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1.
目的研究苯扎氯铵对大鼠结肠神经及平滑肌的影响。方法8~9周龄SD大鼠50只,随机分为两组。氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵。分别于术后1、2、3、4、8周取处理段结肠行组织学检查,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测乙酰胆碱酯酶(AchE)、巢蛋白(nestin)、乙酰胆碱M3受体(Chrm3)的表达,循环水浴药理学检测平滑肌收缩功能变化。结果苯扎氯铵处理后1周,大鼠结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失;结肠平滑肌对乙酰胆碱敏感性增强。结论采用0.1%苯扎氯铵可使大鼠结肠产生去神经作用,结肠平滑肌对乙酰胆碱敏感性增强。 相似文献
2.
目的比较多巴胺在大鼠不同节段远端结肠黏膜上引起的离子转运变化。方法剥离健康成年SD大鼠不同节段远端结肠黏膜,运用短路电流技术研究多巴胺对黏膜离子转运的影响。结果黏膜基膜侧应用小剂量多巴胺(<1 mmol/L)可使短路电流曲线下降,越靠近肛门的黏膜上皮细胞对多巴胺的反应越大,而远离肛门的远端结肠黏膜基膜侧应用大剂量(1 mmol/L)多巴胺使短路电流曲线上升。结论大鼠不同节段远端结肠黏膜对不同浓度的多巴胺反应不同。 相似文献
3.
目的研究川芎嗪(TMP)在Caco-2细胞系中作用的信号转导途径.方法运用细胞培养,破膜和短路电流(Isc)技术,信号转导途径中的激动剂和阻断剂研究TMP作用的信号转导途径.结果Forskolin (AC激动剂)和IBMX(PDE抑制剂)预处理后显著抑制了TMP在Caco-2细胞系上引起的Isc.MDL-12330A(AC抑制剂) 预处理后也明显抑制TMP的作用.结论TMP通过环磷酸腺苷-蛋白激酶A(cAMP-PKA)系统引起Caco-2细胞系的分泌作用. 相似文献
4.
胰岛素瘤相关蛋白-2高表达对胰岛细胞增殖的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:探讨1型糖尿病自身抗原胰岛素瘤相关蛋白-2(IA鄄2)高表达对胰岛细胞系RIN5F细胞增殖、生长周期和细胞凋亡的影响。方法:利用分子克隆技术构建IA鄄2真核表达载体,转染RIN5F细胞后筛选稳定高表达IA鄄2的细胞系,采用3鄄(4,5鄄二甲基)鄄5鄄(3鄄羧甲基苯环)鄄2鄄(4鄄硫基苯)鄄2H鄄四唑盐复合物(MTS)检测法确定细胞增殖速率,运用流式细胞术检测细胞生长周期和细胞凋亡水平。结果:IA鄄2高表达细胞增殖速率显著低于载体对照组细胞(P<0.05)。IA鄄2高表达细胞的细胞凋亡数显著高于载体对照组细胞(P<0.01)。IA鄄2高表达细胞中位于S期的细胞比率显著增加,而G2/M期的细胞比率减少(P<0.05)。结论:IA鄄2在胰岛细胞内高表达可抑制胰岛细胞的增殖,促进细胞凋亡,在G2鄄M期细胞生长阻滞。 相似文献
5.
实验性巨结肠大鼠模型的建立及其生物学特性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立一种适合骨髓间充质干细胞移植的实验性巨结肠大鼠模型并观察其生物学特性.方法:8~9周龄SD大鼠90只,随机分为两组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(BAC)处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替BAC.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠,结肠测压、取处理段结肠行病理学检查,循环水浴药理学测定平滑肌收缩功能变化,RT-PCR检测AchE、nestin、Chrm3的表达.结果:BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,对乙酰胆碱敏感性增强,近端结肠扩张有大便堆积,且随着时间延长症状加重.病理学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.结论:采用0.1?C处理降结肠浆膜成功建立了实验性巨结肠模型,此模型与先天性巨结肠动物模型相似,为进一步结肠内骨髓间充质干细胞移植移植分化为神经细胞的研究奠定了基础. 相似文献
6.
目的:研究不同浓度川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)促结肠粘膜分泌的离子组成。方法:运用短路电流(short_circuit current,Isc)技术,不同灌流液和共转运体的抑制剂研究TMP作用的离子组成。结果:不同浓度TMP在大鼠结肠粘膜上引起的Isc曲线不同。去除粘膜双侧的Cl-或基底膜侧应用bumetanide(Na+_K+_2Cl-_共转运体的抑制剂)可使低浓度的TMP引起的Isc显著减小,而去除粘膜双侧的Cl-和HCO3-或基底膜侧应用DIDS(Na+_HCO3-_共转运体的抑制剂)可使高浓度的TMP作用明显受抑。结论:不同浓度TMP促大鼠结肠粘膜分泌的离子种类不同。 相似文献
7.
目的:探讨葡萄糖、细胞因子TNF-α,IFN-γ和生长因子IGF-1,EGF,FGF对胰岛细胞自身抗原IA-2表达水平及胰岛功能的影响。方法:以不同浓度的葡萄糖(3,7,11和30mmol/L)、IFN-γ(10ng/ml)、TNF-α(100ng/ml)及IGF-1,EFG,FGF-10(10ng/ml),分别刺激胰岛细胞系RIN5F24h和48h,用RT-PCR方法检测各组RIN5F细胞中IA-2的mRNA表达水平,用放射免疫法检测上清中胰岛素的浓度,3-(4,5-二甲基)-5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物(MTS)法检测细胞生长速率。结果:RT-PCR结果显示以不同浓度葡萄糖(3,7,11和30mmol/L)分别刺激RIN5F细胞系后,IA-2mRNA水平呈浓度依赖性和时间依赖性增加;TNF-α、IFN-γ可抑制IA-2mRNA的水平(P<0.05),IGF-1、FGF使IA2的表达增加(P<0.05)。TNF-α或IFN-γ刺激RIN5F细胞系后,上清中胰岛素水平均较基础值降低,并且作用48h后差异有显著性(P<0.05)。IGF-1,bFGF作用于RIN5F细胞系48h,上清中胰岛素较基础值显著增加(P<0.05)。MTS结果显示IGF-1使胰岛细胞增殖速率显著增加(P<0.01)。结论:葡萄糖、TNF-α、IFN-γ和一些生长因子可改变胰岛自身抗原的表达,参与1型糖尿病的发病。 相似文献
8.
目的在体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)的神经细胞分化基础上,探讨移植治疗实验性巨结肠的可能性。方法8~9周龄SD大鼠用1%苯扎氯铵(BAC)制作巨结肠模型。贴壁筛选法进行MSCs原代培养、扩增后用碱性全反式视黄酸(ATRA)和碱性成纤维生长因子(FGF2)诱导法收获Nestin、NF表达阳性的MSCs细胞,显微注射法将来源于雄性大鼠,Nestin、NF阳性表达的MSCs植入雌性实验性巨结肠模型鼠病变肠段。实验分对照组(PBS组)及实验组(MSCs组),分别于术后1、2、4周进行大体观察,钡灌肠X线检查,病理学检查、平滑肌收缩功能以及采用短路电流技术检测上皮离子转运的变化。结果BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,BAC处理段出现狭窄。MSCs被纯化并被诱导为神经细胞。MSCs组免疫组化结果显示移植后1、2、4周Nestin及NF呈阳性表达,但在PBS组未观察到阳性表达。MSCs组腹胀较轻,梗阻近端少量大便,MSCs移植组大鼠结肠上皮第一周跨膜电压升高,但第四周其基础电流下降,钠离子吸收减少;MSCs移植后第一、四周Forskolin所引起的氯离子分泌电流均较PBS组高。结论MSCs可在实验性巨结肠模型鼠结肠壁内分化为神经细胞,部分恢复结肠神经调节作用。 相似文献
9.
兔食管和结肠上皮对水、电解质转运的差异 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 :探讨兔食管和远端结肠上皮对水、电解质转运的差异。方法 :在药物和特异性通道阻断剂的作用下 ,用短路电流技术 ,体外测量两类上皮基本电参数的改变。结果 :远端结肠上皮的短路电流显著高于食管上皮 ;在食管上皮的顶膜加入amiloride ,短路电流从基础状态下的 (17.4± 2 .2 ) μA/cm2 (n =15 )减少到 (7.5± 1.7) μA/cm2 (n =13) ,P <0 .0 0 1。在基侧膜加入Ba2 + ,短路电流从基础状态减少到 (13.5± 0 .3) μA/cm2 (n =4 ) ,P <0 .0 5 ;在结肠上皮的顶膜加入Diphenylamine 2 ,2’ dicarboxylicacid (DPC) ,短路电流从 (119.7± 19.0 ) μA/cm2 (n =8)减少到 (4 9.8± 15 .5 ) μA/cm2 (n =5 ) ,P <0 .0 0 1;indomethacin和TTX不改变食管上皮的基础电参数 ,却使结肠上皮的短路电流从基础状态减少到 (71.1± 11.1) μA/cm2 (n =4 ) ,P <0 .0 0 5。结论 :与相对疏漏、具有较低电阻的远端结肠相比 ,食管是具有较高电阻的紧密上皮 ;在稳定的基础状态下 ,钠离子吸收和氯离子分泌分别是构成食管上皮和结肠上皮的跨上皮电压和短路电流的主要原因 ;钾通道分布在食管上皮的基侧膜 ,在基础条件下处于开放状态 ;粘膜下神经丛和前列腺素的作用不参与构成食管上皮的基础电流 ,却是结肠上皮基础电流形成的原因之 相似文献
10.
1型糖尿病自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2真核表达系统的构建和鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建能高效表达自身抗原胰岛素瘤相关蛋白2(IA2)的真核表达载体作为预防发生1型糖尿病(T1DM)的基因疫苗。方法利用基因工程技术构建重组pEGFP/IA2真核表达系统,并且转染、筛选稳定高表达IA2的RIN5F胰岛细胞株,用免疫印迹法并在荧光显微镜下鉴定其表达,利用共培养体系检测IA2刺激淋巴细胞增殖率。结果双酶切结果表明成功构建了重组pEGFP/IA2真核表达系统,免疫印迹法证实可在RIN5F细胞内高表达IA2。并且该表达的IA2可显著促进NOD小鼠淋巴细胞增殖反应(P<0.05)。结论成功构建的IA2真核表达系统对于T1DM基因疫苗预防策略和对于IA2生理功能的研究都具有重要的意义。 相似文献