革兰阴性杆菌TEM型β-内酰胺酶耐药基因研究

目的 了解中南大学3所附属医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性杆菌TEM型耐药基因的检出及流行情况.方法 收集254株多重耐药革兰阴性杆菌,采用双纸片协同法(DDS)进行ESBLs表型确证,多重PCR.法扩增blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因,TEM特异性引物对其整个开放阅读框进行扩增并对PCIL产物测序,通过BLAST分析确定基因型;并对携带有TEM基因的革兰阴性菌株用随机扩增多态DNA(RAPD)方法进行菌株的同源性分析.结果 经多重PCR扩增,105株肠杆菌获得阳性结果,其中85株菌携带TEM基因,26株菌携带SHV基因,10株菌携带OXA-1基因;6株非发酵菌获得阳性结果,均携带TEM基因,且全部为TEM-1型广谱β-内酰胺酶.携带blaTEM耐药基因的菌株所含RAPD类型:大肠埃希菌12种,肺炎克雷伯菌6种,阴沟肠杆菌7种.结论 TEM-1型β-内酰胺酶是湖南地区主要流行的TEM型酶;大肠埃希菌产TEM酶情况尤为突出;在同一医院以及同一病区存在TEM-1型β-内酰胺酶的克隆传播.     

血清胱抑素-C与危重病人急性肾损伤

目的 测定ICU的急性肾损伤(AKI)患者和ICU非AKI患者的血清胱抑素-C(Cys C)、尿素、肌酐、尿酸及β 2-MG的水平,研究Cys C在AKI中的应用价值.方法 采用日立7170全自动生化分析仪测定1CU AKI患者37例和ICU非AKI患者20例的Cys C、尿素、肌酐、尿酸和β2-MG,用受试者工作曲线评价Cys C的诊断价值,采用SPSS 16.0统计软件包进行统计分析.结果 ICU的AKI患者的血清CysC水平较ICU非AKI对照组升高,有统计学意义,且与尿素、肌酐、尿酸和β 2-MG成正相关,相关系数分别为r=0.516,P<0.01、r=0.552,P<0.01、r=0.569,P<0.01、r=0.360,P<0.05;1/Cys C与eGFR呈正相关,r=0.733,P<0.001;与AKI分期差异无统计学意义.ROC曲线分析证实Cys C在AKI的诊断中敏感性和特异性最好.结论 血清Cys C可以做为ICU病人发生AKI的诊断指标,为AKI的及时诊断、肾功能的评估提供了可靠的依据,有助于临床更好的把握治疗时机.     

湖南地区SHV型超广谱β-内酰胺酶的研究

目的 了解湖南地区产SHV型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的检出情况,确定其基因型,并对其流行病学特征进行研究.方法 收集、鉴定分离菌株,进行ESBLs检测;PCR扩增blaSHV基因;对PCR产物测序确定其基因型;并通过随机扩增多态性DNA(RAPD)进行菌株同源性分析.结果 171株多药耐药的肠杆菌科中共有26株菌携带blaSHV基因,PCR产物经测序共检出5种基因型:9株携带SHV-28、7株携带SHV12、7株携带SHV-1、2株携带SHV-11和1株携带SHV-5;RAPD结果显示,19株肺炎克雷伯菌有6种RAPD类型,5株阴沟肠杆菌分别为不同的RAPD类型.结论 SHV-12是湖南地区主要流行的SHV型ESBLs,并且在产SHV型β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌中存在菌株间的克隆传播,未发现产SHV型ESBLs的大肠埃希菌.     

血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测对深部真菌感染的诊断价值

目的 探讨血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测对深部真菌感染的诊断价值.方法 应用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒定量检测血清中(1-3)-β-D-葡聚糖的含量,并进行统计学分析.结果 60例可疑深部真菌感染患者,真菌培养法28例阳性,阳性率为46.7%;血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测法阳性38例,阳性率63.3%,血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测法阳性率明显高于真菌培养法(χ2=24.7620,P<0.05).深部真菌感染培养阳性组血清(1-3)-β-D-葡聚糖含量为(68.84±21.28)pg/ml,深部真菌感染培养阴性组血清(1-3)-β-D-葡聚糖含量为(31.94±10.65)pg/ml,20例健康对照组两法均为阴性,统计学处理表明深部真菌感染组血清(1-3)-β-D-葡聚糖浓度明显高于正常对照组(t=2.6040、2.0978,P<0.05),而且深部真菌感染培养阳性组血清(1-3)-β-D-葡聚糖浓度亦明显高于深部真菌感染培养阴性组(t=2.347,P<0.05).结论 血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测较传统的真菌培养法简便、快速、阳性率高,可用于深部真菌感染的早期快速诊断.     

血清PG和TAM联合检测对胃癌早期诊断的价值

目的探讨血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ、Ⅱ和血清肿瘤相关物质(TAM)联合检测筛查胃癌的应用价值,为胃癌早期诊断提供新的理论和实验依据。方法选择80例受试者,其中胃癌患者40例,健康者40例,采用免疫比浊法测定血清PGⅠ、PGⅡ含量,并计算PGⅠ/PGⅡ比值;采用分光光度法测定血清TAM含量,分析联合检测血清PG和TAM对胃癌诊断的敏感性和特异性。结果与正常对照组相比,胃癌患者血清PGⅠ含量、PGⅠ/PGⅡ比值均显著降低(P<0.01),血清TAM含量明显升高(P<0.01),而血清PGⅡ含量无明显变化(P>0.05);单检胃癌患者血清胃蛋白酶原(PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ)、TAM敏感性分别为75.00%、77.50%;特异性分别为72.50%、87.50%,两者联合检测在胃癌诊断中敏感性为92.50%,特异性为70.00%,联合检测的敏感性与单项检测的敏感性相比差异具有显著性(P<0.05)。结论联合检测血清胃蛋白酶原(PG)与血清肿瘤相关物质(TAM)筛查胃癌优于PG或TAM单筛,可明显提高胃癌早期诊断灵敏度。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的流行病学研究

目的了解某院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的感染和医院环境中MRSA的污染情况,研究临床和相应环境标本中MRSA的同源性,寻找MRSA医院感染的传染源及传播途径。方法采用Vitek-2细菌鉴定系统鉴定金黄色葡萄球菌;以头孢西丁纸片琼脂扩散法和mecA基因聚合酶链反应（PCR）鉴定MRSA随机扩增多态性DNA（RAPD）技术进行同源性分析。结果临床标本分离的金黄色葡萄球菌中,MRSA占58．54％（24／41）;环境标本分离的金黄色葡萄球菌中,MRSA占38．10％（16／42）。MRSA菌株经RAPD扩增后均可见数量不等（4～6条）的条带,分型率达100％。经聚类分析,24株临床MRSA菌株分为4型,其中以RAPDⅠ型为主（14株）;16株环境MRSA菌株分为3型,亦以RAPDⅠ型为主（13株）。烧伤科与神经外科各有4例患者及其周围环境分离出同源菌。结论该院临床标本及医院环境标本中MRSA分离率较高,RAPDⅠ型MRSA为其主要流行株且存在RAPDⅠ型MRSA菌株克隆传播。外源性途径是MRSA医院感染的主要来源。     

某基层医院呼吸道感染者标本嗜血杆菌的分离与耐药情况

目的 了解某基层医院呼吸道感染患者嗜血杆菌的分离率、产酶率及耐药情况，以指导临床合理用药。方法对该院2005年8月-2007年9月收集的712份痰及咽拭子标本进行嗜血杆菌分离培养、鉴定，并以头孢硝噻吩纸片法进行伊内酰胺酶测定，采用K—B纸片扩散法进行药敏试验。结果共分离嗜血杆菌151株，其中流感嗜血杆菌43株（28．48％），副流感嗜血杆菌108株（71．52％）；检出β-内酰胺酶阳性菌株19株（12．58％），其中流感嗜血杆菌中检出6株（13．95％），副流感嗜血杆菌中检出13株（12．04％）。嗜血杆菌对氨苄西林、复方磺胺甲嚼唑、环丙沙星的耐药率分别为30．46％、77．48％、63．58％，对头孢呋辛、头孢噻肟耐药率仅为9．27％、5．96％。19株产酶菌对氨苄西林均耐药。结论该院呼吸道嗜血杆菌感染患者以感染副流感嗜血杆菌为主，临床治疗宜首选第二代与第三代头孢菌素及亚胺培南等药物。     

革兰阴性杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶调查研究（首次发现产blaCTX-M-14的斯氏普罗威登斯菌）

目的调查某院临床分离的革兰阴性（G^-）杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）株的流行情况，并确定其基因型。方法收集2004年10月--2005年7月临床标本分离的多重耐药G^-杆菌233株，按美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的方法进行ESBLs表型确证试验，聚合酶链反应（PCR）法对表型阳性株进一步进行CTX-M酶基因型的扩增，对PCR产物测序并确定其基因型。结果从大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌和斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M型ESBLs，首次从斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M-14型ESBLs。结论该地区多种G肠杆菌科细菌携带CTX-M型ESBLs，斯氏普罗威登斯菌也能产生CTX-M型ESBLs。     

临床分离革兰阴性杆菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶检测

目的了解临床标本分离的革兰阴性(G-)杆菌的耐药性及产金属β-内酰胺酶现状,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用MicroScan及TDR-100微生物鉴定系统,结合K-B纸片扩散法对分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定;采用双纸片协同法检测金属β-内酰胺酶。结果839株G-杆菌中,肠杆菌科细菌450株,非发酵菌389株。肠杆菌科以大肠埃希菌为主,占17.52%,其次为肺炎克雷伯菌,占11.80%;非发酵菌以铜绿假单胞菌为主,占24.43%,其次为鲍曼不动杆菌,占8.58%。肠杆菌科细菌对美罗培南耐药率为0~11.8%,而对美洛西林、头孢哌酮、氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲唑及庆大霉素耐药率达41.2%~91.3%;非发酵菌对头孢吡肟和美罗培南耐药率分别为0~20.0%以及0~30.0%,而对美洛西林、复方磺胺甲唑及庆大霉素耐药率达40.0%~93.3%。在耐头孢他啶和/或美罗培南的258株G-杆菌中,共检出17株(6.59%)金属β-内酰胺酶阳性菌,产该酶菌株对多种抗菌药物耐药。结论临床分离的G-杆菌耐药已十分严重,并出现产金属β-内酰胺酶菌株;应加强对细菌耐药性监测,防止耐药菌株播散,尤其是产金属β-内酰胺酶菌株感染的暴发。