沉默RRM1可逆转乳腺癌细胞MCF-7/R对紫杉醇的耐药性

目的阐明沉默核苷酸还原酶M1亚基（RRM1）对乳腺癌耐药细胞MCF-7/R逆转耐药的作用。方法通过高浓度紫杉醇诱 导耐药株MCF-7/R;运用Kaplan-Meier Plotter绘制RRM1基因的生存曲线;通过siRNA沉默MCF-7/R细胞中RRM1基因表达, 并用Western blot 和qRT-PCR方法检测蛋白和基因水平的表达,筛选出高效特异的si-RRM1 序列;将该si-RRM1 序列转染 MCF-7/R细胞,筛选得到能稳定抑制RRM1基因表达的细胞株MCF-7/R/siRNA;四甲基偶氮唑盐（MTT）法和5-乙炔基-2’脱氧 尿嘧啶核苷（EdU）染色法检测RRM1沉默后MCF-7/R细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡,并观察周期、凋 亡相关蛋白的变化;构建裸鼠皮下移植瘤模型,观察沉默RRM1后给予紫杉醇治疗对裸鼠体内抑瘤效果的影响。结果生存曲 线分析显示RRM1基因表达与乳腺癌患者的生存率呈负相关（P=0.000）;MCF-7/R细胞中证实RRM1蛋白和mRNA表达水平 较MCF-7细胞均显著升高（P<0.01）;si-RRM1序列筛选中,转染si-RRM1-04组细胞的RRM1蛋白和mRNA表达量降低最为显 著（P<0.001）;沉默RRM1后,MCF-7/R细胞对紫杉醇的敏感性显著增加,细胞晚期凋亡比例明显升高（P<0.001）,同时降低Akt 蛋白的磷酸化并抑制凋亡蛋白Bcl-2 的表达,促进p53 蛋白表达水平的增加（P<0.001）;裸鼠实验显示,与si-NC组相比,沉默 RRM1后给予紫杉醇治疗可显著抑制裸鼠体内肿瘤的生长（P<0.001）。结论沉默RRM1可通过诱导细胞凋亡增加提高MCF- 7/R细胞化疗敏感性,逆转乳腺癌紫杉醇化疗耐药。     

西藏胡黄连醇提物对动脉粥样硬化小鼠主动脉PPARγ和PON1表达的影响

目的观察西藏胡黄连醇提物(ethanol extraction of Picrorhiza scrophulariiflora,EPS)对apoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的干预机制。方法将30只apoE~(-/-)小鼠随机分为对照组,模型组,EPS低、中、高剂量组和辛伐他汀组,每组5只。分别给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予等体积的蒸馏水,连续灌胃12周。超声和病理切片观察各组主动脉中的斑块形成情况,试剂盒检测血清生化指标,蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应检测PPARγ和PON1的表达。结果与模型组比较,EPS和辛伐他汀组可以显著减少动脉粥样硬化斑块的形成,降低血清TC,LDL-C,TNF-α,IL-6,MCP-1,MDA水平(P0.05,P0.01,P0.001),显著升高GSH-Px,SOD活性(P0.01,P0.001),增加主动脉中PPARγ和PON1的表达显(P0.001)。结论西藏胡黄连具有改善动脉粥样硬化的功能,其机制可能与上调动脉壁中PPARγ和PON1的表达有关。