广州家禽、家畜批发市场六种动物隐孢子虫感染情况的调查

目的调查广州家禽、家畜批发市场兔、鸭(含雏鸭)、羊、鸡、狗、鸽6种动物的隐孢子虫感染情况。方法取上述动物的粪便292份，用金胺-酚-改良抗酸复染法染色，镜检卵囊。结果检查的6种动物均发现有隐孢子虫感染，自然感染率分别为：64．1％，54．3％(45．0％)，21．7％，20．6％，20．0％，14．6％。结论广州家禽、家畜批发市场6种动物存在隐孢子虫感染。     

恶性疟原虫红内期p41—3基因的扩增及克隆

目的 构建恶性疟原虫海南(FCCl／HN)株p4l-3基因真核表达重组质粒pcDNA3-p4l～3。方法 根据p4l-3基因已知序列设计合成2对引物,用PCR技术从FCCl／HN株基因组DNA中扩增p41—3基因;将p4l一3基因定向克隆入真核表达栽体pcDNA3,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞;用酶切,PCR扩增鉴定筛选到的重组质粒阳性克隆。结果 从恶性疟原虫：FCCl／HN株基因组DNA中获取p41—3基因,酶切,PCR扩增鉴定表明获得正确的pcDNA3-p41—3重组质粒。结论 成功构建了真核表达重组质粒pcDNA3-p41—3,为在真核细胞中表达p41—3蛋白,并研究其功能奠定基础。     

湛江市遂溪县曲水村人体寄生虫分布与危害调查

目的了解广东省湛江市遂溪县洋青镇曲水村人体寄生虫病流行与危害情况。方法采用生理盐水直接涂片法、饱和盐水浮聚法、改良加藤厚涂片法和试管滤纸钩蚴培养法检查人体寄生虫感染情况。采用询问登记、填写调查表方式,了解寄生虫病的危害情况。解剖检查褐家鼠、福寿螺广州管圆线虫感染情况。结果检出钩虫、蛔虫、鞭虫、蛲虫和粗脚粉螨5种寄生虫,总感染率为10.75%。钩虫感染率为6.07%,蛔虫和鞭虫均为1.87%,蛲虫和粗脚粉螨均为0.47%。感染率男性高于女性,与职业和年龄分布无关。感染度多以轻度为主。钩虫感染者钩蚴性皮炎发生率为69.23%,虫种为美洲钩虫。鼠类、褐云玛瑙螺和福寿螺广州管圆线虫感染率分别为16.66%,13.04%和10.00%。结论遂溪县曲水村分布虫种主要为线虫,以钩虫为主;为广州管圆线虫病的自然疫源地。     

淮河水系尾蚴性皮炎流行的初步调查

为探讨淮河水系沿岸村镇居民中有无尾蚴性皮炎流行,采用现场查询和体检,以确定有无该皮炎表现及伴随症状;现场采集耳萝卜螺用直接压片法分离尾蚴,感染雏鸭;采集河岸渔场渔民养殖家鸭的粪便,分别用水洗沉淀法分离虫卵和用毛蚴孵化法分离毛蚴,感染实验室养殖的耳萝卜螺;解剖购于当地渔民放养的家鸭及人工感染的雏鸭分离成虫。结果表明,沿岸农户及渔民接触有鸭活动的水体后,于胸腹部及下肢等处皮肤可见弥漫性红色丘疹,周围有红晕。并可见成片风疹团,患处刺痒或奇痒。从现场捕获的耳萝卜螺体内可分离到有眼点的叉尾蚴,经鉴定为毛毕属吸虫蚴虫。从渔民养殖家鸭的粪便内分离到菱形卵和新月形卵,且均可孵出毛蚴,感染实验室内养殖的耳萝卜螺,可获与上述形态相同有眼点的叉尾蚴。解剖上述两上不同来源的家鸭,均可获毛毕吸虫成虫。以上所获的虫卵、毛蚴、尾螺和成虫,经鉴定均为毛毕属吸虫基本一生活期。从而证明淮河水系有尾蚴性皮炎流行,其病原虫为毛毕属吸虫尾蚴。     

重组日本血吸虫FKBP12基因的酶活性及其转录水平鉴定

目的 对日本血吸虫(Schistosoma japonicum, Sj)FK506结合蛋白12(FKBP12)进行肽基脯氨酸顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase, PPIase)活性鉴定,并比较它与26000Mr的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)基因在成虫、尾蚴和虫卵的转录水平.方法 从成虫RNA中RT-PCR扩增SjFKBP12基因,将其克隆人pGEX-4T-1载体中,诱导表达重组融合蛋白,经纯化后进行PPIase活性测定.利用RT-PCR半定量分析SjFKBP12基因与Sj26GST基因的转录水平.结果 将SjFKBP12基因成功克隆人pGEX-4T-1载体中后,表达、纯化的重组融合蛋白有PPIase活性.SjFKBP12在尾蚴与虫卵期的转录水平相仿,都高于Sj26GST基因,是成虫期转录水平的1.5倍左右.结论 成功鉴定了重组SjFKBP12酶活性,SjFKBP12在尾蚴和虫卵期较高的转录水平,为将其进行疫苗等研究提供了依据.     

广东省河源市龙川县紫市镇猫、犬、猪、鼠寄生虫感染情况调查

目的 了解广东省河源市龙川县猫、犬、猪、鼠寄生虫感染情况,为人体寄生虫病防治工作提供科学依据.方法 采用生理盐水直接涂片法和清水自然沉淀集卵法,检查猫、犬、猪、鼠粪便,查找寄生虫虫卵.结果 调查猫、犬、猪、鼠粪便271份,检出寄生虫卵89份,寄生虫总感染率为32.84%.以猫、犬寄生虫感染率最高.寄生虫感染度以猫粪中的曼氏迭宫绦虫最高,平均每张玻片检出虫卵580个.检出寄生虫卵6种:钩虫卵、蛔虫卵、鞭虫卵、曼氏迭宫绦虫卵、长膜壳绦虫卵和姜片虫卵.猫、犬、猪、鼠各种寄生虫感染情况,以钩虫、蛔虫、鞭虫和曼氏迭宫绦虫感染多见.猪感染寄生虫种类最多.结论 广东省河源市龙川县紫市镇猫、犬、猪、鼠寄生虫感染情况比较严重,以猫、犬为甚.寄生虫感染种类较多,提示当地人群也可能有同类寄生虫感染,应引起当地政府和卫生防疫部门的高度重视.     

枯草杆菌芽孢抵抗胃肠道环境的耐性评估

目的 对益生菌一枯草杆菌芽孢进行耐性评估,为研制口服枯草杆菌芽孢载体疫苗奠定基础.方法 采用耗竭法,DSM培养基长时间振荡培养(24 h)获得芽孢,使用pH 2.0盐酸胃蛋白酶液模拟胃液,胆酸盐、胰液素混合液模拟肠液,对枯草杆菌芽孢进行体外耐受实验.结果 在DSM培养基中,80%～90%的枯草杆菌WB600可形成芽孢,每升DSM液所生成芽孢约1×1011.在模拟胃液中1 h后,仅0.0024%枯草杆菌WB600繁殖体细菌仍成活,大肠杆菌JM109活力完全丧失,而枯草杆菌芽孢基本不受影响,93.3%仍成活.在模拟小肠环境中3 h后,枯草杆菌WB600繁殖体细菌活力显著降低(仅0.0013%存活),枯草杆菌芽孢基本不受影响(92%仍存活),而大肠杆菌JM109有一定量的增殖.结论 枯草杆菌芽孢能耐受模拟胃肠道环境,有望成为新型的口服疫苗载体.     

恶性疟原虫Pf332基因片段的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒的构建

目的 构建包含恶性疟原虫Pf332基因片段的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒。方法 从FCCl／HN株基因组DNA中PCR扩增P1332基因片段，P332-RO、P332-R1和P332-R2；用PCR扩增法合成鼠IgG轻链信号肽的编码序列。用定向克隆法分别构建分泌型重组质粒pcDNA3-s—P332-R0、pcDNAl-s—P332-R1、pcDNA3-s—P332-R2和非分泌型重组质粒pcDNA3-s—P332-R0、pcDNA3—s—P332-R1、pcDNA3—s—P332-R2。阳性克隆的重组质粒DNA经酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果 PCR扩增得到特异的FCCl／HN株P1332基因片段，P332-R0、P332-R1、P332-R1，大小分别为489、429和393bp。用PCR扩增法合成63bp的Balb／c小鼠IgG轻链信号肽的编码序列。酶切、PCR及测序鉴定表明获得了正确的含P1332基因片段的分泌型、非分泌型重组质粒。结论 成功构建分别包含恶性疟原虫P1332基因片段-1332-R0、P332-R1和P332-R2的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒。     

青芥辣对离体肝吸虫囊蚴杀灭作用的研究

目的 研究青芥辣对离体肝吸虫囊蚴的杀灭作用.方法 采用人工消化法从淡水鱼中获取囊蚴,分组(囊蚴20个/组),将其置于定量青芥辣软膏中,分别作用不同时间,显微镜下观察囊蚴的活动情况.结果 青芥辣对肝吸虫囊蚴作用1～6 min后,囊蚴内后尾蚴活动加强;作用7～180 min后囊蚴活动力降低甚至开始死亡,死亡率范围为11.76%～100%;作用210 min以后囊蚴全部死亡,死亡率达到100%.对照组囊蚴形态和后尾蚴活动无改变.结论 青芥辣对肝吸虫囊蚴具有刺激和轻度杀灭作用,但在短时间内没有杀灭作用,所以期望用青芥辣杀灭肝吸虫囊蚴来达到预防肝吸虫感染的做法不可取.     

淮河水系尾蚴性皮炎流行病学调查初报

目的：调查淮河水系沿岸村镇居民中有否尾蚴性皮炎流行。方法：对淮河水系沿岸部分村镇居民作现场查询和体检,以确定有无该皮炎表现及伴随症状;现场采集耳萝卜螺（Ｒａｄｉｘａｕ－ｒｉｃｕｌａｒｉａ）用直接压片法分离尾蚴,并用此尾蚴感染雏鸭;采集河岸渔场渔民养殖家鸭的粪便,分别用水洗沉淀法分离虫卵和用毛蚴孵化法分离毛蚴,并用此毛蚴感染实验室养殖的耳萝卜螺;解剖购于当地渔民放养的家鸭及人工实验感染的雏鸭分离成虫。结果：沿岸农户及渔民下到鸭活动的水体后可引起“鸭瘙”（ｄｕｃｋｉｔｃｈ）,即在胸腹部及下肢等处皮肤可见弥漫性突出皮肤的红色丘疹,周围有红晕,并可见成片风疹团,患处刺痒或奇痒。从现场捕获的耳萝卜螺体内可分离到有眼点的叉尾蚴,经鉴定为毛毕属吸虫尾蚴。从渔民养殖家鸭的粪便内分离到菱形卵和新月形卵,且均可孵出毛蚴,用此毛蚴感染实验室内养殖的耳萝卜螺,可获与上述形态相同的有眼点的叉尾蚴。解剖上述两个不同来源的家鸭,均可获毛毕吸虫成虫。以上所获的虫卵、毛蚴、尾蚴和成虫经鉴定均为毛毕属吸虫某一生活期。结论：淮河水系有尾蚴性皮炎流行,其病原为毛毕属吸虫尾蚴。