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骨髓间充质干细胞移植对豚鼠皮肤深Ⅱ度烧伤的治疗作用 总被引:8,自引:4,他引:8
目的探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)治疗皮肤深Ⅱ度烧伤的机制。方法体外培养扩增的MSCs悬液 ,以 2× 10 6/ml(A组 )和 2× 10 7/ml(B组 )两种细胞密度移植给皮肤深Ⅱ度烧的受体鼠创面 ,观察创面愈合速度 ,用免疫组织化学检测因子Ⅷ的表达。细胞移植后的第 15、3 0、5 0天 ,通过PCR方法检测创面皮肤组织中移植供体鼠的Y染色体基因表达。结果A、B组治疗侧的创面愈合速度均快于对照侧 ,A、B组治疗侧间无显著性差异。因子Ⅷ检测示第 15、3 0天时 ,A、B两组的微血管密度均多于对照侧 ,A、B组治疗侧间无显著性差异。PCR检测结果表明 ,第 15、3 0、5 0天时在部分受体鼠恢复的创面上有供体鼠Y染色体基因表达。结论骨髓MSCs对皮肤深Ⅱ度烧伤具有明显的疗效。 相似文献
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人骨髓造血基质干细胞体外增殖方法 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 :探讨使骨髓造血基质干细胞 ( HSSC)体外稳定增殖的方法。方法 :取开胸术剪下的人肋骨 (正常血象 ,非血液系统及恶性肿瘤病 ) ,常规制备骨髓细胞悬液 ,从胎牛血清及人 AB型血清中选择最佳血清 ,人 AB型血清浓度分别为 5 %、1 0 %、1 5 %、2 0 %、30 %、35 %、40 %。培养液分别为 RPMI1 640、DMEM、IMDM以选择最佳培养液。加入人重组碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)进行最佳浓度测定。培养物置 CO2 孵箱中培养 2周后行 HE染色 ,计数基质细胞集落数。结果 :选择出最佳培养体系为 30 %人 AB型血清、1μg· L-1 b FGF、Penicillin 1 0 0 KU· L-1 、Streptomycin5 0 KU· L-1 、氢化考的松 1 0 -6mol· L-1 和 IMDM培养液。结论 :选择最佳的培养体系可增加HSSC增殖数量 ,最宜体外培养时间 ( 1 4~ 2 1 d) ,最大限度增加回输时的 HSSC数量 ,使自体回输治疗急性白血病 ( AML)成为可能 相似文献
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为了减轻或避免骨髓移植受体发生移植物抗宿主反应(GVHR),深入揭示免疫嵌合体形成机制,我们开展了“辐射损伤小鼠造血重建免疫学影响的研究。本文主要观察了骨髓移植后各类造血细胞重建规律。结果表明,每根股骨骨髓细胞数和每脾细胞数均随照后时间后延而不断增加,二者间呈明显正相关关系;每根股骨内CFU—S、CFU—C、CFU—E含量则随照后时间延长呈指数增加。各类造血细胞重建过程中,CFU—S起步早、增殖速率快、CFU—E、BFU—E后照9天才开始再建。说明致死剂量照射机体仍具有调控造血重建能力,其程序为先促进CFU—S增殖机能,待干细胞池数目抵一定程度时,再增强其分化机能,从而,渐渐恢复正常造血过程。 相似文献
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目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSC)在造血损伤修复中的作用.方法 将同系小鼠股骨、骨壳、注入骨髓条的塑料管及经20 Gy γ-射线照射的股骨分别植入同一小鼠腹部皮下,观察1、2、3、4 w各移植物造血重建情况.观察髓腔内微循环结构与机能、组织学、分化不同阶段的造血细胞数目与机能等变化,以及骨皮质体外间充质干细胞(MSC)培养与扩增规律.结果 乏造血干细胞(HSC)的骨皮质异位移植完全可以造血重建,在移植后4 w,移植物已形成完整的封闭的具有正常造血组织的股骨,其重建的程序、速度与具有大量HSC的完整股骨移植的重建基本一致.而经射线破坏和注入塑料管内的骨髓条完全失去造血重建功能.结论 骨皮质可能是骨髓MSC的源泉,BM-MSC是造血重建的不可缺少的因素. 相似文献
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人转化生长因子β3的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:获取人转化生长因子β3的编码基因,开发抗衰老的皮肤药物。
方法:采用重叠PCR的方法,设计4对引物,进行4次PCR合成人转化生长因子β3的编码基
因。
结果:4次PCR后,经2%的琼脂糖凝胶电泳可见一357 bp的条带,将电泳产物回收,连接入pMD-18T载体,经测序分析证实,所获得DNA片段为人转化生长因子β3的编码基因。
结论:利用重叠PCR方法能够成功构建人转化生长因子β3的编码基因。 相似文献
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银杏叶提取物对糖尿病大鼠体内氧化应激的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的观察银杏叶提取物对糖尿病(DM)大鼠体内氧化应激水平的影响。方法利用Wistar大鼠建立糖尿病模型,将糖尿病大鼠分为糖尿病组(DM)和银杏叶治疗组(GBE),另设正常组动物为对照。DM组和正常对照组大鼠每日通过腹腔注射给予生理盐水0.83ml.kg-1,GBE组大鼠每日通过腹腔注射给予GBE0.83ml.kg-1,连续注射30天后取血测定各组大鼠血清中丙二醛(MDA)含量和超氧阴离子(O2-)水平,然后取出胰腺、肾脏测定MDA含量并采用免疫组化S-P法(链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶)检测肾脏蛋白激酶C(PKC)的表达。结果与正常对照组相比,DM组和GBE组大鼠血清、肾脏和胰腺中MDA的含量及血清中超氧阴离子(O2-)的水平显著升高(P0.05);GBE组大鼠血清、肾脏和胰腺中MDA的含量及超氧阴离子(O2-)的水平显著低于DM组(P0.05)。免疫组织化学染色结果表明,DM组PKC表达显著强于GBE组。结论银杏叶提取物可减轻糖尿病大鼠体内的氧化应激水平,具有抗氧化作用,对糖尿病并发症的发生发展具有一定的预防作用。 相似文献
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目的:观察不同剂量的X射线照射对体外培养的胎鼠皮肤间充质干细胞(MSCs)支持造血细胞增殖作用的影响,为提高造血干细胞体外扩增效率提供一种更为有效的方法,进而为造血干细胞移植提供一个新的途径。
方法:分别用不同剂量的X射线照射培养的胎鼠皮肤MSCs层,然后将骨髓细胞种植于该细胞层上,扩增后不同时间(0~12 d)进行骨髓CFU-GM集落培养,同时取经X射线照射的皮肤MSCs的上清液进行骨髓CFU-GM、CFU-E及BFU-E培养,观察射线对胎鼠皮肤MSCs造血支持作用的影响。
结果:6、8和10 Gy剂量X射线照射胎鼠皮肤MSCs与骨髓细胞共同作用7 d时,骨髓祖细胞集落显著增加,其中6 Gy组增加最为明显,CFU-GM是0 Gy组的2.17倍。6、8和10 Gy剂量X射线照射培养皮肤的上清液体外亦可刺激骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E的生长,与0 Gy组比较差异均有显著性(P<0.05)。其中6 Gy组增加最为明显,分别达0 Gy组的1.81倍、3.94倍和3.51倍,集落亦明显加大。
结论:一定剂量X射线照射胎鼠皮肤MSCs,其体外支持造血的作用增强,无论照射后的单纯MSCs细胞层还是上清液都可使骨髓细胞集落数增多。 相似文献
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小鼠脾基质细胞特性与功能研究 总被引:1,自引:0,他引:1
作者用体外液体单层和器官培养技术研究了小鼠脾基质细胞某些特性和功能。结果发现,大剂量照射后骨髓细胞与脾基质细胞混输组较单输BMC组受体CFU-S及CFU-F数明显增高(P<0.01);脾CFU-F的D0值为2.8Gy;低剂量照射后对基质细胞增殖有刺激效应;基质细胞周围可见有造血免疫细胞生长。 相似文献