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重症急性胰腺炎治疗中抗生素的合理应用 总被引:4,自引:2,他引:2
重症急性胰腺炎(SAP)是一种病情凶险、并发症多及死亡率高的常见急腹症。随着对急性胰腺炎基础理论的深入研究和临床诊治经验的积累,尤其是治疗药物的不断发展和重症监护水平的提高,SAP的早期死亡率已明显下降,但后期的胰腺和胰周感染及其并发症引起的死亡率仍高达50%以上,如何降低感染的发生已成为SAP治疗中的关键问题。 相似文献
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反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体联合转染对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞株QBC-939的增殖能力和细胞凋亡的影响。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将二者先后转染入QBC-939,经G418筛选和荧光细胞克隆挑选得到稳定转染细胞株,并用Western blot检测转染前后的蛋白表达变化;用MTT法和软琼脂克隆形成试验观察各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞生长周期及凋亡率的变化。结果Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,并以前者为甚;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1基因的细胞克隆形成率分别为(6.78±0.89)%和(14.86±2.13)%,明显低于未转染组;联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,细胞凋亡率从(1.63±0.27)%分别增加到(18.47±1.46)%和(6.19±0.78)%;在上述效应检测中,单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,能抑制胆管癌细胞的生长和增殖,并促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DNMT1反义基因;在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,二者通过甲基化途径对胆管癌的发生发挥作用。 相似文献
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p27kip1基因在人胆管癌细胞化疗增敏效应中的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨外源性p27^kip1在人胆管癌细胞系QBC939中高表达对胆管癌细胞化疗敏感性的影响。方法 通过携带人p27^kip1基因的重组腺病毒载体Ad-p27mt转染人胆管癌细胞系QBC939。经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测p27^kip1在胆管癌细胞中的表达;经MTT比色法及流式细胞术检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)、环磷酰胺(CTX)对转染p27^kip1前后的QBC939细胞生长抑制及凋亡的影响。结果 Ad-p27mt转染后5-FU、MMC和CTX对QBC939细胞生长抑制率,分别由转染前的41.89%、45.59%和38.91%显著增加为56.15%、55.65%和51.69%;凋亡率也由13.76%、11.76%和10.46%,明显升高为41.39%、35.94%、34.46%,差异均有显著性意义(均P〈0.05)。结论 p27^kip1在QBC939细胞中高表达,能显著增强胆管癌细胞对化疗药物的敏感性,为基因联合化疗药物治疗胆管癌提供了参考依据。 相似文献
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胆管癌是危害人类健康的恶性肿瘤,其发生发展是多因素、多步骤的病理过程,涉及癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞凋亡和细胞周期调控失常等多方面。但作为胆道的恶性肿瘤, 其具有独特的生物学特性,如神经浸润与转移、与肝炎病毒感染有关等。现综述其分子生物学特性,旨在进一步探讨胆管癌的发病机制,提高胆管癌诊治水平。 相似文献
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海藻酸钠-氯化钡微囊对大鼠胰岛体外胰岛素分泌功能的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 观察海藻酸钠 -氯化钡微囊对大鼠胰岛体外胰岛素分泌功能有无影响。方法 以海藻酸钠和氯化钡为材料 ,采用气体吹喷制囊法将新鲜分离纯化的大鼠胰岛制成微囊化胰岛 ,取空微囊、微囊化大鼠胰岛与未微囊化大鼠胰岛各 5 0 0只 ,分为 10份 ,置于培养板中培养 ,用放免法测定并比较第 2、4、6 d培养液中基础胰岛素浓度。结果 空微囊组第 2、4、6 d的基础胰岛素平均浓度均为 0 nm ol/ 1/ 5 0 ,微囊化大鼠胰岛组第 2、4、6 d的基础胰岛素平均浓度为 5 .179、5 .80 6、5 .5 5 8nm ol/ 1/5 0只 ,未微囊化大鼠胰岛组第 2、4、6 d的基础胰岛素平均浓度为 5 .4 4 1、6 .0 80、5 .4 6 8nmol/ 1/ 5 0只 ,后两者差异无显著性意义 (P>0 .0 5 )。结论 海藻酸钠 -氯化钡微囊对大鼠胰岛体外胰岛素分泌功能无影响 相似文献
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Objective: To observe the influence of connexin 43 (Cx43) on the bystander effect induced by cytosine deaminase (CD) and herpes simplex virus thymidine kinase (HSV-tk) coexpression suicide genes system in human cholangiocarcinoma QBC939 cells and transplantation tumors in nude mice. Methods: In vitro, the CD+tk+ and CD+tk+Cx+ cells were respectively treated with 5-fluorocytosine (5-Fc) and Ganciclovir (GCV). The cytotoxic effect was evaluated by MTT method. In order to investigate the influence of Cx43 on the bystander effect, the size of transplantation tumors of the CD+tk+ and CD+tk+Cx+ cells was measured before and after application of 5-Fc and GCV. Results: CD and tk genes were stably expressed in transfected QBC939 cells. The increased expression of Cx43 was determined by testing for the presence of Cx43 mRNA by RT-PCR and the presence of Cx43 protein by Western Blot in CD+tk+Cx+ cells. The killing effect of 5-Fc and GCV on CD+tk+Cx+ cells was more effective than that on CD+tk+ cells both in vitro and in vivo. Conclusion: Double suicide genes system CD/5-Fc+tk/GCV could induce remarkable killing effect on cholangiocarcinoma cells in vitro and transplantation tumors in vivo. The cotransfection of Cx43 gene could enhance the bystander effect and hence the inhibition of carcinoma cells. 相似文献
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目的 采用一步固化法制作用于胰岛移植的海藻酸钠 -氯化钡微囊 ,研究这种微囊的牢固度及生物相容性。方法 用海藻酸钠和氯化钡为材料 ,采用一步固化法制成微囊 ,观察这种微囊的形态和大小。将其置于生理盐水中 37℃孵育 2个月或置于生理盐水中 37℃、15 0r min水浴振荡1h ,观察微囊的破损率及形态改变。将 5 0 0 0个空微囊分别注射于 12只大鼠腹腔内 ,于 2、6、10周各取 4只大鼠处死后用生理盐水灌洗腹腔 ,将灌洗液离心后计算其中空微囊数并观察微囊的形态改变。结果 一步固化法制作的海藻酸钠 -氯化钡微囊在 37℃培养箱孵育 2个月后破损率为 10 % ;于 37℃、15 0r min水浴振荡 1h后破损率为 18% ;植入空微囊后第 2周每只大鼠可灌洗出空微囊约 30 0 0个 ,微囊均呈圆形 ,完整 ,无纤维化 ;6 - 10周每只大鼠可洗出空微囊约 10 0 0 - 15 0 0个 ,其中 10 % -15 %微囊变形或有裂口 ,部分微囊有明显纤维化。结论 一步固化法制作的海藻酸钠 -氯化钡微囊具有较好的牢固度及生物相容性 相似文献
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突变型p27kip1过表达对胆管癌细胞增殖及凋亡的影响 总被引:4,自引:4,他引:0
目的探讨外源性突变型p27^kip1高表达,对人源性胆管癌细胞增殖及凋亡的影响。方法通过携带人突变p27^kip1基因的重组腺病毒载体Ad-p27mt和重组腺病毒Ad-LacZ,转染人胆管癌细胞系QBC9。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印记,检测p27^kip1在胆管癌细胞系中mRNA和蛋白的表达水平;噻唑蓝(MIT)比色法、克隆形成试验及流式细胞术(PCM),检测p27^kip1过表达对胆管癌细胞生长抑制、细胞周期和凋亡的影响。结果Ad-p27mt能显著抑制胆管癌细胞的生长,诱导G0/G1期阻滞和细胞凋亡。结论携带人突变p27^kip1基因的重组腺病毒对QBC939细胞的增殖有明显的抑制作用,并诱导强烈的G1期阻滞和细胞凋亡,是胆管癌基因治疗的新途径。 相似文献
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目的:探讨反义MBD1基因真核表达载体转染对人胆管癌QBC 939细胞中MBD1基因表达的影响,为进一步研究该基因的作用提供依据。方法:构建反义MBD1基因真核表达载体,通过脂质体转染入人胆管癌细胞株QBC 939中,以G418进行筛选得到稳定转染细胞株,用PCR鉴定外源性neoR基因在转染细胞中的表达以确定转染成功。半定量RT PCR观察转染前后MBD1基因mRNA水平的变化,流式细胞术检测转染前后MBD1蛋白的变化。 结果:人胆管癌QBC 939细胞中MBD1基因的mRNA水平从0.912±0.022降低至0.215±0.017,转染前后的差异有显著性(P<0.01);MBD1蛋白水平从(80.19±5.05)%降低到(35.11±4.05)%,转染前后的差异有显著性(P<0.01)。 结论:反义MBD1基因转染能降低人胆管癌QBC 939细胞中MBD1基因的表达水平,提示MBD1基因在胆管癌的发生发展中具有重要作用,反义MBD1基因转染有可能成为胆管癌治疗的一种新方法。 相似文献
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