阳性率59．3％（64／108），与集菌涂片法28．7％（31／108）、BacT／ALERT3D检测仪法43．5％（47／108）相比差别有显著意义。结论PhaB快速、简便、灵敏、特异，有助于结核分枝杆菌的检测，可用于结核病的快速诊断。     

重组结核分枝杆菌16ku-38ku-ESAT-6融合蛋白的血清学评价

目的 以重组结核分枝杆菌16 ku-38 ku-ESAT-6融合蛋白(以下简称重组蛋白)为包被抗原,探讨该抗原对结核病的诊断价值.方法 结核组105例、对照组45例(包括非结核病患者25例及健康体检者20例),以重组蛋白作为包被抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测150例受检者血清中的重组蛋白抗体水平,得出各组之间的吸光度值及阳性率,并与结核分枝杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒的检测结果进行比较,以此来评价重组蛋白对结核病的诊断价值,并建立受试者工作特征(ROC)曲线评价系统.结果 重组蛋白检测对照组的阳性率为6.67%(3/45),与试剂盒检测阳性率[51.11%(23/45)]比较差异有统计学意义(P＜0.01),结核组阳性率为59.05%(62/105),与试剂盒检测阳性率[64.76%(68/105)]比较差异无统计学意义(P＞0.05).结核组与对照组的吸光度值分别为2.22±0.58、1.35±0.24,两组比较差异有统计学意义(t=6.06,P＜0.01);重组蛋白检测结核病的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为59.05%、93.33%、95.38%、49.41%.应用ROC曲线分析,得出曲线下面积为0.751,cutoff值为2.52,此时敏感度及特异度分别为65.4%、84.8%.结论 重组蛋白检测血清结核抗体具有较高的特异度,可以更好地区分结核病患者群与非患者群,可以作为结核病诊断的备选抗原之一.

Abstract：

Objective To investigate the diagnostic value of 16 ku-38 ku-ESAT-6 protein in tuberculosis (TB). Methods ELISA was used for measuring the level of recombinant 16 ku-38 ku-ESAT-6 protein in 105 TB patients (TB group,26 patients with smear-positive, 79 patients with smear-negative) and 45 controls (control group, 20 healthy volunteers and 25 subjects with pulmonary diseases other than TB). The value of the antigen for diagnosis of TB in serodiagnosis was assessed, and ROC curve evaluation system was established. Results In control group, the positive rate of anti-recombinant 16 ku-38 ku-ESAT-6 protein and commercialization of TB antibody test kit had significant difference [6.67% (3/45) vs. 51.11% (23/45)](P＜0.01);but in TB group, there was no significant difference [59.05%(62/105) vs. 64.76% (68/105)](P＞0.05). The optical density value in TB group and control group was 2.22 ± 0.58 and 1.35 ± 0.24,and there was significant difference(t = 6.06,P＜ 0.01). The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of the test was 59.05%,93.33%,95.38%,49.41% respectively. Analyzed by ROC curve, the area under the curve was 0.751, the- value of cutoff was 2.52, and sensitivity and specificity was 65.4% and 84.8%. Conclusions Recombinant 16 ku -38 ku -ESAT-6 protein of mycobacterium tuberculosis has higher specificity, and it can significantly distinguish TB and non-TB. So it might be selected as one of diagnosis antigens of TB.     

类风湿性关节炎患者IL-1、IL-15的水平变化及意义

目的研究类风湿性关节炎（RA）患者血清IL-1、IL15的水平变化及意义。方法收集91例RA患者和45例健康体检者，分别采用放射免疫分析法和ELISA法测定血清IL-1、IL-15的水平。结果RA非活动组和RA活动组的血清IL-1、IL-15水平均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。RA活动组的血清IL-1、IL-15水平高于RA非活动组，差异有统计学意义（P〈0．05）。在91例RA患者中血清IL-1、IL-15水平显著相关（r=0.813，P〈0．05）。结论IL-1、IL-15在RA患者的疾病发展过程中发挥着重要作用，同时检测RA患者中血清IL-1、IL-15的水平，有利于监测RA病情和指导临床治疗。