基于恐伤肾的阿尔茨海默病肾虚证大鼠模型的建立与评价

目的构建和评价D-半乳糖和三氯化铝结合夹尾(恐吓)建立阿尔茨海默病肾虚证病证结合大鼠模型。方法随机将48只SD大鼠分为对照组、模型组、夹尾组和肾气丸组,每组12只。对照组给予0.9%NaCl溶液灌胃,其余组均采用D-半乳糖及三氯化铝造模,持续8周;夹尾组和肾气丸组从第5周开始,在造模的同时用夹尾(恐吓)法建立肾虚证病证结合模型,肾气丸组同时给予金匮肾气丸10 g/kg灌胃。每2周观察记录1次大鼠的症状、体征变化,第8周末进行水迷宫测试。测试结束后,腹主动脉采血,离心收集血清检测下丘脑-垂体系统生化指标。取大鼠大脑,用HE染色和免疫荧光组化法对大脑的海马组织进行检测。结果夹尾组表现为精神亢奋、躁动,大便色黑干硬,毛色发暗枯槁等,造模第6周和第8周症状、体征量化评分均明显高于其他组(P均0.05);对照组、模型组症状、体征相似,实验过程中各时间点量化评分比较差异均无统计学意义(P均0.05)。水迷宫测试显示模型组、夹尾组、肾气丸组与对照组相比潜伏期均明显延长(P均0.05),穿越平台次数明显减少(P均0.05),而夹尾组比模型组出现较早。海马组织HE染色和免疫荧光组化显示模型组、夹尾组比对照组出现较多神经元细胞死亡和CHAT阳性神经元减少,而夹尾组较为严重,肾气丸组则有改善。下丘脑-垂体-肾上腺轴生化指标血清皮质醇水平模型组明显高于对照组、夹尾组、肾气丸组(P均0.05),夹尾组明显低于肾气丸组和对照组(P均0.05),肾气丸组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论大鼠经D-半乳糖和三氯化铝结合夹尾(恐吓)建立阿尔茨海默病肾虚证是比较理想病证结合模型,可能皮质醇下降是阿尔茨海默病肾虚证证候客观化评价指标之一。     

树鼩实验室规范化繁育研究初报

目的探讨树鼩最佳养殖环境及条件。方法详细记载实验室养殖树鼩的体重变化,饲养环境,分笼时间,受孕,分娩等情况,比较分析其最佳的养殖条件。结果通过各种饲养条件的比较,如繁育种树鼩的选择,条件的选择,饲养方式的优化,垫料的选择及饮食的标准化等,均有助于改善树鼩的养殖状态。结论实验室环境内,通过条件优化,近距离观察树鼩有助于树鼩品系的优化改良。     

大鼠骨髓间充质干细胞培养鉴定及复方扶芳藤合剂含药血清对细胞增殖的影响

目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法,观察不同浓度的复方扶芳藤合剂大鼠含药血清对大鼠BMSCs增殖的影响。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化BMSCs,对其进行细胞形态学观察,将BMSCs进行成骨、成脂定向诱导分化,采用流式细胞仪检测其表面标志物,分析其细胞周期,进行BMSCs鉴定;采用不同浓度(20%、10%和5%)的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续7 d对大鼠BM SCs进行干预,以CCK-8法检测其吸光度值,对比各组细胞生长情况。结果:BMSCs具有典型的成纤维样细胞形态,集落生长呈漩涡状。BMSCs成脂、成骨诱导后,油红O染色和茜素红染色均呈阳性。第3代BMSCs表型CD29、CD44、CD34、CD44表达分别为99.645%、99.677%、0.016%、0.133%;不同浓度的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续干预7 d后,CCK-8法检测显示:20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清组,其1~7 d的吸光度均值均高于20%浓度的空白血清组(P<0.05);10%的含药血清组的吸光度均值在3~7 d,高于10%的空白血清组(P<0.05);5%的含药血清组与5%的空白血清组比较无明显差异(P>0.05)。结论:全骨髓贴壁法分离、培养BM SCs,操作简单,方法稳定,可大量扩增BMSCs。扩增后的BMSCs具有间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。复方扶芳藤合剂含药血清干预后的BMSCs增殖能力增强,其中20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清在本实验中为最佳干预浓度。     

提高实验动物学教学质量的几个问题探讨

实验动物是医学、生命科学研究的基础和重要支撑条件。在现代科学带动下，实验动物已发展成为一门综合性的新兴学科，其发展程度是反映一个国家生命科学发展水平的重要标志。有些医学院校开设《实验动物学》课程已有十多年的历史，我院于2002年开始给硕士研究生开设该课程，教学时数为30课时，教材用邹移海教授等编著的《中医实验动物学》教材，至今有三年多的历史。笔者在几年教学过程中体会到，要提高实验动物学教学质量，应重点考虑以下几个问题：     

中药健耳Ⅱ号胶囊对抗C57BL/6J小鼠老年性耳蜗损害的实验研究

目的 观察中药健耳Ⅱ号胶囊是否对C57小鼠老年性耳蜗损害具有保护作用。方法 选择刚出生的C57BL／6J小鼠40只，随机平均分为对照组、中药组各20只，其中对照组小鼠为常规饲料喂养，分别在出生后2．4和7个月终止实验；中药组小鼠常规饲料喂养至出生后2个月时开始饮用健耳Ⅱ号胶囊溶液以代替日常饮水，至7月龄时终止实验。取出小鼠耳蜗分别制成耳蜗铺片和耳蜗切片，在光学显微镜下定量观察并比较两组小鼠耳蜗毛细胞的密度和疆孔内的神经纤维数量以及螺旋神经节密度。结果 对照组C57BL／6J小鼠随着月龄的递增出现耳蜗毛细胞损伤加重的趋势，且这种随着年龄增长而发生的耳蜗损害遵循着从底回逐渐向顶回发展的规律，外毛细胞的损害比同区域的内毛细胞严重。7月龄对照组动物的耳蜗毛细胞损害范围比较广泛，底回螺旋神经节细胞数量明显减少，存活神经元细胞亦呈现异常的形态学改变，同时疆孔内的神经纤维数量也有所减少。但在中药组小鼠，无论是耳蜗毛细胞的数量还是疆孔内的神经纤维数量，以及蜗轴螺旋管内的螺旋神经节细胞密度均比对照组动物的损害轻。经统计学分析，两组动物耳蜗底回的螺旋神经节细胞密度和底回疆孔内的神经纤维数量差异均有统计学意义（P〈0．001，P〈0．05）。结论 ①C57BL／6J小鼠在出生后4个月即开始发生耳蜗进行性损害，可作为研究老年性聋的理想动物模型；②鉴于在老年性耳蜗损害的早期可见毛细胞和螺旋神经节均有损害，提示老年性耳蜗损害可能是同时发生在听觉神经元；③中药健耳Ⅱ号胶囊不但可以延缓C57BL／6J小鼠随着年龄增长而发生的耳蜗毛细胞损坏，而且对于听觉神经元和听神经纤维也具有一定的保护作用。     

浅谈实验动物学科的建设

实验动物学是一门研究实验动物和动物实验的学科,是一门新兴的、综合性、应用性学科,是生命科学的基础和支撑条件。实验动物学一方面作为生命科学研究的重要手段,直接影响着生命科学许多领域研究课题成果的确立和水平的高低;另一方面,作为一门学科,它的发展和提高,又会把生命科     

乳腺康对乳腺小叶增生大鼠治疗效果的实验研究

目的 :探讨中药乳腺康对乳腺小叶增生大鼠乳腺组织及性激素的影响。方法 :采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮肌注30天造模 ,分正常对照组与模型组 (喂以白开水 ) ,三苯氧氨组[2mg·(100g·d)-1]和乳腺康组[1.44g·(100g·d)-1] ,以20天为一个疗程,观察3个疗程,结束后测定各组大鼠乳头直径变化,血清雌激素(E2) ,孕激素(P) ,E2/P及睾酮(T)指标,并观察大鼠第二对乳房组织病理切片变化。结果:经中药乳腺康治疗后大鼠乳头直径、乳腺缩小(P<0.01);血清雌激素水平显著增高(P<0.05);能降低大鼠血清孕激素(P<0.05),睾酮含量明显降低(P<0.01);光镜下乳腺小叶数目、小叶腺泡数明显减少 ,腔内分泌物减少。结论:乳腺康对雌激素引起大鼠乳腺增生病有较好的疗效。     

加强医学院校学生实验动物福利意识的思考

医药院校是培养未来医药学人才的机构,利用实验动物进行教学实践是常用的一种手段.实验动物学是以实验动物为主要研究对象,并将培育的实验动物应用于生命科学等研究的一门综合性学科.许多医学学科的发展都与实验动物学有着密不可分的内在关联.     

加强实验动物工作 切实为教学和科研服务

中医药学是中华民族的伟大宝库 ,是我国医药卫生事业的重要组成部分。保持和发扬传统中医药 ,实现中医药现代化 ,是历史赋予我们中医药院校的重要责任。实验动物科学是一门新兴的学科 ,是伴随生命科学的发展而发展起来的新的领域 ,实验动物是生命科学的基础和重要的支撑条件 ,实验动物的标准化程度直接影响生命科学中研究成果的确立、研究水平的高低和研究产品的质量。现今 ,高精尖的仪器设备、高纯度试剂、科技信息已成为中医药教学科研的重要组成 ,利用标准化实验动物和模型开展中医药教学科研是中医药现代化的有效途径。因此 ,加强实验动…     

高脂血症大鼠肝肾阴虚证动物模型实验研究

[目的]建立一种可操作性、重复性好的高脂血症大鼠肝肾阴虚证动物模型。[方法]将24只SD大鼠分为模型组和正常组,模型组12只予以高脂饮食及长期激怒,模拟高脂血症及中医肝肾阴虚证的病因,复制高脂血症大鼠肝肾阴虚证动物模型。[结果]模型组大鼠出现明显消瘦、活动减少、竖毛少泽、食欲减少、弓背、扎堆等现象,生化检测结果TC（总胆固醇）、TG（甘油三酯）、LDL-C（低密度脂蛋白-胆固醇）显著升高;血浆cAMP（环腺苷酸）含量升高,E2（雌二醇）、E2/T比值显著升高。[结论]高脂饮食配合长期激怒,可使大鼠的症状、实验室指标均能体现所模拟的高脂血症肝肾阴虚证模型,符合临床实际,可将该方法作为中医高脂血症肝肾阴虚证动物模型的制作方案。