AAV-hVEGF165及AAV-TGFβ1转染兔椎间盘纤维环细胞的实验研究

目的探讨应用hVEGF165与TGFβ1基因逆转椎间盘退变的可行性。方法用分子克隆技术，从pcDNA3（＋）-AAV-hVEGF165获得AAV-hVEGF165cDNA，并克隆至AAV包装质粒pSNAV上，构建成pSNAV-hVEGF165的AAV重组质粒。经酶切及测序鉴定后，用脂质体介导pSNAV-hVEG165转染HEK293细胞和血管内皮细胞。荧光免疫组化方法检测hVEGF165蛋白，并用MTT法测定hVEGF165对血管内皮细胞增殖的影响。由本元正阳公司对pSNAV-hVEGF165进行AAV-hVEGF165包装。AAV-hVEGF165与AAV-TGFβ1联合转染退变的椎间盘纤维环细胞，Western blot检测hVEGF165与TGFβ1的表达以及纤维环细胞Ⅰ型胶原表达量的变化。结果经酶切鉴定及基因测序证实AAV包装质粒pSNAV-hVEGF165构建完成，荧光免疫组化显示hVEGF165蛋白表达，MTT法显示hVEGF165蛋白对血管内皮细胞增殖有促进作用。本元正阳公司包装出具有生物学功能的AAV-hVEGF165与AAV-hVEGF165构建成功。Western blot显示hVEGF165与TGFβ1在纤维环细胞中表达，AAV-hVEGF165与AAV-TGFβ1双基因联合转染的纤维环细胞Ⅰ型胶原表达量较hVEGF165与TGFβ1基因各自单独转染的细胞Ⅰ型胶原表达量明显增多。结论hVEGF165在体外能够协同TGFβ1促进退变纤维环细胞Ⅰ型胶原表达增加。     

CD80mAb协同imDC诱导同种异体大鼠胰十二指肠移植免疫耐受

目的 观察共刺激分子阻断剂CD80单克隆抗体（CD80mAb）在协同未成熟树突细胞（imDC）诱导同种异体大鼠胰十二指肠移植免疫耐受中的作用。方法 建立糖尿病大鼠胰十二指肠移植动物模型；4E5杂交瘤细胞株BABIMC小鼠腹腔注射，抽取腹水，分离纯化后获得CD80mAb；分离供体大鼠骨髓来源DC细胞前体，经GM—CSF、IL-4体外刺激后。再加入IL-10共培养，鉴定为imDC；移植前7d，将2×10^6imDC经静脉途径注射至受体体内，同时分别给予生理盐水1ml、CD80mAb5mg连续14d。结果 四组受体大鼠移植后中位生存时间分别为12．7d、32．4d、50．2d、92．0d，实验组存活时间明显延长；组织学观察发现移植后7dCD80mAb＋imDC组移植物形态尚完整，淋巴细胞浸润减少；混合淋巴细胞反应证实移植后7dCD80mAb＋imDC组供受体间呈低反应性。结论 共刺激分子阻断剂CD80mAb能够协同imDC诱导受体T细胞对移植物的免疫耐受，降低宿主对移植物的急、慢性排斥反应，延长移植物的存活时间。     

群体药代动力学在儿科临床药理学研究中的应用

儿童是一特殊人群，他们的各种生理指标与成人有很大的不同。但在临床实践中，人们往往是参照成人剂量来指导儿童的用药，这严重的威胁着儿童的身体健康，个体化给药方案的建立刻不容缓。在这一方面，群体药代动力学是其强有力的工具。     

RNA干扰技术在以VEGF/VEGFR为靶点的膀胱癌治疗研究中的应用前景

RNA干扰（RNAi）是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象，它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA（dsRNA），该mRNA发生降解而导致基因沉默的现象。利用RNAi技术干涉VEGF表达，达到抑制肿瘤发展和转移的研究已较为广泛。膀胱癌生长、转移不仅有VEGF表达增多，同时发现VEGFR表达亦增高，成为RNAi的新靶点。现主要综述以VEGF/VEGFR为靶点的RNAi技术在膀胱癌治疗研究中的优势、发展前景以及存在问题与对策。     

获得性免疫缺陷综合征（AIDS）合并播散性弓形虫病尸检的病理学研究

报道美国纽约地区９例播散性弓形虫病尸检材料，均有脑部病变，８例累及心脏，４例累及肺脏，尚见胰腺、消化道、甲状腺、淋巴结、泌尿生殖器官等受累。其中弓形虫性脑炎９例，心肌炎４例，肺炎３例，胰腺炎２例。仅脑炎、肺炎产牛症状，经脑ＣＴ扫描、弓形虫抗体测定提示本病，并经涂片、骨髓活检和尸检证实，以查见弓形虫为依据。临床以神经精神症状和肺部感染症状为主。病变分为静止（潜伏）、组织坏死、炎症反应及增生修复四种状态，强调囊型弓形虫形态学识别的诊断意义。     

膀胱移行细胞癌PCNA的表达及其意义

目的 :探讨膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达与肿瘤病理分级、临床分期、预后的关系。方法 :采用免疫组化S P法检测 6 5例膀胱移行细胞癌和 11例正常膀胱组织PCNA的表达。结果 :PCNA在膀胱癌及正常膀胱组织的表达差异有显著性 (P <0 .0 1) ;随着膀胱癌病理分级、临床分期升高 ,PCNA阳性表达上升 ,Ⅰ级、Ⅱ级与Ⅲ级比较 ,PCNA的阳性表达差异均有显著性 (P <0 .0 1) ;T2 ～T4 期PCNA的阳性表达显著高于Tis～T1期 (P <0 .0 0 5 ) ;术后 5年内无复发组PCNA的阳性表达显著低于术后 5年内复发组 (P <0 .0 0 5 )。结论 :PCNA可作为膀胱癌恶性程度及预后判断的指标之一 ,可指导临床综合治疗     

医学生抑郁、焦虑症状的流行学特征及相关因素分析

目的分析医学生抑郁、焦虑情绪症状及其相关的心理社会因素,为大学生心理疾病防治和健康教育工作提供依据。方法分层整群抽取某医科大学本科生509名进行抑郁、焦虑情绪的流行特征及其相关因素调查分析。结果医学生抑郁、焦虑情绪症状检出率为22.40%和9.03%。不同年级学生的自评抑郁量表(SDS)、自评焦虑量表(SAS)得分差异有统计学意义,抑郁、焦虑情绪症状与医科大学生的人格特征、特质应对方式、领悟社会支持、生活事件、对专业满意程度和就业前景评价有高度相关性。结论应该对医科大学生采取有针对性的健康教育措施,倡导应用积极的应对方式,提高适应环境能力,以防止或降低抑郁、焦虑情绪的发生。     

我国居民看电视时间的分析

目的了解我国居民看电视的现状,为制定干预措施提供基础资料。方法使用2002年中国居民营养与健康状况调查数据,对我国6岁及以上居民66601人(男性32254人,女性34347人)的看电视情况进行分析。结果92.1%的居民看电视,城市居民(94.3%)看电视的比例高于农村(91.2%),男性(93.0%)高于女性(91.2%),18~59.9岁居民高于其他年龄组居民。居民平均每星期看电视的时间是2.1小时,其中城市(2.3小时)高于农村(2.0小时),18岁及以上居民高于18岁以下居民,男女间差别不大。平均每天看电视时间小于1小时、1~2小时、2~3小时、3小时及以上的居民所占比例依次为13.9%、25.5%、34.6%和26.0%。结论我国6岁以上居民绝大多数看电视,看电视时间2小时及以上的居民所占比例比较高,不同年龄、性别、城乡居民看电视时间存在差异。     

小儿支气管哮喘与NO及cGMP关系的初探

目的 探讨小儿哮喘与一氧化氮NO、cGMP的作用机制及临床意义。方法 哮喘患儿47例，正常健康儿童34例为对照组。测定NO水平及cGMP水平，并对测定结果进行统计学分析。结果 所有哮喘患儿血浆NO及cGMP水平在治疗前均明显高于正常儿童（P〈0．001），其中11例重度哮喘患儿血浆NO水平较36例轻中度哮喘患儿更高（P〈0．001）；治疗后血浆NO及cGMP水平均恢复正常。结论 哮喘发作时一氧化氮产生过多，发挥其细胞及组织毒性作用，使肺上皮细胞等损伤，从而引起和加重哮喘发病，且血浆NO水平与哮喘病情密切相关。     

一个细胞融合实验体系的建立及初步应用

目的建立-个细胞融合实验体系，观察凝血酶（thrombin，Th）对I型人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus type I，HIV-1）包膜糖蛋白（envelope glycoproteins，Env）介导的细胞融合的影响。方法采用携带HIV-1 JRFL 株env基因的表达质粒pSV—Ⅲ-JRFL—dCT与携带HIV-1tat基因的表达质粒pcTat共转染293T细胞，检测到细胞膜表面Env表达后，将pSV—Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat分别按1：2、2：3、1：1、2：1、5：1、10：1共转染293T细胞，然后再与Magic5A细胞进行融合实验，计数融合细胞数目并确定最适宜的融合条件，建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。在所建立融合体系基础上利用Th处理Env表达细胞。观察对融合作用的影响。结果pSV—Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat按1：1、2：1共转染293T细胞，可建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。Th能够增强细胞融合，且融合细胞数随着Th浓度增高而逐渐增加。Th处理10min与处理30min比较，融合增强作用更加显著。结论质粒pSV—Ⅲ-JRFL—dCT与pcTat按1：1、2：1共转染293T细胞，与MagieSA细胞进行融合实验可得到稳定的细胞-细胞融合实验体系，111对HIV-1包膜介导的细胞融合有促进作用。