天津地区环境样品中首次检出大肠杆菌O157:H7

肠出血性大肠杆菌是近年来新发现的可对人体健康产生严重危害的肠道致病菌，引起人腹泻、出血性肠炎、血栓性血小板减少性紫癜和溶血性尿毒综合征，在国外导致多起暴发流行，已成为威胁人类健康的重要公共卫生问题。EHEC O157：H7是一种以食物传播为主要传播途径的人兽共患疾病的病原菌，国内许多地方均已分离到，1999年江     

多重PCR检测霍乱弧菌RTX毒力基因

目的：探索建立一种快速、敏感的诊断方法，用于检测霍乱弧菌RTX毒力基因。方法：针对霍乱弧菌霍乱肠毒素A亚单位基因（ctxA）、RTX毒素家族的细胞毒素基因（rtxA）和毒素激活子基因（rtxC）分别设计3对引物，建立多重PCR方法；用Hep-2细胞测毒方法检测rtxA、rtxC阳性菌株毒素的表达。结果：所有183株临床和环境中分离的霍乱弧菌中，PCR和Hep-2细胞测毒法RTX毒素均为阳性，而古典生物型标准株（569B）二者均为阴性。结论：该方法快速、特异、敏感，具有较大的应用价值。     

A群脑膜炎奈瑟氏菌脂多糖抗原血清学分型的流行病学意义

从江西等省收集了A群脑膜炎奈瑟氏菌324株,应用我们所报道的分型方法可以将96.91%的菌株分成三个主要的脂多糖血清型。不同地区所收集的A群菌株脂多糖血清型的地区分布是不同的,病人与其密切接触者的菌株具有相同的脂多糖血清型,L₁₀型菌株的致病力较强,可以引起流脑流行。本文所述的分型方法操作简便,分型率高。因此,作者认为A群菌株脂多糖血清学分型具有一定的流行病学意义,此分型方法很适于流行病学调查。     

应用不确定度评估需氧菌计数平皿法的操作误差

目的：探讨需氧菌总数检测过程中平皿计数法的操作误差。方法：依据《中华人民共和国药典》2020年版四部通则 1105,定量检测样品中需氧菌总数,参照JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》中要求,通过评定需氧菌总数检测中平皿计数法的测量不确定度,讨论平皿计数的操作误差。结果：平皿法检测需氧菌总数结果对数值的A类评定的不确定度为0.029 73,平皿计数结果对数值B类评定不确定度为0.005 950,合成测量对数值不确定度为0.030 32,在95%的置信水平下, 平皿计数对数值的扩展不确定度为0.063 36。结论：通过需氧菌总数检测中平皿计数结果的测量不确定度的评定,可用于对平皿计数法的操作误差评估。     

薄膜过滤法和中和法联用在复方乳酸依沙吖啶软膏微生物限度检查中的应用研究

目的：建立了复方乳酸依沙吖啶软膏的微生物限度检查方法。方法： 根据《中国药典》2020 年版四部通则1105 和1106要求进行方法适用性验证试验。利用卵磷脂、聚山梨酯80的中和作用,采用薄膜过滤法和平皿法测定复方乳酸依沙吖啶软膏对金黄色葡萄球菌等5种试验菌种的回收率,并对金黄色葡萄球菌作为特定微生物的试验方法的适用性进行了验证。结果： 需氧菌总数计数采用薄膜过滤法（冲洗量700 mL）,霉菌和酵母菌总数计数采用平皿法,5 种试验菌的回收试验结果均在0.5～2.0之间,控制菌检查法采用薄膜过滤法（冲洗量700 mL）,控制菌方法可行。结论： 本实验所建立的方法适用于复方乳酸依沙吖啶软膏微生物限度检查。     

多重PCR检测霍乱弧菌的毒素相关基因

目的 探索建立一种快速、敏感地检测霍乱弧菌O1群、O139群、非O1／非O139群的毒素相关基因的方法。方法 针对霍乱弧菌霍乱肠毒素A亚单位基因(ctxA)、小带联结毒素基因(zot)、辅助霍乱肠毒素基因(oce)、霍乱弧菌毒素共调菌毛A基因(tcpA)、毒素表达调控蛋白基因(toxR)分别设计引物，建立多基因PCR方法；通过一次扩增反应之产物经琼脂糖凝胶电泳，可检测出菌株的毒素相关基因的携带情况。结果 阳性对照菌株：MO45(霍乱弧菌O139群)检出5种毒素相关基因，结果符合设计要求；其他不同来源的霍乱弧菌(O1群、O139群、非O1／非O139群)检出1—5种不等的毒素相关基因；根据毒素相关基因携带情况，可将菌株分为5个基因型，并可区分为产毒株和非产毒株；多重PCR敏感度可达10^2cfu／ml。结论 该方法快速、特异、敏感，具有较大的应用价值。     

我国部分城市腹泻病人隐孢子虫感染率的调查

隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是一种人畜共患寄生虫病,主要病原体为小球隐孢子虫(Cryptosporidium pavum).隐孢子虫主要寄生于宿主胃肠道内,卵囊随粪便排出体外,经粪-口途径传播.近年来,国外有很多关于因饮水导致大规模腹泻病爆发流行的报道,以1993年美国密尔沃基市40万人因饮用被隐孢子虫卵囊污染的自来水而导致腹泻的事件最著名[1],同时也引起了卫生学界对隐孢子虫病的高度重视.我国自1987年后也陆续有隐孢子虫病散发病例的报道[2～5].由于绝大多数医院缺乏诊断隐孢子虫病的方法和手段,很多病例被漏诊.本文对我国四城市夏秋季腹泻病人中隐孢子虫卵囊的感染率进行了调查,以便了解我国隐孢子虫病的发病情况,为防制该病提供流行病学依据.     

大肠菌群快检纸片质量鉴定标准研究

在卫生细菌学检测中,大肠菌群快速检测纸片(简称纸片法),因其操作简便、快捷、敏感、省料,结果易判断等特点,早已被西方发达国家所采用[1],我国从80年代开始研制[2],90年代已被广泛应用[3～4],并作为国家认可的方法列入国标GB14934-94[5].但目前国内尚无统一的大肠菌群检测纸片质量鉴定标准,因此对生产厂家及产品不能进行有效的质量监督,造成目前市售大肠菌群检测纸片质量良莠不齐,影响了卫生监督执法工作的准确有效,为此,我们对大肠菌群检测纸片的质量标准进行了较全面的研究.     

药品微生物经典分析方法的验证探讨

本文通过研读分析药品、食品和环境微生物分析方法验证的相关规范性文件,结合药品微生物分析实践,对药品微生物经典分析方法的验证进行了研究,总结了微生物分析方法验证的考察指标,包括专属性、灵敏度、精密度、检测限和定量限、线性、范围、耐用性及方法适用性等,并阐述了各指标在药品微生物分析中的含义、测量方法、影响因素和可接受标准。为规范经典微生物分析方法的验证,获得可靠的微生物检验结果及建立相关指导原则,提供了参考依据。     

产金属β-内酰胺酶IMP-4肺炎克雷伯菌调查分析

目的对1株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌(KPN)进行产金属β-内酰胺酶(MBLs)和产碳青霉烯酶(KPC)分析。方法 2010年4月2株KPN分别分离自天津市红桥医院1例住院患者的尿标本和痰标本,MIC法对分离菌株进行药物敏感试验,ESBLs确证试验检测其是否产ESBLs,PCR扩增blaI MP、blaVI M和KPC基因,扩增产物进行测序和分析。结果 2株KPN均为多药耐药菌,其中从尿中分离的KPN(HQU)对亚胺培南耐药,从痰中分离的KPN对亚胺培南敏感,均产ESBLs;从尿中分离的KPN携带MBLs基因blaI MP-4,且定位于质粒上;未检出blaVI M和KPC基因。结论产blaI MP-4型MBLs KPN的出现提示耐药性传播广泛,临床应加强耐药监测和严格药物使用。