在头戴式放大镜直视下小鼠气管插管方法的建立

目的建立并评价一种新的小鼠气管插管方法。方法30只NIH小鼠分设A、B、C组(n=10),麻醉后特殊体位固定,在头戴式放大镜直视下施行气管插管。A组小鼠经套管注射美蓝,死后解剖判断插管成功与否;B组插管后即拔管,隔天1次,连续2周。C组仅麻醉但不插管,方法同B组。在实验的最后1天,B、C组小鼠的处理同A组。结果所有小鼠死后解剖可见气管下端至肺部均有蓝色物质浸染,插管成功率为100%,B组小鼠经多次插管操作仍能健康存活,与C组比较未发现生长迟缓、体重明显减低等情况。结论我们建立的小鼠气管插管方法操作简单、易学、可重复性强,值得推广。     

胃癌细胞株SGC-7901诱导凋亡过程中细胞外RNA测定

目的: 研究胃癌细胞株SGC-7901细胞外RNA稳定性,探讨细胞外RNA来源.方法: 将胃癌细胞株SGC-7901分为正常培养组、过氧化氢(H2O2)诱导坏死组和地塞米松(DEX)诱导凋亡组,巢式PCR测定各组不同时间点细胞上清液中RNA含量;应用RNA酶等处理上述细胞上清液,观察每组释放到细胞外RNA的稳定性.结果: 正常培养组细胞外RNA在30 min即可被检测到,随后逐渐增加,8 h后维持稳定;诱导坏死组和凋亡组在4 h之后细胞外RNA的量均有明显的增加,12 h后在高水平维持稳定.细胞凋亡组细胞外RNA有很强的稳定性,正常培养组和坏死组细胞外RNA则容易降解.结论: 凋亡细胞释放的RNA有着特殊的稳定性,可能是被检测到的血液中RNA的主要来源.     

中西医结合远程康复指导稳定型慢性阻塞性肺疾病患者疗效观察

目的 评估中西医结合远程康复指导稳定型慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的疗效。方法 COPD患者210例,随机分为两组。对照组:仅药物治疗;观察组:采用药物治疗结合远程指导中西医康复方案。采用健身气功八段锦为基础的有氧训练结合肌肉放松训练、咳嗽和呼吸训练。5次/周,20～30 min/次。由治疗师远程指导实施,治疗持续12周。第4、12周各评估1次。结果 治疗4周后,观察组改良Bathel指数评分与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)、治疗12周后观察组6 min步行试验距离、改良Bathel指数评分、心理异常患者数量、圣·乔治呼吸生活质量调查问卷(SGRQ)评分与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 以远程指导为方式,以八段锦结合有氧、咳嗽和呼吸训练等中西医结合康复治疗,稳定型COPD患者在生理、心理、日常生活生活能力及生活质量方面得到提高。     

紫杉醇诱导周围神经病变的作用机制研究进展及中医辨治探讨

[目的]分析近10年来紫杉醇诱导周围神经病变(paclitaxel-induced peripheral neuropathy,PIPN)的作用机制,简述相关药物研究并进行中医辨治探讨。[方法]以“紫杉醇”“周围神经病变”为关键字,检索Pubmed、中国知网(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)、Springer及万方数据库,筛选近10年来的中外文献,选出与主题高度契合的文章,简述PIPN的主要临床表现,PIPN的神经、细胞改变,简析与PIPN相关的炎症氧化过程、细胞信号转导异常、神经递质改变以及相关细胞的核转录异常,同时简述相应的药物研究,并在此基础上探讨中医辨治PIPN的可行性和优越性。[结果]共有133篇文献入选,与本文主题高度契合。PIPN的临床表现主要是双手和双足麻木疼痛、灼热感,病理表现主要为神经纤维变形、神经胶质细胞增多及线粒体功能障碍;诱发免疫应答和氧化应激,导致外周循环中的细胞因子及活性氧增加。紫杉醇主要通过以下方式诱发炎症氧化及相关的神经细胞改变:导致环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)通路、大麻素受体(cannabinoid receptor,CB)、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶点(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B-mammalian target of rapamycin,PI3K-AKT-mTOR)通路、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)通路、N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体、静息电位、瞬时电流、钠离子通道、钾离子通道、钙离子通道、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)及核因子红细胞2相关因子2-抗氧化反应元件(nuclear factor erythroid 2 related factor 2-antioxidant response element,Nrf2-ARE)通路等信号通路的转导异常;影响神经递质γ-氨基丁酸、神经生长因子、饥饿素、雌激素的浓度。针对上述机制,相关的药物研究主要集中在阿片类药物、抗惊厥药物、抗氧化剂及相应的信号通道抑制剂上。从中医角度来说,PIPN属于“痹症”“不仁”范畴,其病因病机为正气虚衰,加之外邪侵袭,使皮毛肌肉经络失于濡养和(或)气血运行受阻,治疗应以温阳通经、益气活血为大法。[结论]紫杉醇通过多种生化过程引起PIPN,本研究为西药靶向治疗PIPN提供理论依据,也为中医药辨治PIPN提供理论证明。     

一种新的香烟烟雾暴露装置的建立

目的建立一种新的香烟烟雾暴露装置,并构建COPD模型以检测该装置的有效性。方法 40只C57BL/6小鼠随机分为①对照组10只,饲养3个月;②模型组30只,分设3组,分别予以香烟烟雾暴露1、2、3个月。取支气管肺组织,HE染色后观察病理变化。结果随着烟雾暴露时间的延长,模型组小鼠的肺组织逐渐出现典型的COPD病理改变。结论该装置适用于大、小鼠COPD模型的构建。     

小鼠肺微血管内皮细胞的培养鉴定及其血管形成功能的研究

目的: 建立一种简单有效的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)原代培养方法,并对其体外血管形成功能进行研究。方法: 取小于1周龄的C57BL/6小鼠的肺组织边缘,采用组织贴块法培养原代PMVECs。经形态学观察、免疫细胞化学鉴定后,以每孔2×10⁴的密度接种于铺有基质胶的96孔细胞板,在倒置显微镜下观察(2 h 1次)其24 h 体外血管形成过程。结果: 镜下可见原代培养的PMVECs呈梭形或多角形,单层融合呈铺路石样。细胞抗Ⅷ因子相关抗原(ⅧF-Ag)染色阳性。免疫荧光显微镜下可见大部分细胞摄取四甲基吲哚碳花青标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL),胞质呈现红色荧光,细胞膜表面与异硫氰酸荧光素标记的异植物血凝素(FITC-BSI)结合,呈现黄绿色荧光。PMVECs接种4~6 h后出现明显的管腔结构,10~12 h呈蜂窝状结构,此后管腔结构逐渐减少。结论: 组织贴块法培养原代PMVECs操作简单,细胞得率和纯度高,并可在体外成功建立血管形成模型进行相关研究。