耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及耐药谱研究

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus ，MRSA）常引起医院感染的暴发流行。MRSA由于获得了外源性甲氧西林耐药决定子A（methicillin resistance determinant A，mecA），该基因编码青霉素结合蛋白2a，造成对所有β内酰胺类药物耐药。mec基因存在于葡萄球菌盒式染色体（Staphylococcal cassene chromosome mec，SCCmec）中，SCCmec是一种新型的可移动元件，不同于噬菌体和转座子，而且该元件还携带除mecA基因外的其他抗生素耐药基因，造成多重耐药。     

NOVA5电解质分析仪自制试剂与原装试剂的应用比较

NOVA5电解质分析仪采用离子选择性电极法原理, 能直接测定标本中钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)的含量。 该机操作简便,测量速度快,准确性高,被许多医院采用。 但目前该仪器配套试剂国内无生产,完全依赖进口。因 此,研究与开发此试剂具有重要意义。我们根据离子选 择性电极的基本原理结合有关文献报道[1,2],并对原装试 剂成分进行分析研究,结合标准液配制的要求,自制出该 仪器的配套试剂。 一、材料和方法 1.仪器和试剂　NOVA5电解质分析仪及原装配套试 剂(批号:211001)。万分之一电子分析天平。自制试剂: (1)标准液A:精确称取NaCl…     

环丙沙星耐药肠杆菌科细菌临床株qnr和aac(6')-Ⅰ b-cr基因的检测

目的 了解温州地区环丙沙星耐药肠杆菌科细菌临床株的qnr、aac(6')-Ⅰ b-cr基因的分布情况.方法 收集2005年8月-2008年4月间温州医学院附属第一医院环丙沙星耐药的肠杆菌科细菌共461株,其中大肠埃希菌370株,阴沟肠杆菌39株,克雷伯菌属细菌52株.应用PCR方法 检测qnr和aac(6')-Ⅰ b幕因,DNA测序检测qnrA、qnrB、qnrS和aac(6')-Ⅰ b-cr基因;接合传递试验方法 探讨细菌质粒介导的耐药性传递情况.结果 461株环丙沙星耐药的肠杆菌科细菌临床株中检出含qnr基因阳性菌株15株(3.25%),包括qnrA基因阳性株5株(4株阴沟肠杆菌和1株解鸟氨酸克雷伯菌)、qnrB基因阳性株4株(2株肺炎克雷伯菌和2株大肠埃希菌)、qnrS基因阳性株6株(2株肺炎克雷伯菌和4株大肠埃希菌);检出52株细菌(包括42株大肠埃希菌、4株阴沟肠杆菌和6株克雷伯菌属细菌)携带aac(6')-Ⅰ b-cr.15株qnr基因阳性的菌株同时携带aac(6')-Ⅰ b-cr,药敏结果 显示对业胺培南敏感但对多种抗生素耐药.15株qnr基因阳性的菌株中7株质粒接合传递试验成功,临床株对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药性部分传递给了受体株.结论 qnr基因在温州地区环丙沙星耐药的肠杆菌科细菌临床株中较少见,而aac(6')-Ⅰ b-cr基因存在较普遍.     

前MRSA的检测及mec复合体分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin—resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的mecA基因的表达受到多种因素的影响，rnecR1-mec I-mecA调控系统发挥重要的作用。具有完整的mecR1-mec I-mecA调控系统及mec启动子的菌株，     

肝硬化并发肝性脑病患者血清S100B检测的临床价值

目的:探讨肝硬化肝性脑病患者血清S100B检测的临床价值。方法:收集35例正常健康体检志愿者(对照组),105例就诊我院的肝硬化患者(病例组),对所有入选者均进行血清S100B检测,另病例组均进行血氨、肝功能、电解质以及凝血功能测定,检测血清S100B采用酶联免疫法,并对观察值进行统计学处理。结果:1.肝硬化合并肝性脑病组血清S100B含量较肝硬化非肝性脑病及正常对照组明显增高,具有极显著差异(P0.01);29例入院时已经确诊为肝性脑病的患者,经谷氨酸钠、精氨酸、甘露醇或保留灌肠等治疗后,肝性脑病病情控制,第7天复查血清S100B,较治疗前明显减低,且治疗前后比较有显著差异(P0.05);观察15例肝性脑病合并低钠血症组血清S100B值,并与单纯肝性脑病及单纯低钠血症比较,混合组血清S100B值明显高于另外两组,有显著差异(P0.05)。2.所有肝硬化并发肝性脑病患者经ch ild-pugh分级并与患者血清S100B值进行相关分析,发现两者高度正相关(相关系数为r=0.898)。3.对所有肝硬化患者根据血清S100B值进行分组,S100B高值组患者肝性脑病的发病率高于低值组(P0.05);对入院时肝硬化非肝性脑病患者根据血清S100B值进行分组,S100B高值组入院后进展为肝性脑病发生率高于低值组(P0.05)。结论:血清S100B的测定有助于肝性脑病的诊断和脑实质损害情况的判断,在临床上对病情的估计、预后的判断和及时采取有效治疗措施有一定的帮助作用。     

胶体金法检测妇科肿瘤患者高浓度HCG所致钩状效应的解决方案

钩状效应是影响定性和定最免疫学检测准确性的一种现象,常导致检测结果呈假低值和假阴性的错误[1-2].高浓度HCG由于钩状效应易使定量检测结果偏低.我们发现3例滋养层细胞疾病患者的HCG浓度超过200 000 U/L,用化学发光免疫分析时结果严重偏低,现报告如下.     

AVL血气分析仪pH值测定结果的可比性探讨

目的通过对2台AVL血气分析仪pH值测定结果进行比对和偏倚评估,探讨pH值测定的可比性,为减少测定结果偏差提供实验数据。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP9-A2文件,以AVL COMPACTⅢ血气分析仪、原装定标液和质控品组成系统为比较方法,AVL COMPACTⅡ为实验方法,计算实验方法（Y）与比较方法（X）之间的系统误差（SE）,以美国临床实验室修正法规（CLIA＇88）规定的室间质量评价允许误差1/2（0.02 pH值单位）为标准,判断不同仪器测定结果的可比性。结果在电极保养或更换电极（膜）后,偏差超范围标本由8.29%降为1.71%。结论用2台血气分析仪同时检测时,应及时进行保养和偏倚评估,保证检验结果的可比性,为临床提供最佳服务。     

胸外科分离大肠埃希菌qnr基因检测与ISCR间的关系

目的调查医院胸外科分离大肠埃希菌qnr基因的携带及其与ISCR之间的相关性,初步探讨ISCR及qnr基因在大肠埃希菌的传播,为临床治疗提供参考依据。方法收集2010年11月-2014年11月分离出120株非重复耐氟喹诺酮类大肠埃希菌,采用PCR法检测qnrA、B、C、D、S基因及ISCR基因,并对阳性菌株进行ISCR与qnr基因的连锁检测,通过DNA直接测序及质粒接合试验确定qnr及ISCR基因的传播性。结果 120株耐氟喹诺酮类大肠埃希菌中对左氧氟沙星耐药78株、对环丙沙星耐药95株,其中有qnrA基因阳性菌株53株,经测序确认均为qnrA1基因,均表现出环丙沙星和左氧氟沙星耐药;基因连锁检测发现,仅43株ISCR-qnrA1连锁检测阳性;43菌株的qnrA1基因可通过接合传播,同时伴随着ISCR1-qnrA1的共同传播。结论胸外科分离大肠埃希菌对氟喹诺酮类耐药严重,主要存在qnr基因传播,并与ISCR1基因之间存在直接的相关性,可通过质粒接合方式进行ISCR1-qnrA1水平连锁传播。     

多重PCR对金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因的检测

目的应用多重PcR检测含Panton-Valentine杀白细胞素（PVL）基因的金黄色葡萄球菌。方法收集我院2005年1月至2006年1月从临床多种标本中分离的金黄色葡萄球菌，用多重PCR同时检测葡萄球菌16SrRNA基因、mecA基因和lukS/F-PV基因。多重PCR检测MRSA的SCCmec基因型及亚型。结果195株金黄色葡萄球菌经多重PCR检测，121株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），74株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA），共检测到26株金黄色葡萄球菌lukS/F-PV基因阳性，阳性率为13．3％（26，195）。其中19株为MRSA，阳性率为15．7％（19／121）；7株为MSSA，阳性率为12．2％（7／74）。19株lukS/F-PV基因阳性的MRSA的SCCmec基因型分别为SCCmec Ⅲ型10株、SCCmecⅢA型4株、SCCmecⅣ型4株及SCCmecⅠ型1株。26株lukS/F-PV基因阳性的分离株有11株分离自脓液或创面分泌物，10株分离自痰标本，3株分离自血液标本，2株分离自尿液。结论在温州地区分离的MRSA和MSSA中都能检测到Panton-Valentine杀白细胞素基因，含Panton-Valentine杀白细胞素基因MRSA的SCCmec基因型主要为SCCmec Ⅲ，含PVL基因的金黄色葡萄球菌主要引起化脓性感染和肺部感染。     

小牛血清甘油低温保存菌种方法介绍

目的 :寻求一种有效易行的菌种保藏方法 ,以适用于繁忙的实验室工作。方法 :选择 1989年 6月购自北京中国药品生物制品检定所的真空冷冻干燥菌株 2 8株 ,用小牛血清甘油液低温保存法与传统的半固体营养琼脂和血琼脂斜面法进行比较。结果 :球菌的复苏情况与杆菌相似 ,保存期 12个月复苏良好 ,生物学性状稳定。比较传统的半固体营养琼脂和血琼脂斜面法 ,大大延长细菌的保存期 ,特别是球菌可以从通常的血琼脂斜面液蜡的 4个月的 37.5 %提高到 14个月的87.5 % ,间隔半年时间冻融 6次以下对菌株继续低温保存影响不大。基质量少 (约 0 .4 m l)冻融时间短 ,菌体受伤程度低 ,有利复苏。复苏增菌不需另配营养基质 ,直接在小牛血清甘油液中进行 ,污染少 ,操作简便。结论 :小牛血清甘油保存菌种对大部分常用细菌保存期可达 12个月以上 ,而且球菌和杆菌差异不大 ,非常适合球菌的保存。