凋亡素原核表达载体的构建和表达

目的 构建凋亡素原核表达系统，以制备抗原物质凋亡素融合蛋白。方法 通过PCR方法，以pcDNA-VP3质粒为模板，扩增出凋亡素VP3基因。将其克隆到原核表达载体pET-DsbA的多克隆位点，构建成凋亡素的高效原核表达栽体pET-DsbA-VP3，将该质粒转化到大肠杆菌E．coliBL21(DE3)plysS中，以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside，IPTG)对其进行诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。结果 转化有凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3的大肠杆菌E．coliBL21(DE3)plysS经IPTG诱导后，聚丙烯酰胺凝胶电泳出现38300的目的蛋白条带。结论 凋亡素原核表达栽体pET-DsbA-VP3能高效表达出凋亡素融合蛋白。     

凋亡素基因表达型载体的构建

凋亡素是来源于鸡贫血病毒vp3基因的一个功能蛋白，它具有特异性诱导肿瘤/转化细胞凋亡的特点。凋亡素基因载体的构建是凋亡素分子生物学特点研究及其在肿瘤基因治疗方面应用的基础，本文对凋亡素基因表达型载体的构建进展作一综述。     

受控凋亡素基因逆转录病毒载体诱导人肝癌细胞凋亡

目的:构建受控重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察受四环素调控的凋亡素基因的表达对人肝癌细胞的影响。方法:构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE—VP3。调节载体pRevTet-Off和表达载体pRevTRE—VP3分别转染PT67包装细胞后,取其病毒上清液依次感染人肝癌细胞系HepG2,以四环素调控凋亡素基因在HepG2/Off-VP3细胞中的表达,以流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:重组逆转录病毒载体pRevTRE—VP3构建成功;经PCR和RT—PCR证实凋亡素基因在HepG2细胞中得到了表达;HepG2/Off-VP3—8细胞在无四环素培养环境中凋亡率明显高于在1μg/ml四环素环境中的细胞凋亡率(P＜0．05)。结论:凋亡素基因经RevTet系统导入人肝癌细胞HepG2后,可在四环素调控下表达凋亡素并诱导HepG2细胞凋亡。     

链霉蛋白酶与利多卡因胶浆联用提高超声内镜检查清晰度的研究

目的评价检查前联合使用链霉蛋白酶和利多卡因胶浆对缩短超声胃镜操作时间和改善内镜、超声图像方面的效果。方法将超声内镜受检者80例随机分为A、B组,每组40例。A组于检查前15min口服利多卡因胶浆10ml;B组于检查前30rain口服含10000单位链霉蛋白酶和1g碳酸氢钠的温开水50ml,并于检查前15min口服利多卡因胶浆10ml。记录总操作时间,并对超声胃镜下胃内黏液附着量及超声图像的清晰度进行评分。结果A组操作时间长于B组[（15．5±3．0）min比（12．3±2．3）min,P〈0．001],B组内镜和超声内镜图像视野清晰度均优于A组。结论链酶蛋白酶和利多卡因胶浆联用可有效去除胃内黏液艉高超声内镜检查成像质量。     

内镜下可分离式单环尼龙环套扎治疗食管静脉曲张

目的 通过与五连发套扎术比较，评价可分离式单环尼龙环套扎术治疗食管静脉曲张的效果，并对其操作上的特点进行讨论。方法 131例食管静脉曲张接受内镜下套扎治疗。其中86例采用可分离式尼龙环套扎术（观察组），45例采用五连发套扎术（对照组）。观察4周后静脉曲张改善程度及平均随访12个月后的再出血率。结果 观察组静脉曲张改善显效率为89．5％，有效率为10．5％，随访1年再出血率为3．5％；对照组显效率、有效率和再出血率分别为84．4％、15．6％，4．4％。结论 可分离式单环尼龙环套扎术与五连发套扎术在改善食管静脉曲张近期疗效上差异无显著性，但其在操作上具有简单、有效、安全、经济的优点，有较大的应用前景，值得在临床上推广。     

细胞染色体检测在诊断恶性多浆膜腔积液中的临床研究

目的探讨细胞染色体检测对诊断恶性多浆膜腔积液的价值。方法染色体检测采取涂片染色镜检定性的方法。本研究共有43例恶性肿瘤和30例非恶性肿瘤伴多浆膜腔积液的患者,对其浆膜腔积液均进行了染色体、癌细胞、CEA等检查。结果浆膜腔积液染色体检测的敏感性为79．07％,准确性为92．65％,明显优于癌细胞、CEA的检测结果（P〈0．05,P〈0．01）,且特异性高达96．67％。31例恶性肿瘤伴渗出性多浆膜腔积液患者中,28例染色体阳性,阳性检出率为90．32％;12例恶性肿瘤伴非渗出性多浆膜腔积液患者中,6例染色体阳性,阳性检出率为50．00％,两组阳性率均较高,但经比较P〈0．05。结论恶性肿瘤患者伴发多浆膜腔积液时,无论是渗出液还是非渗出液,其染色体阳性检出率和特异性都很高,对诊断恶性多浆膜腔积液具有很好的临床实用价值,但非渗出液的细胞培养时间应适当延长。     

胃镜诊断和病理诊断萎缩性胃炎的相关性分析研究

目的探讨CAG胃镜诊断与病理诊断的相关性以提高CAG的诊断率。方法对104例胃镜诊断CAG倾向和／或病理诊断CAG的病例进行分析。结果胃镜下诊断CAG倾向32例，其中24例与病理结果相符合，符合率为75％，且病理结果中-重度萎缩者占75％，伴肠化生16例，伴不典型增生12例；病理诊断CAG96例，其中胃镜诊断为CAG倾向者24例，仅占25％，其余糜烂性胃炎32例，伴肠化生18例，伴不典型增生16例；胃溃疡24例，伴肠化生13例，伴不典型增生18例；复合性溃疡8例，伴肠化生3例，伴不典型增生2例；幽门管溃疡8例，伴肠化生0例，伴不典型增生8例。CAG的HP感染率为98％。结论胃镜与病理诊断CAG的一致性较差，大部分CAG在胃镜下的特征性表现被糜烂、溃疡等病变所掩盖，对糜烂、溃疡等病变的边缘及周边黏膜(尤其对伴Hp感染者)仔细观察并活检，有助于提高胃镜CAG的诊断率。     

盐酸伊托必利片对功能性消化不良患者生化指标及胃电图和胃动力的影响

目的探讨盐酸伊托必利片对功能性消化不良患者血清5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、生长抑素(somatostation,SS)及胃电图和胃动力的影响。方法选择2012年1月~2014年1月期间在广东省广州南方医科大学南方医院纳入的115例患者,按照随机数字表法随机分为观察组(n=59)和对照组(n=56)。对照组采用常规治疗方法,观察组在对照组基础上结合盐酸伊托必利片50 mg,每天3次,餐前30 min口服,疗程均为4周。结果治疗前,2组血清5-HT和SS含量、胃体、胃小弯、胃大弯、胃窦电节律和电功率比较,差异不具有统计学意义。与治疗前相比,治疗后2组血清5-HT和SS含量、胃体、胃小弯、胃大弯、胃窦电节律和电功率均显著降低,且具有统计学意义(P<0.05),与对照组相比,观察组血清中5-HT和SS含量、胃体、胃小弯、胃大弯、胃窦电节律和电功率显著降低,且具有统计学差异(P<0.05);与对照组相比,观察组初始压力和初始容积、最大耐受容积和最大耐受压力值均显著升高,且均具有显著性意义(P<0.05)。结论盐酸依托必利片对功能性消化不良患者效果显著,具有重要临床研究价值,值得临床进一步推广研究。     

血清学优化指标在克罗恩病黏膜愈合判断中的诊断效能

目的研究血清白蛋白(ALB)、C-反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)及血清学优化指标PLT/ALB、CRP/ALB在判断经治疗已达到临床缓解期的克罗恩病患者是否达到内镜下黏膜愈合的诊断效能。方法对2000年1月至2017年12月在南方医科大学南方医院已确诊克罗恩病且经治疗已达到临床愈合(CDAI150分)的75例患者进行回顾性分析,根据肠镜SES-CD评分是否小于2分,分为黏膜愈合组与非黏膜愈合组。对比患者一般资料、血清学资料及SES-CD评分,通过ROC曲线评估各项指标对黏膜愈合判断的诊断效能。结果与非黏膜愈合组患者相比,黏膜愈合组ALB较高,PLT、PLT/ALB、CRP和CRP/ALB较低。其中ALB、CRP、CRP/ALB和PLT/ALB在治疗前后均与SES-CD评分存在显著相关性。ROC曲线分析,在诊断黏膜愈合的效能方面,各指标诊断黏膜愈合的敏感度、特异度如下:ALB(敏感度84.4%,特异度55.8%)、CRP(敏感度81.4%,特异度68.7%)、PLT(敏感度76.7%,特异度56.2%)。当血清学指标优化后使用时,正确指数高于相应的单个血清学指标,其中CRP/ALB诊断正确指数最高,当CRP/ALB0.147时诊断黏膜愈合的敏感度79.1%,特异度71.9%。结论血清学指标ALB、CRP、PLT均能在一定程度上判断克罗恩病患者是否处于黏膜愈合状态,但血清学优化指标CRP/ALB的诊断效果最佳,优于单用血清学指标。     

细胞染色体分析对良恶性浆膜腔积液鉴别诊断的临床研究

目的探讨细胞染色体检测分析对良恶性浆膜腔积液鉴别诊断的临床价值。方法染色体检测采取涂片染色镜检分析的方法。对伴有浆膜腔积液的43例恶性肿瘤和30例非恶性肿瘤的患者,抽取其浆膜腔积液进行染色体、癌细胞、CEA等检查。结果恶性染色体阳性结果的敏感性79.07%,准确性86.30%,明显优于癌细胞、CEA的检测阳性率,P〈0.05~0.01,且特异性高达96.67%。其中恶性肿瘤伴渗出性浆膜腔积液染色体阳性检出率90.32%;恶性肿瘤伴非渗出性浆膜腔积液阳性检出率50.00%,两组阳性率均较高,且P〈0.05。结论恶性肿瘤患者伴发浆膜腔积液时,无论是渗出液还是非渗出液,其染色体阳性检出率和特异性都很高,细胞染色体检测分析对良恶性浆膜腔积液的鉴别诊断具有很高临床适用价值。