淫羊藿、巴戟天中药提取物对恒河猴M0、M1型单核衍生巨噬细胞基因表达的影响

【目的】探讨中药淫羊藿、巴戟天提取物(中药注射液喘可治的组成)对恒河猴单核衍生的巨噬细胞在未极化(M0)、M1极化条件下基因表达的影响,分析其可能的免疫调节的作用机制。【方法】采用密度梯度离心法分离中国恒河猴外周血单个核细胞(PBMCs),采用贴壁法纯化出单核细胞,并以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激5 d以使单核细胞分化成巨噬细胞;然后不加入极化因子(M0)或以干扰素γ(IFN-γ,继续培养2 d)诱导巨噬细胞极化为M1表型,同时分别加入淫羊藿、巴戟天提取物进行干预;然后提取m RNA并逆转录后,采用实时荧光定量PCR检测CCR5、CD4、CTLA-4、Fox P3、IDO、IL-10、TGF-β等基因表达量。【结果】与空白对照组比较,加入巴戟天提取物培养的M0巨噬细胞基因表达上调不明显;经淫羊藿提取物培养的M0巨噬细胞,CCR5基因表达量上调4.21倍,TGF-β上调7.66倍,Fox P3、IL-10轻度上调,而CD4、CTLA-4、IDO等基因表达改变倍数无明显变化。经巴戟天提取物刺激的M1型巨噬细胞,CTLA-4基因表达量上调3.22倍,Fox P3上调3.69倍,CCR5、CD4、IL-10、IDO基因改变倍数均无明显变化,TGF-β未测出;而由淫羊藿提取物刺激的M1型巨噬细胞,IL-10的表达量上调11.83倍,Fox P3上调4.55倍,IDO、CCR5、CD4、CTLA-4基因改变倍数无明显变化,TGF-β未测出。【结论】巴戟天和淫羊藿提取物培养能够上调M1型巨噬细胞IL-10、Fox P3、CTLA-4等抑炎基因表达,淫羊藿提取物能够上调M0巨噬细胞CCR5和TGF-β等基因表达,促进病原体清除和组织修复,从而发挥多效免疫调节作用。     

血管内皮细胞凋亡研究进展

血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)是铺陈于血管壁内侧的一种多功能的细胞,对血栓与止血、炎症与免疫和血管新生、物质转运等多种生理、病理过程具有重要的调节功能。当凋亡触发因子作用于VEC时,细胞内出现多种调控基因表达改变、蛋白酶活化等一系列的变化,并出现胞膜泡状突起,染色质浓缩,细胞核裂解以及膜分子结构和功能等的改变,从而参与血栓形成、动脉粥样硬化、高血压等多种病理过程。     

连翘对岭南湿热模型小鼠的作用及其肠道菌群变化的研究

目的探究连翘对岭南湿热模型小鼠的作用及对模型小鼠肠道菌群的影响。方法将21只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、连翘组,每组7只。将模型组和连翘组放入人工气候箱[T:(30±0.15)℃,HR:80%～85%]每天12 h,隔日灌服白酒0.3 mL+跑步30 min,每日以高蛋白饲料喂养的"外湿+内湿+脾虚"的复合因素造模。造模49 d后,连翘组小鼠连续7 d进行连翘水溶液灌胃,模型组小鼠连续7 d超纯水灌胃。实验结束后用酶联免疫吸附法(ELISA)对各组小鼠血清、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(INF-γ)及内毒素(LPS)进行检测,对各组小鼠舌、小肠组织进行病理学检测,对粪便进行16s rRNA检测。结果与正常组比较,模型组小鼠血清TNF-α、IFN-γ、LPS含量增加(P 0.01,P 0.001);舌组织黏膜层角化增加并且有明显的过角质化突起,固有层结缔组织破坏明显;小肠组织黏膜层上皮细胞被破坏,固有层腺体损伤;肠道菌群结构发生紊乱,拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)所占肠道菌群的比例均有所增加(P 0.05),厚壁菌门(Firmicutes)所占比例减少(P 0.01);肠道有益菌普氏菌属(Prevotella)和颤螺菌属(Oscillospira)含量减少(P 0.05,P 0.01),致病菌大肠杆菌属(Escherichia)含量增加(P 0.05)。与模型组比较,连翘组小鼠血清TNF-α的含量有减少趋势,IFN-γ的含量减少明显(P 0.01),但血清LPS含量没有显著变化;舌组织黏膜层过角化突起没有改善,舌乳头排列较均匀,固有层形态规整;小肠组织黏膜层上皮细胞结构清晰,排列规则,固有层腺体结构清晰;肠道菌群结构改善,拟杆菌门所占比例降低(P 0.05),厚壁菌门所占比例升高(P 0.01);肠道有益菌普氏菌属和颤螺菌属含量增加(P 0.05),致病菌螺杆菌属(Helicobacter)含量降低(P 0.05)。结论连翘对中医湿热证有积极的治疗作用,能够治疗炎症,改善舌和小肠组织病变,降低肠道致病菌的含量并且对肠道菌群结构有调节作用。     

有关SARS病原冠状病毒合并感染组织胞浆菌的探讨

目的研究汞（Hg）对剑尾鱼（Xiphophorus helleri Heckel）鳃和肝组织总抗氧化能力（T-AOC）的影响以及硒（Se）对Hg致机体损伤的拮抗作用,探讨剑尾鱼器官组织内T-AOC变化作为环境风险评价（ERA）的有效生物学标记的可行性.方法使用浸浴法以0、0.21、0.42 mg/L三个Hg浓度,（0.21＋0.0664）和（0.42＋0.0664）mg/L二个Hg加Se浓度,以及0.0664 mg/L一个Se浓度为剑尾鱼染毒,定量测定了染毒5 d内鳃和肝组织中总抗氧化能力的变化.结果在整个实验期间Hg暴露组剑尾鱼组织的T-AOC值都有不同程度的下降,与对照组相比高Hg组在染毒第5天时鳃和肝脏组织总抗氧化能力分别降低了39%和30%（P＜0.01）,相反,单独硒处理不论鳃和肝脏组的T-AOC则自第1天起持续显著升高（P＜0.05）.低Hg加Se组鳃组织T-AOC在实验期间基本上维持在接近对照组的水平,但肝组至第5天时,T-AOC下降明显（P＜0.05）.而高Hg加Se组无论鳃或肝组虽然在第1天时T-AOC仍保持一定的活力,但随染毒时间的延长,T-AOC有显著降低（P＜0.05或P＜0.01）.结论硒在一定程度上拮抗汞对机体T-AOC的降低.剑尾鱼鳃和肝组织的总抗氧化能力可作为环境风险评价（ERA）的有效生物学标记.     

猴免疫缺陷病毒特异性免疫复合物沉着与猴AIDS多系统病变关系的探讨

目的观察猴免疫缺陷病毒(SIV)感染后,病毒特异性免疫复合物(IC)在不同时间、不同组织的沉着情况,初步研究其与AIDS多系统病变的联系。方法对8只不同时间感染SIV的恒河猴及1只未感染SIV的猴进行尸检以获取多系统组织标本,进行连续切片和IgG、C3、SIV p27免疫荧光染色,并对结果进行比较分析。结果IgG、C3、p27在多个猴、多种组织的相同位置出现相同模式的荧光表达,证明存在IC的沉着;其中脑血管周(8/8),心肌间微血管(6/8)、和淋巴结副皮质(6/8)及生发中心(5/8)是阳性率最高的部位,肾小球及肾间质、肠黏膜固有层也有较多IC的沉着,且在感染中、晚期IC出现的比例更高。结论SIV感染后出现广泛的SIV-IC沉积,且随病情的进展而加重;IC可能是SIV导致AIDS多系统病变的主要形式。针对此过程进行研究,可帮助了解AIDS并发多系统器官病变的机制及研究新的治疗方法。     

动态血压监测高血压病患者各参数值与脑卒中的关系

目的探讨动态血压监测高血压病患者各参数值与脑卒中的关系。方法我科2010年以来采用Meditech ABPM-04便携式血压记录仪测定24h血压,在临床上预测脑卒中的发生具有重要的作用。结果根据高血压病患者335例临床监测血压值分析,发现患者的平均血压、脉压和收缩压同脑卒中的发生有着比较明显的相关性,而患者的舒张压同脑卒中的发生没有明显的相关性。结论通过动态血压监测高血压病患者,探讨各参数值与脑卒中的关系,提高了高血压病的治疗效果,降低了高血压并发脑卒中的发生率。     

不同工艺对清热五号合剂质量的影响

清热五号合剂是我院的经典中药制剂 ,临床使用多年 ,对治疗病毒引起的感冒 ,上呼吸道感染、腮腺炎等症疗效确切。因中药合剂中含有大量的适宜微生物繁殖的营养物质 ,易发酵变质 ,故防腐也是影响质量的关键 ,本文就不同工艺来探讨清热五号合剂的稳定性。1　材料与方法1 1　药物成分　黄芪、葛根、大青叶、贯众、茵陈 (产地安果 )。1 2　仪器　天津型中药浓缩锅　浸煎罐、卧式压力锅。1 3　方法　方法 (1) :黄芪、葛根、大青叶、贯众、茵陈等五味药煎后去渣 ,浸前液加糖置浓缩锅内 ,经浓缩后加适量0 2 %苯甲酸醇溶液 ,玻璃瓶灌装 ,10 5℃热压…     

脑泰方提取物抗肿瘤坏死因子诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的研究

目的 观察重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(HUEC)凋亡及中药脑泰方提取物(NTE)的作用。方法 将融合生长的HUEC随机分为空白对照组(正常培养，不加rhTNF-α)、NTE对照组(加中剂量NTE，不加rhTNF-α)、rhTNF-α组(仅加100ngmL rhTNF-α)和NTE高、中、低剂量组(加100ng/mL rhTNF-α和6mg/mL、2mg/mL、0．67mg/mL NIE)，观察rhTNF-α作用24h后内皮细胞吖啶橙/溴乙啶双重荧光染色和凋亡细胞计数。结果 荧光显微镜下可见，空白对照组和NTE对照组HUEC为正常结构的活细胞、染色质主要着亮绿色，凋亡细胞率分别为14．0％和14．5％；rhTNF-α组与NTE低剂量组细胞大多呈均匀橙色，染色质多被染为橘红色，以固缩状或圆珠状为主，凋亡细胞率分别为75．0％和63．5％；NTE高、中剂量组细胞多呈亮绿色，凋亡细胞率分别为43．5％和53．0％。结论 一定浓度的肿瘤坏死因子引起的内皮细胞损伤主要表现为细胞凋亡，脑泰方提取物可明显抑制这种凋亡的过度发生。     

翻转课堂教学模式在有机化学教学中的设计

针对药学专业有机化学课程传统教学模式学生学习被动、学习资源有限、知识传递形式拘束、评价方式单一等不足,构建了建构主义翻转课堂教学模式。对教学模式的三阶段、九环节进行了包括资源设计、微课题设计、目标设计、内容设计、情境导课设计、测试题目设计、问题讨论设计、评价体系设计等全方位的教学设计。该教学可引导学生自主建构药学专业所需有机化学知识体系,锻炼独立探索和交流协作的学习能力,培养积极的学习兴趣、乐观的生活态度,树立正确的人生观、价值观。     

狼毒大戟配伍大枣水煎液体外抗乳腺癌作用及机制研究

目的 探讨狼毒大戟配伍大枣水煎液(decoction of Euphorbia fischeriana Steud. and jujuba, DEFSJ)体外抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡的可能分子机制。方法 通过血清药理学方法制备DEFSJ载药血清(containing serum, CS);光镜及电镜下观察细胞形态学变化;DEFSJ-CS联合LY294002(PI3k信号通路抑制剂)作用后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡情况,流式细胞仪结合免疫染色检测PI3k/Akt转导途径及Bcl-2家族相关蛋白的表达变化。结果 光镜及电镜下可见细胞形态学变化及典型的细胞凋亡形态学特征;与阴性对照组比较,DEFSJ-CS对MCF-7细胞的增殖有明显的抑制作用,联合LY294002后抑制作用更加显著(P<0.01);Annexin V-FITC/PI染色结果显示,与阴性对照组比较,随着DEFSJ-CS含量的增加,细胞凋亡率明显增加,联合LY294002后凋亡作用更加显著(P<0.05,P<0.01)...